苏云金杆菌是一种对昆虫有毒害作用的细菌，其杀虫活性物质主要是一类伴孢晶体蛋白。伴孢晶体蛋白...

苏云金杆菌是一种对昆虫有毒害作用的细菌，其杀虫活性物质主要是一类伴孢晶体蛋白。伴孢晶体蛋白经昆虫肠液消化成毒性肽，并因此导致昆虫死亡。自1993年培育转基因植物抗虫棉成功后，研究者又将抗虫基因成功地导入水稻细胞中。在培育转基因植物的研究中，抗除草剂基因（bar）常作为标记基因。这样培育出来的转基因水稻既能抗虫又能抗除草剂，便于田间管理。图10为获得转基因水稻的技术流程，请据图回答：

（1）水稻细胞的基因结构与苏云金杆菌有所不同，其主要特点是________________ 。

（2）C过程的水稻细胞经过________________ 形成愈伤组织。

（3）如果抗虫基因在水稻细胞中成功表达，请用中心法则表示该基因的表达过程。

（4）种植上述转基因植物，会造成“基因污染”。谈谈你对基因污染的看法？

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（9分）苏云金杆菌合成的伴孢晶体蛋白经昆虫肠液消化后成毒性肽，可导致昆虫死亡。1993年，我国农科院成功地将苏云金杆菌伴孢晶体蛋白质基因转移到了棉花细胞内，培育出了转基因抗虫棉。

（1）转基因抗虫棉细胞中的抗虫基因通常采用＿＿＿＿＿＿＿＿的方法获得。

（2）如果下图中的标记基因是质粒（作运载体）中唯一的标记基因，那么目的基因不能插入的位点是图中的＿＿＿＿处。（用图中的字母填写）

（3）要使运载体与抗虫基因连接，首先应使用＿＿＿＿＿＿＿＿进行切割。假如运载体被切割后，得到的分子末端序列为，则能与该运载体连接的抗虫基因分子末端是＿＿＿＿＿＿＿＿。采用＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿将运载体与抗虫基因连接，连接后得到的DNA分子称为＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿。

（4）将连接得到的DNA分子导入土壤农杆菌，然后用该菌去感染棉花细胞，利用＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿的表达来检测目的基因已经成功导入。再利用＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿技术将受体细胞诱导成具有抗虫能力的棉花小植株。

（5）基因工程成功的标志是＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿的成功表达。

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2006年新华网郑州5月2日电（记者林嵬）转基因抗虫棉，就是通过生物技术，把一种细菌的遗传物质（DNA）片段转移到棉花里，让棉铃虫一吃就死，具有抗虫性状的棉花。下图表示从苏云金杆菌分离出来的杀虫晶体蛋白质基因（简称Bt基因）及形成转基因抗虫植物的图解，请据图回答问题：

（1）从供体细胞的DNA中直接分离基因最常用的方法是______________。

（2）获得Bt基因后，在连接到运载体上时，常用到的酶是__________。最常用的运载体是质粒，其化学本质是_________。

（3）科学家最初做抗虫棉试验时，虽然检测出棉的植株中含有Bt基因，但棉铃虫并没有被杀死，说明Bt基因还不能在高等植物中________。后来科学家对Bt基因作了适当的修饰，这种对Bt基因所作的修饰发生在__________部位。

（4）欲快速培育大量该抗虫新品种，应采用的技术是________________________，依据的理论基础是_________________________。

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苏云金芽孢杆菌杀虫晶体蛋白（Bt）与豇豆胰蛋白酶抑制剂（CpTI）杀虫机理不同。在转Bt基因作物种植区，发现棉铃虫种群抗性基因频率显著上升。科学家尝试用含有Bt和CpTI两种基因的转双基因烟草对2龄幼虫进行多代抗性筛选。以下叙述错误的是（　　 ）

A.利用DNA分子杂交技术不能检测烟草植株的抗虫性状

B.单基因抗性筛选与双基因抗性筛选导致棉铃虫种群基因库不同

C.种植转双基因烟草可避免棉铃虫产生抗性基因

D.转基因植物的培育和种植应考虑可能造成的生态风险

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下图表示从苏云金芽孢杆菌分离出来的杀虫晶体蛋白质基因（简称Bt基因）及形成转基因抗虫棉的图解。请回答：

（1）图中a过程要用到的酶是　　　　　　　　　　 。

（2）在进行图中b过程时．由我国科学家独创的十分简便经济的方法是　　　　 ，此 外，也经常采用　　　　 法。若要培育转基因绵羊，则此过程要用　　　　　　 的方法。

（3）为确定抗虫棉是否培育成功，既要用放射性同位索标记的　　　　　　　　 作探针进行分子杂交测试，又要在个体水平上鉴定，后者具体过程是　　　　　　　　　 。

（4）活化的毒性物质应是一种　　　　　　　 分子，可以全部或部分嵌合于昆虫的细胞 膜上，使细胞膜产生孔道，导致细胞由于渗透平衡的破坏而破裂。

（5）我国在“863”计划资助下开展Bt抗虫棉、抗虫水稻等研究，可以减少农药、杀虫剂的使用。这将对　　 起到重要作用。

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很久以前科学家在土壤中发现了苏云金杆菌能制造一种对昆虫有毒的蛋白质，当时许多人就想把编码这一蛋白质的基因(抗虫基因)转移到农作物中，以降低昆虫对农作物造成的危害。20 世纪90 年代，美国科学家采用基因工程技术首次培育出抗虫玉米新品种。主要培育过程如图：

（1）常用的MS培养基主要成分包括大量元素即　　________________ 　　 　　　　以及微量元素和　　　　，检验培养基中是否有杂菌污染最有效的方法是　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　 。

（2）苏云金杆菌细胞中产生毒蛋白的场所是　　　　　　　　　 。

（3）目的基因导入后从愈伤组织形成完整植株的途径有两条（如下图），具体通过哪一条途径主要取决于培养基成分中_________

（4）愈伤组织是分化的细胞经过　　　　　　 形成的，具有较高的　　　　　　　 性。

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下图表示从苏云金芽孢杆菌分离出来的杀虫晶体蛋白质基因(简称Bt基因)及形成转基因抗虫棉的图解。请据图回答下面的问题。

(1)图中a过程要用到的酶是_______________________________________。

(2)在进行图中b过程时，由我国科学家独创的十分简便经济的方法是________，此外，也经常采用________法。若要培育转基因绵羊，则此过程要用________的方法。

(3)为确定抗虫棉是否培育成功，既要用放射性同位素标记的________作探针进行分子杂交测试，又要在个体水平上鉴定，后者具体过程是_________________________________________________________________。

(4)活化的毒性物质应是一种________分子，可以全部或部分嵌合于昆虫的细胞膜上，使细胞膜产生孔道，导致细胞由于渗透平衡的破坏而破裂。

(5)我国在“863”计划资助下开展Bt抗虫棉、抗虫水稻等研究，可以减少农药、杀虫剂的使用。这将对________起到重要作用。

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下图表示从苏云金芽孢杆菌分离出来的杀虫晶体蛋白质基因(简称Bt基因)及形成转基因抗虫棉的图解。请据图回答下面的问题。

(1)图中a过程要用到的酶是_______________________________________。

(2)在进行图中b过程时，由我国科学家独创的十分简便经济的方法是________，此外，也经常采用________法。若要培育转基因绵羊，则此过程要用________的方法。

(3)为确定抗虫棉是否培育成功，既要用放射性同位素标记的________作探针进行分子杂交测试，又要在个体水平上鉴定，后者具体过程是_________________________________________________________________。

(4)活化的毒性物质应是一种________分子，可以全部或部分嵌合于昆虫的细胞膜上，使细胞膜产生孔道，导致细胞由于渗透平衡的破坏而破裂。

(5)我国在“863”计划资助下开展Bt抗虫棉、抗虫水稻等研究，可以减少农药、杀虫剂的使用。这将对________起到重要作用。

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抗虫转基因植物中的Bt毒蛋白基因

A．来源于苏云金芽孢杆菌              B．指导合成降低害虫蛋白酶活性的物质

C．指导合成降低害虫淀粉酶活性的物质  D．在植物细胞中指导合成植物凝集素

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Bt毒蛋白基因是从苏云金芽孢杆菌中分离出来的抗虫基因，因其表达产物Bt毒蛋白具有杀虫效果好、安全、高效等优点而成为应用最为广泛的基因。请回答下列有关转基因抗虫植物的问题：

（1）要从苏云金芽孢杆菌中获取Bt毒蛋白基因，可根据Bt毒蛋白基因的部分已知序列， 设计特异性　　　　　　　　　　 ，再利用　　　　　　　　 技术扩增出Bt毒蛋白基因。

（2）构建重组质粒时，常用Ti质粒作为载体，是因为Ti质粒上具有_____，它能把目的基因整合到受体细胞（植株细胞）的______上。这种将基因表达载体导入受体细胞的方法是　　　　　　　　　　　　 法。

（3）要确定抗虫基因导入棉花细胞后，是否赋予了棉花抗虫特性，在个体水平上还需要做________实验；若要检测具有抗虫基因的棉花是否产生了相应毒蛋白，在分子水平上可利用________________方法进行检测。

（4）目前，转基因植物的安全性问题是社会争论的热点。如有些人认为转基因植物的种植会威胁环境安全；但也有人认为转基因植物的种植减少了　　　　　　　　 的使用，有利于减轻污染。面对转基因技术的利弊，我们应持有的正确做法是___　　　　　　　　　　　　　　 ________。

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