内皮素(ET)是一种含21个氨基酸的多肽,与高血压、糖尿病、癌症等有着密切联系。研究发现内皮素功能异常与内皮素主要受体ETA有关,科研人员通过构建表达载体,实现了ETA基因在细胞中高效表达。其过程如下(图中SNAP基因是一种荧光蛋白基因,限制酶ApaⅠ的识别序列为CCC'GGG,限制酶XhoI的识别序列为C'TCGAG)。据图回答下列问题:
(1)图中ETA基因能够在大肠杆菌细胞内表达的原因是____________。
(2)过程①中需要用________酶处理,过程③中,用两种限制酶切割,获得不同的黏性末端,其主要目的是____________。
(3)图中的基因表达载体至少还缺少________,鉴定ETA基因是否导入受体细胞需要用放射性同位素或荧光分子标记的__________作探针。
(4)已知荧光显微镜可以通过检测荧光的强度来判断SNAP基因是否表达及表达量。因此,利用SNAP基因与ETA基因结合构成融合基因,目的是___________。
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内皮素(ET)是一种含21个氨基酸的多肽,与高血压、糖尿病、癌症等有着密切联系。研究发现内皮素功能异常与内皮素主要受体ETA有关,科研人员通过构建表达载体,实现了ETA基因在细胞中高效表达。其过程如下(图中SNAP基因是一种荧光蛋白基因,限制酶ApaⅠ的识别序列为CCC'GGG,限制酶XhoI的识别序列为C'TCGAG)。据图回答下列问题:
(1)图中ETA基因能够在大肠杆菌细胞内表达的原因是____________。
(2)过程①中需要用________酶处理,过程③中,用两种限制酶切割,获得不同的黏性末端,其主要目的是____________。
(3)图中的基因表达载体至少还缺少________,鉴定ETA基因是否导入受体细胞需要用放射性同位素或荧光分子标记的__________作探针。
(4)已知荧光显微镜可以通过检测荧光的强度来判断SNAP基因是否表达及表达量。因此,利用SNAP基因与ETA基因结合构成融合基因,目的是___________。
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内皮素(ET)是一种含21个氨基酸的多肽,与高血压、糖尿病、癌症等有着密切联系。研究发现内皮素功能异常与内皮素主要受体ETA有关,科研人员通过构建表达载体,实现了ETA基因在细胞中高效表达。其过程如下(图中SNAP基因是一种荧光蛋白基因,限制酶ApaⅠ的识别序列为CCC'GGG,限制酶XhoI的识别序列为C'TCGAG)。据图回答下列问题:
(1)图中ETA基因能够在大肠杆菌细胞内表达的原因是 。
(2)过程①中需要用 酶处理,过程③中,限制酶Xho I切割DNA形成的黏性末端是 。用两种限制酶切割,获得不同的黏性末端,其主要目的是 。
(3)图中的基因表达载体至少还缺少 ,鉴定ETA基因是否导入受体细胞需要用放射性同位素或荧光分子标记的 作探针。
(4)已知荧光显微镜可以通过检测荧光的强度来判断SNAP基因是否表达及表达量。因此,利用SNAP基因与ETA基因结合构成融合基因,目的是 .
(5)人皮肤黑色素细胞上有内皮素的特异受体,内皮素与黑色素细胞膜上的受体结合后,会刺激黒色素细胞的增殖、分化并激活酪氨酸酶的活性,从而使黑色素增加。美容时可以利用注射ETA达到美白祛斑效果,原因是 ,从而抑制了黑色素细胞的增殖和黑色素的形成。
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内皮素(ET)是一种含21个氨基酸的多肽,它有强烈的血管收缩和促进平滑肌细胞增殖等作用。研究发现内皮素功能异常与高血压、糖尿病、癌症等有着密切联系。内皮素主要通过与靶细胞膜上的内皮素受体结合而发挥生物学效应。ETA是内皮素的主要受体,科研人员试图通过构建表达载体,实现ETA基因在细胞中高效表达,为后期ETA的体外研究以及拮抗剂的筛选、活性评价等奠定基础。其过程如下(图中SNAP基因是一种荧光蛋白基因,限制酶ApaⅠ的识别序列为C↓CCGGG,限制酶XhoⅠ的识别序列为C↓TCGAG)。请分析回答:
(1)完成过程①需要的酶是 ;与过程②相比,过程①特有的碱基配对方式是______________。
(2)过程③中,限制酶XhoⅠ切割DNA,使_______键断开,形成目的基因的黏性末端是________。用两种限制酶切割,获得不同的黏性末端,其主要目的是_____________。
(3)过程⑥中,要用________预先处理大肠杆菌,使其处于容易吸收外界DNA的感受态。
(4)利用SNAP基因与ETA基因结合构成融合基因,目的是_________。
(5)人皮肤黑色素细胞上有内皮素的特异受体,内皮素与黑色素细胞膜上的受体结合后,会刺激黑色素细胞的分化、增殖并激活酪氨酸酶的活性,从而使黑色素急剧增加。美容时可以利用注射ETA达到美白祛斑效果,这是因为ETA能与内皮素结合,减少了内皮素与 的结合,抑制了内皮素对黑色素细胞的增殖和黑色素的形成。
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内皮素(ET)是一种含21个氨基酸的多肽,它有强烈的血管收缩和促进平滑肌细胞增殖等作用。研究发现内皮素功能异常与高血压、糖尿病、癌症等有着密切联系。内皮素主要通过与靶细胞膜上的内皮素受体结合而发挥生物学效应。ETA是内皮素的主要受体,科研人员试图通过构建表达载体,实验ETA基因在细胞中高效表达,为后期ETA的体外研究以及拮抗剂的筛选、活性评价等尊定基础。其过程如下(图中SNAP基因是一种荧光蛋白基因,限制酶ApaⅠ的识别序列为C↓CCGGG,限制酶XhoⅠ的识别序列为C↓TCGAG)。请分析回答:
(1)完成过程①需要的酶是 ;与过程②相比,过程①特有的碱基配对方式是 。
(2)过程③中,限制酶XhoⅠ切割DNA;使 键断开,形成的黏性末端是 。用两种限制酶切割,获得不同的黏性末端,其主要目的是 。
(3)过程⑥中,要用 预先处理大肠杆菌,使其处于容易吸收外界DNA的感受态。
(4)利用SNAP基因与ETA基因结合构成融合基因,目的是 。
(5)人皮肤黑色素细胞上有内皮素的特异受体,内皮素与黑色素细胞膜上的受体结合后,会刺激黑色素细胞的分化、增殖并激活酪氨酸酶的活性,从而使黑色素急剧增加。美容时可以利用注射ETA达到美白祛斑效果,试解释: 。
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内皮素(ET)是一种含21个氨基酸的多肽,具有强烈的血管收缩和促进平滑肌细胞增殖等作用,其功能异常与高血压、糖尿病、癌症等有着密切联系.内皮素(ET)主要通过与靶细胞膜上的ET受体(ETA)结合而发挥生物学效应.科研人员通过构建表达载体,实现ETA基因在大肠杆菌细胞中的高效表达,其过程如下图所示,图中SNAP基因是一种荧光蛋白基因,限制酶ApaI的识别序列为,限制酶XhoI的识别序列为 .请据图分析回答:
(1)进行过程①时,需要加入缓冲液、引物、脱氧核苷酸和 酶等.完成过程①②③的目的是 .
(2)过程③和⑤中,限制酶XhoI切割DNA,使 键断开,形成的黏性末端是 .用两种限制酶切割•获得不同的黏性末端,其主要目的是 _.
(3)构建的重组表达载体,目的基因上游的启动子是 的部位,进而可驱动基因的转录.除图中已标出的结构外,基因表达载体还应具有的结构是 .
(4)过程⑥要CaCl2预先处理大肠杆菌,使其成为容易吸收外界DNA的 细胞.
(5)将SNAP基因与ETA基因结合构成融合基因,其目的是有利于检测 .
(6)基因工程操作时可将外源基因整合到叶绿体基因组中,不仅能有效改良植物的品质.还由于叶绿体转基因不会随 (“花粉”或“卵细胞”)传给后代,从而在一定程度上避免转基因作物中的外源基因能扩散到其他同类作物.
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内皮素(ET)是一种含21个氨基酸的多肽。内皮素主要通过与靶细胞膜上的内皮素受体结合而发挥生物学效应。ETA是内皮素的主要受体,科研人员试图通过构建表达载体,实现ETA基因在细胞中高效表达,为后期ETA的体外研究奠定基础。其过程如下(图中SNAP基因是一种荧光蛋白基因,限制酶ApaⅠ的识别序列为C↓CCGGG,限制酶XhoⅠ的识别序列为C↓TCGAG)。请分析回答:
(1)完成过程①需要的酶是____________;
(2)过程③中,限制酶XhoⅠ切割DNA,使__________键断开,形成的黏性末端是__________________。用两种限制酶切割,获得不同的黏性末端,其主要目的是____________________。
(3)过程④中需要 酶,去构建重组质粒。过程⑥中,要用__________预先处理大肠杆菌,使其处于容易吸收外界的DNA。
(4)利用SNAP基因与ETA基因结合构成融合基因,目的是_____________。
(5)人皮肤黑色素细胞上有内皮素的特异受体,内皮素与黑色素细胞膜上的受体结合后,会刺激黑色素细胞的分化、增殖并激活酪氨酸酶的活性,从而使黑色素急剧增加。美容时可以利用注射ETA达到美白祛斑效果,试解释原因:______抑制了内皮素对黑色素细胞的增殖和黑色素的形成。
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生长因子通常是指具有刺激细胞生长的多肽类物质,主要通过与细胞膜上特异性的受体结合,来调节细胞生长及相关的功能。请根据以下提供的实验材料与用具,来研究内皮生长因子(VEGF)和胎盘生长因子(PIGF)对小鼠干细胞分化的影响,完成以下问题。
实验原理:VEGF和PIGF均能促进干细胞生长,干细胞分化后细胞内________会明显增加,可用________来判断干细胞是否分化。
实验材料:怀孕的小鼠,干细胞培养液、VEGF试剂、PIGF试剂、生理盐水、细胞培养瓶、检测试剂盒、CO2培养箱等。
(要求与说明:答题时不考虑加入试剂后的体积变化等误差。)
实验思路:
(1)在 条件下,取出小鼠胚胎的肝脏,用机械法剪碎至1mm3大小的组织块,再用适当的方法获得干细胞悬浮液。
(2)取动物细胞培养瓶,平均分成若干组,并标号,每组设置若干个重复,每个培养瓶 。
(3) 。
(4)在 中培养一段时间后,用试剂盒检测培养液中Akt蛋白含量,统计并分析所得数据。
预测结果:请用柱形图表示支持VEGF试剂和PIGF试剂能共同促进小鼠干细胞分化的实验结果。
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(14分)生长因子通常是指具有刺激细胞生长的多肽类物质,主要通过与细胞膜上特异性的受体结合,来调节细胞生长及相关的功能。请根据以下提供的实验材料与用具,来研究内皮生长因子(VEGF)和胎盘生长因子(PIGF)对小鼠干细胞分化的影响,完成以下问题。
实验原理:
VEGF和PIGF均能促进干细胞生长,干细胞分化后细胞内________会明显增加,可用________判断干细胞是否分化。
实验材料:
怀孕的小鼠,干细胞培养液、VEGF试剂、PIGF试剂、生理盐水、细胞培养瓶、检测试剂盒、CO2培养箱等。(要求与说明:答题时不考虑加入试剂后的体积变化等误差。)
实验思路:
(1)在 条件下,取出小鼠胚胎的肝脏,用机械法剪碎至1mm3大小的组织块,再用适当的方法获得干细胞悬浮液。
(2)取动物细胞培养瓶,平均分成若干组,并标号,每组设置若干个重复,每个培养瓶 。
(3) 。
(4)在 中培养一段时间后,用试剂盒检测培养液中Akt蛋白含量,统计并分析所得数据。
预测结果:请用柱形图表示支持VEGF试剂和PIGF试剂能共同促进小鼠干细胞分化的实验结果。
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肿瘤血管生长是肿瘤生长的关键环节,血管内皮生长因子(VEGF)是一种参与促进肿瘤血管生长的蛋白质,VEGF作为治疗癌症的靶分子受到了很多研究者的关注。
(1)VEGF 的受体存在于血管内皮细胞的_____,可促进血管内皮细胞的_______,形成的细胞最终构成新的血管。
(2)研究者利用噬菌体文库筛选能与VEGF特异性结合的多肽。过程如下。
①将人工合成的编码随机六肽的基因插入噬菌体DNA,形成重组DNA分子,用重组DNA分子转化大肠杆菌,大肠杆菌经培养后裂解,产生噬菌体。这些噬菌体构成一个文库,一个包含所有可能六肽的噬菌体文库至少有____种噬菌体组成,在这些噬菌体中可能有某种六肽能与VEGF特异性结合(图一)。
②将VEGF能够与受体结合的部位固定在微孔容器底部,在微孔中加入随机肽文库,一段时间后用缓冲液洗去不能与VEGF结合的噬菌体,然后用含有_____的缓冲液将结合在微孔底部的噬菌体洗脱下来,这种分子能够与微孔容器底部的分子竞争性结合噬菌体,这说明噬菌体与目标分子的结合是_____(可逆或不可逆)的。
③将洗脱下来的噬菌体转入另一试管,加入_____,经过一段时间振荡培养,产生新一代噬菌体库。
④重复步骤②③多次。
(3)在多轮实验后产生的噬菌体文库比第一代噬菌体文库与VEGF的结合能力更强,文库中噬菌体的种类_____,请分析原因:_____。
(4)欲证明筛选到的多肽X能够起到抑制肿瘤生长的作用,研究者设计了这样的实验:将多肽X溶液注射到⼀只肿瘤模型小鼠体内,(肿瘤型鼠是天然条件下就会产生肿瘤的小鼠品系),检测VEGF与VEGF受体的结合能力。请对该实验做出评价并加以完善___________________________________。测VEGF与VEGF受体的结合能力。请对该实验做出评价并加以完善___________________________________。
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据最新研究发现,内皮素在皮肤中分布不均,是造成色斑的主要原因。内皮素拮抗剂进入皮肤,可以和黑色素细胞膜的受体结合,使内皮素失去作用,这为美容研究机构带来了福音。分析上述材料体现了细胞膜的哪项功能( )
A.细胞膜中磷脂含量越高,功能越复杂 B.细胞膜作为系统的边界,严格控制物质进出细胞
C.细胞膜具有信息交流的功能 D.细胞膜的组成成分主要为磷脂和蛋白质
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