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【加试题】回答下列（一）、（二）小题：
（一）回答与泡菜腌制和亚硝酸盐测定有关的问题：
（1）制作泡菜时，为缩短发酵周期，腌制前可加入乳酸菌。取少量酸奶，用无菌蒸馏水稀释后，再用________蘸取少量的稀释液，在 MRS 乳酸菌专用培养基的平板上划线，以获得乳酸菌单菌落。下图所示的划线分离操作，正确的是________。
（2）泡菜腌制过程中，会产生有机酸、醇类和亚硝酸盐，其中醇类是由_______进行厌氧呼吸产生。亚硝酸盐对人体有害，为测定泡菜中亚硝酸盐含量，从泡菜中提取要硝酸盐，与_______ 发生重氮化反应，再与 N-1-萘基乙二胺偶联，形成紫红色产物。然后用光程为 1cm 的_______，在 550nm 光波下测定光密度值，与由一直浓度梯度亚硝酸钠制作的_______比对，计算样品中亚硝酸盐的含量。
（3）已知乳酸菌中的亚硝酸还原酶能降解亚硝酸盐。在一定的腌制时间内，随着腌制时间的延长，泡菜中亚硝酸盐含量逐渐降低，是由于在厌氧和_______环境下亚硝酸盐被亚硝酸还原酶降解。
（二）回答与生态工程有关的问题：
（1）对农作物秸秆多途径利用的基本过程示意图如下，贯穿全过程的核心技术是________技术。其中“过腹还田”的具体途径是________。将秸秆和动物粪便等通过微生物发酵产生沼气，这是利用了农业生态工程中的________技术。
（2）农业生产上，畜牧业依赖和受制于种植业，可以通过种植业和畜牧业的________技术提高经济和社会效益。“退耕还林”后，林地的增加可以减少________，更有利于受损生态系统的恢复。使用农药能有效控制农业害虫，但也使生态系统的________减少，因此利用生物的________进行生物防治是今后的发展方向。
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【加试题】回答下列（一）、（二）小题：
（一）回答与泡菜腌制和亚硝酸盐测定有关的问题：
（1）制作泡菜时，为缩短发酵周期，腌制前可加入乳酸菌。取少量酸奶，用无菌蒸馏水稀释后，再用________蘸取少量的稀释液，在 MRS 乳酸菌专用培养基的平板上划线，以获得乳酸菌单菌落。下图所示的划线分离操作，正确的是________。
（2）泡菜腌制过程中，会产生有机酸、醇类和亚硝酸盐，其中醇类是由_______进行厌氧呼吸产生。亚硝酸盐对人体有害，为测定泡菜中亚硝酸盐含量，从泡菜中提取要硝酸盐，与_______ 发生重氮化反应，再与 N-1-萘基乙二胺偶联，形成紫红色产物。然后用光程为 1cm 的_______，在 550nm 光波下测定光密度值，与由一直浓度梯度亚硝酸钠制作的_______比对，计算样品中亚硝酸盐的含量。
（3）已知乳酸菌中的亚硝酸还原酶能降解亚硝酸盐。在一定的腌制时间内，随着腌制时间的延长，泡菜中亚硝酸盐含量逐渐降低，是由于在厌氧和_______环境下亚硝酸盐被亚硝酸还原酶降解。
（二）回答与生态工程有关的问题：
（1）对农作物秸秆多途径利用的基本过程示意图如下，贯穿全过程的核心技术是________技术。其中“过腹还田”的具体途径是________。将秸秆和动物粪便等通过微生物发酵产生沼气，这是利用了农业生态工程中的________技术。
（2）农业生产上，畜牧业依赖和受制于种植业，可以通过种植业和畜牧业的________技术提高经济和社会效益。“退耕还林”后，林地的增加可以减少________，更有利于受损生态系统的恢复。使用农药能有效控制农业害虫，但也使生态系统的________减少，因此利用生物的________进行生物防治是今后的发展方向。
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回答下列 （一）、（二）小题：
（一）回答与泡菜腌制和亚硝酸盐测定有关的问题：
（1）制作泡菜时，为缩短发酵周期，腌制前可加入一些雪“陈泡菜汁”，这相当于加入了一些经过___________的发酵菌种；还可以采取用热水短时间浸泡蔬菜的手段，此项措施能缩短发酵时间的原因是___________________________________________________。
（2）泡菜腌制过程中，会产生有机酸、醇类和亚硝酸盐，其中醇类是由假丝酵母进行________________ 呼吸产生的。腌制过程需要控制时间、温度和食盐的用量。食盐过量会导致“咸而不酸”，原因是_____________。
（3）家庭制作泡菜过程并没有实行严格的无菌操作就能成功，请解释原因？_____________________________________ 。
（4）亚硝酸盐对人体有害，而它在泡菜的腌制过程中有先增后减的变化规律，所以需要测定其含量来确定泡菜的可食用时间，通常应用光电比色法进行亚硝酸盐的定量。泡菜样品处 理环节加硫酸锌是为了_____________________； 氢氧化钠用来________________；样品测定时加 60%乙酸创设了显色反应所需要的酸性环境；样品及亚硝酸盐标准溶液加显色剂后需要_____________________________25min， 使用相同光程的比色杯在 550nm 光波条件下测 OD 值。
（二）回答与基因工程和生物克隆有关的问题：
MseⅠ、PstⅠ、EcoRⅠ三种限制酶的识别序列及切割位点分别是 GAAT↓TAATTC、C↓TGCAG、G↓AATTC，如图 1、图 2 中箭头表示相关限制酶的酶切点。图 3 表示利用基因工程生产胰岛素的三种途径。图 4 表示改造哺乳动物遗传特性的三种途径。请据图回答问题。
（1）若要用如图 1 和图 2 中的质粒和外源 DNA 构建重组质粒，需要对质粒进行改造，构 建新的限制酶切位点。在构建新的限制酶切位点的过程中需要使用___________、DNA 连接酶和DNA 聚合酶等工具酶。
（2）图 3 中的转基因羊通常被称为生物反应器，它基于基因工程技术，将外援基因导入其基因组并_______________，生产价格低廉的蛋白质药物，具有光明的发展前景。导入受体细胞B 常用方法是_________， ④过程也可以培养到______________，再从培养液中提取。导入受体细胞C 首先使用Ca2+处理使其吸收周围的 DNA 分子，之后将细胞 C 与图中 M 溶于_________中，完成转化过程。
（3）图 4 中获得动物 1 的受体细胞通常是___________。根据图示操作步骤推测动物 2 与动物 3 的不同在于____________________________________。
（4）干细胞科技发展至今，已进入以脐带、胎盘等组织为主要干细胞来源的全新时代。目前国内干细胞临床研究超过半数采用脐带或胎盘干细胞。利用胎盘干细胞具有发育全能性的特点，临床上可以用于_____________________，从而挽救患者的生命。
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回答与泡菜腌制和亚硝酸盐测定有关的问题：
（1）制作泡菜时，为缩短发酵周期，腌制前可加入乳酸菌。取少量酸奶，用无菌蒸馏水稀释后，再用________蘸取少量的稀释液，在MRS 乳酸菌专用培养基的平板上划线，以获得乳酸菌单菌落。下图所示的划线分离操作，正确的是________。
（2）泡菜腌制过程中，会产生有机酸、醇类和亚硝酸盐，其中醇类是由_______进行厌氧呼吸产生。亚硝酸盐对人体有害，为测定泡菜中亚硝酸盐含量，从泡菜中提取亚硝酸盐，与_______发生重氮化反应，再与N-1-萘基乙二胺偶联，形成紫红色产物。然后用光程为1cm 的_______，在550nm 光波下测定光密度值，与由一直浓度梯度亚硝酸钠制作的_______比对，计算样品中亚硝酸盐的含量。
（3）已知乳酸菌中的亚硝酸还原酶能降解亚硝酸盐。在一定的腌制时间内，随着腌制时间的延长，泡菜中亚硝酸盐含量逐渐降低，是由于在厌氧和_______环境下亚硝酸盐被亚硝酸还原酶降解。
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下列关于泡菜腌制及亚硝酸盐含量测定实验的叙述，不正确的是（ )
A. 制作时加入陈泡菜汁会缩短泡菜腌制时间
B. 乳酸菌产生的乳酸不利于其菌种优势的保持
C.发酵装置密封是泡菜制作成功的关键
D. 与标准溶液比较估测泡菜中的亚硝酸盐含量
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下列关于泡菜腌制及亚硝酸盐含量测定实验的叙述，不正确的是（ )
A. 制作时加入陈泡菜汁会缩短泡菜腌制时间
B. 乳酸菌产生的乳酸不利于其菌种优势的保持
C.发酵装置密封是泡菜制作成功的关键
D. 与标准溶液比较估测泡菜中的亚硝酸盐含量
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关于泡菜腌制和亚硝酸盐含量测定实验，下列叙述错误的是
A.制作时加入陈泡菜汁会缩短泡菜腌制时间
B.泡菜腌制过程中起主要作用的是假丝酵母和乳酸菌
C.亚硝酸盐与N-1-萘基乙二胺盐酸盐偶联形成紫红色产物
D.泡菜样品处理时加硫酸锌、NaOH等使杂质沉淀
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【加试题】回答下列（一）、（二）小题。
(一）泡菜是人们喜爱的食品，但在腌制的过程中会产生一定量的亚硝酸盐，危害人们的健康。研究人员检测了不同浓度的食盐、不同发酵阶段的泡菜中的亚硝酸盐含量，结果如下图所示。
请回答：
（1）制作泡菜时如希望发酵快一些，可将蔬菜放在___________中浸泡1分钟后入坛。发酵坛中还可加一些白酒，加白酒的目的是增加醇香感和___________。
（2）据图分析，下列叙述错误的是（_____）
A.腌制泡菜的最佳食盐用量约为5% B.过多的食盐可能会抑制发酵作用
C.腌制初期泡菜的亚硝酸盐含量上升 D.食用泡菜最安全的是腌制后3〜9天
（3）在利用光电比色法测定泡菜亚硝酸盐含量时，在样品溶液中加入显色剂会生成_______________色产物。绘制标准曲线时，可以亚硝酸钠的质量为横坐标，以_________为纵坐标。对样品和标准溶液的测定中，要用光程相同的__________________。
(二）我国目前临床使用的乙肝疫苗大多为基因工程疫苗，其有效成分是一种叫做乙肝表面抗原的蛋白质（S蛋白），对应的基因为s基因。请回答：
（1）在构建重组DNA分子时，要用限制性核酸内切酶处理_________，并用_________酶使两者结合。将重组DNA分子导入到哺乳动物细胞，经筛选得到工程细胞。
（2）在细胞培养过程中，工程细胞在生长过程中有_________现象，需要定期使用_________酶处理，以便于分瓶培养。
（3）为提髙工程细胞培养的成功率，下列措施中不幸采用的是（_____）
A.取单个细胞进行培养 B.加入胰岛素
C.二氧化碳培养箱 D.加入动物血清
（4）由于哺乳动物细胞培养较难，成本较高，近些年科学家们又发明了“乳腺生物发生器”，进而从转基因动物的乳汁中提取所需产品。在这种技术中，作为重组DNA分子受体细胞的一般是__________________。
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请回答泡菜制作、亚硝酸盐含量的测定、果汁的制作及血红蛋白的提取和分离等的相关问题：
（1）泡菜腌制过程中若温度过高、食盐用量过低、腌制时间过短，容易造成___________________________。（答出两点）
（2）在测定亚硝酸盐含量的步骤中，样品处理液的制备需要用到氢氧化铝乳液，其作用是__________________。
（3）果胶酶包括___________、果胶分解酶和果胶酯酶等，能够分解果胶，瓦解____，使榨取果汁变得更容易，而果胶分解成可溶性的________________，使浑浊的果汁变的澄清。
（4）在血红蛋白的提取和分离实验中，洗涤好的红细胞需先后加入_______________，使红细胞破裂，释放血红蛋白。分离血红蛋白溶液时，离心后自上而下第三层的红色透明液体是____________________。
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泡菜是一种以湿态发酵方式加工制成的食品，鲜嫩清脆、风味可口，可以增进食欲，帮助消化与吸收，但是腌制食品含有较多的亚硝酸盐，因此应尽量少吃腌制食品，多吃新鲜蔬菜。回答下列有关生物技术的问题。
（1）膳食中的绝大部分亚硝酸盐在人体内以“过客”的形式随尿排出，只有在适宜的pH、温度和一定的 ___作用下，才会转变成致癌物亚硝胺。测定泡菜中亚硝酸盐的含量常采用 ___法。
（2）大规模生产优质泡菜时，需先获得优质的乳酸菌种，若要从陈泡菜水中分离、纯化乳酸菌单菌落需在液体培养基中加入____（填物质名称）。将获得的乳酸菌单菌落在适宜的液体培养基中大量培养，通过稀释涂布平板法计数培养液中的活菌时，每隔24 h统计一次菌落数目，应选取___ 时的记录作为结果，这样可以防止____。
（3）乳酸菌进行乳酸发酵时，首先将糖类转化为丙酮酸，再在乳酸脱氢酶的参与下将丙酮酸转化为乳酸。若要从乳酸菌中分离、纯化获得乳酸脱氢酶，可采用_____法，该方法分离蛋白质的依据是____。判断上述方法纯化的蛋白质是否达到要求，还需要进行蛋白质纯度的鉴定，在鉴定的方法中，使用最多的是____。
—淀粉酶可以通过培养枯草杆菌来生产， 是筛选高表达量菌株的最简便方法之一。筛选出的菌株在发酵生产之前还需利用 培养基进行扩大培养。