植酸酶能降低饲料中的植酸而提高磷、锌、钙和铁等的利用率，从而改善动物对矿物质的吸收。在饲料...

植酸酶能降低饲料中的植酸而提高磷、锌、钙和铁等的利用率，从而改善动物对矿物质的吸收。在饲料加工业是一种新型的饲料添加剂。以下是科研人员从土壤微生物中分离相关微生物，提取植酸酶的过程示意图。

(1)培养基中除了添加植酸钙(不溶于水)以外，还应含有_________________________、水、无机盐等基本营养物质，该培养基属于____________________________培养基。

(2)为防止杂菌污染，要对培养基和培养皿等进行_______________________，而且须将接种后的培养皿呈________________________________状态放置。

（3）图中所采用的接种方法是_____________________，实验结果显示A～E五种菌株中，___________是产植酸酶的理想菌株。

(4)获得目的菌以后，若要用于生产，还需要进行______________________。从微生物的多种蛋白质中提取植酸酶可采用_________________________方法。

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饲养动物常用的植物饲料中含有难溶的植酸钙等物质，很难被动物吸收利用，还影响对其他营养物质的利用。若在饲料中添加植酸酶，则能催化其水解成为可以吸收利用的磷酸盐等。以下是科研人员从作物根部土壤中分离产植酸酶的菌株的过程示意图。请分析作答。

（1）培养基中除了添加植酸钙以外，应含有　　　　　　　　　　 、　　　　　　　　　　 、水、无机盐等基本营养物质。

（2）为防止杂菌污染，要对培养基和培养皿等进行　　　　，而且须将接种后的培养皿呈　　　　状态放置。

（3）接种以前进行的一系列操作，目的是在培养皿表面形成　　　　　　　　　　 。根据土壤样品的稀释倍数和接种稀释液的体积，统计平板上的　　　　　　　　 就能大致推测出样品中的活菌数。

（4）由于植酸钙的不溶解性，使培养基中形成白色浑浊。产植酸酶的菌株会水解植酸钙，菌落的周围将形成透明的区域，根据透明区域的有无，可初步判断该菌是否产植酸酶。实验结果显示A～E五种菌株中，　　 是产植酸酶的理想菌株。

（5）获得目的菌以后，若要用于植酸酶的生产，还需要进行　　　　　　　　　　　　　　　　　　 。

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饲养动物常用的植物饲料中含有难溶的植酸钙等物质，很难被动物吸收利用，还影响对其他营养物质的利用。若在饲料中添加植酸酶，则能催化其水解成为可以吸收利用的磷酸盐等。以下是科研人员从作物根部土壤中分离产植酸酶的菌株的过程示意图。请分析作答。

（1）培养基中除了添加植酸钙以外，应含有　　　　　　　　　 、　　　　　　　　　 、水、无机盐等基本营养物质。

（2）为防止杂菌污染，要对培养基和培养皿等进行　　　　，而且须将接种后的培养皿呈　　　　状态放置。

（3）接种以前进行的一系列操作，目的是在培养皿表面形成　　　　　　　　　 。根据土壤样品的稀释倍数和接种稀释液的体积，统计平板上的　　　　　　　　 就能大致推测出样品中的活菌数。

（4）由于植酸钙的不溶解性，使培养基中形成白色浑浊。产植酸酶的菌株会水解植酸钙，菌落的周围将形成透明的区域，根据透明区域的有无，可初步判断该菌是否产植酸酶。实验结果显示A～E五种菌株中，　　 是产植酸酶的理想菌株。

（5）获得目的菌以后，若要用于植酸酶的生产，还需要进行　　　　　　　　　　　　　　　　　 。

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饲养动物常用的植物饲料中含有难溶的植酸钙等物质，很难被动物吸收利用，还影响对其他营养物质的利用．若在饲料中添加植酸酶，则能催化其水解成为可以吸收利用的磷酸盐等．以下是科研人员从作物根部土壤中分离产植酸酶的菌株的过程示意图．请分析作答．

（1）培养基中除了添加植酸钙以外，应含有 碳源 、 氮源 、水、无机盐等基本营养物质．

（2）为防止杂菌污染，要对培养基和培养皿等进行 灭菌 ，而且须将接种后的培养皿呈 倒置 状态放置．

（3）接种以前进行的一系列操作，目的是在培养皿表面形成 单个菌落 ．根据土壤样品的稀释倍数和接种稀释液的体积，统计平板上的 菌落数 就能大致推测出样品中的活菌数．

（4）由于植酸钙的不溶解性，使培养基中形成白色浑浊．产植酸酶的菌株会水解植酸钙，菌落的周围将形成透明的区域，根据透明区域的有无，可初步判断该菌是否产植酸酶．实验结果显示A～E五种菌株中， E 是产植酸酶的理想菌株．

（5）获得目的菌以后，若要用于植酸酶的生产，还需要进行 扩大培养 ．

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【生物——选修1：生物技术实践】

饲养动物常用的植物饲料中含有难溶的植酸钙等物质，很难被动物吸收利用，还影响对其他营养物质的利用。若在饲料中添加植酸酶，则能催化其水解称为可以吸收利用的磷酸盐等。以下是科研人员从作物根部土壤中分离产植酸酶的菌株的过程示意图。请分析作答。

（1）分离产植酸酶的菌株，需先配制合适的培养基。配制培养基时，在各成分都融化后和分装前，要进行的是___________和灭菌。对培养基进行灭菌的常用方法是_________________。

（2）接种以前进进行的一系列稀释操作，目的是在固体培养基表面形成__________。这种接种方法是__________。根据土壤样品的稀释倍数和接种稀释液的体积，统计平板上的__________就能大致推测出样品中的活菌数。如果一培养基上有3个菌落，则1g土壤中大致的活菌数量是___________个。

（3）由于植酸钙的不溶解性，使培养基中形成白色浑浊。产植酸酶的菌株会水解植酸钙，菌落的周围将形成透明的区域，根据透明区域的有无，可初步判断该菌是否产植酸酶。实验结果显示A～E五种菌株中，___________是产植酸酶最理想的菌株。

（4）植酸酶的活力可用___________________的量来表示。

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回答下列有关微生物的问题

饲养动物常用的植物饲料中含有难溶的植酸钙等物质，很难被动物吸收利用，还影响对其他营养物质的利用。若在饲料中添加植酸酶，则能催化其水解为可以吸收利用的磷酸盐等。下图是从作物根部土壤中分离产植酸酶的菌株的过程，图中①~⑤表示操作过程.

1．在接种前进行了图中①~④系列操作的目的是________。

2．为了方便筛选出产植酸酶的菌株，在配制培养基时，还应添加的物质是________。在配制过程中将培养基分装到三角烧瓶中后，用两层牛皮纸扎紧瓶口后置于高压灭菌锅中，在________条件下灭菌。

3．写出图中过程⑤操作的注意事项

4．据图分析推测1g土壤中大致的活菌数量是________。（2分）

5．实验结果显示A~E五种菌株中，________是产植酸酶的理想菌株，原因是

________。（2分 ）

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（2013•徐州模拟）饲养动物常用的植物饲料中含有难溶的植酸钙等物质，若在饲料中添加植酸酶，则能催化其水解为可以吸收利用的磷酸盐等．如图是从作物根部土壤中分离产植酸酶的菌株的过程，图中①～⑤表示操作过程．下列说法正确的是（　 ）

A.通过图中①～④逐渐稀释，目的是获得单个菌落

B.图中培养基从功能讲属于选择培养基

C.高压灭菌锅灭菌的要求是100℃1.05kg/cm2

D.实验结果显示产植酸酶的理想菌株是A菌株

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植酸酶有多种，能分解动物饲料中的植酸，增加对磷的吸收和利用，并降低动物粪便对环境的污染。土壤中的某些微生物能分泌植酸酶，请回答下列问题：

（1）配制10-1〜10-5梯度浓度的土壤溶液时，先在5支离心管中各加入____________mL的无菌水，然后用移液管移取0.lmL土壤溶液的上清液，注入到第1个离心管中，配成10-1的土壤溶液。用移液管依次移取0.lmL溶液注入下一支离心管中。取0.lmL各浓度的土壤溶液并分别接种到5组固体培养基上，这种接种方法为__________。

（2）为筛选能分泌植酸酶的微生物，可用葡萄糖、蛋白胨、NH4N03、琼脂、不溶性的植酸钙（白色）等制备培养基，其中蛋白胨为微生物的生长提供_________。培养结束后，可根据________筛选出产植酸酶菌落。检查发现，酵母菌和霉菌都能产生植酸酶，与酵母菌相比，霉菌菌落的形态特点是__________。

（3）纯化后，对一株酵母菌及一株霉菌分泌的植酸酶进行测定，结果如下表：

分析表中数据，研究人员认为，产自酵母菌及霉菌的植酸酶不是同一种酶，理由是________；若考虑动物胃内环境，宜用酵母菌作饲料添加剂，依据是__________________。

（4）植酸酶是一类胞外酶，酵母菌细胞内植酸酶合成与加工过程依次经过的细胞器有________________。

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植酸酶能提高饲料中磷的利用率，减少磷随畜禽粪便排出，进而降低环境污染。科学家试图将黑曲霉植酸酶基因（phyA）转入猪细胞中，以培育出转植酸酶基因猪。下图为实验过程中基因表达载体的构建过程，图中A、A1、B、B1表示引物，NheⅠ（G↓CTAGC）、XhoⅠ（C↓TCGAG）为限制酶切点。试回答下列问题。

（1）实验室通常是利用从黑曲霉细胞中提取的RNA，再通过反转录形成pyhA对应的__________，从基因结构分析，它比黑曲霉细胞中的pyhA少了__________等结构（至少写两个）。

（2）由图可知，科学家首先将黑曲霉植酸酶基因pyhA与猪腮腺分泌蛋白基因信号肽基因（ps）拼接在一起，其目的是__________。实验室中，过程②（解链）一般可通过__________方法完成，利用_______将这两个DNA片段连接起来。

（3）限制酶XhoⅠ切割DNA形成的粘性末端可以表示为__________。过程④中同时利用NheⅠ酶和XhoⅠ酶处理目的基因和运载体，其主要优点是____________________。

（4）研究中需要将重组质粒导入__________，再运用胚胎工程技术培育获得转基因猪，选取这类细胞作为目的基因受体细胞的主要依据是__________。

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植酸酶能提高饲料中磷的利用率，减少磷随畜禽粪便排出，进而降低环境污染。科学家试图将黑曲霉植酸酶基因（phyA）转入猪细胞中，以培育出转植酸酶基因猪。下图为实验过程中基因表达载体的构建过程，图中A、A1、B、B1表示引物，NheⅠ（G↓CTAGC）、XhoⅠ（C↓TCGAG）为限制酶切点。试回答下列问题。

（1）实验室通常是利用从黑曲霉细胞中提取的RNA，再通过反转录形成pyhA对应的__________，从基因结构分析，它比黑曲霉细胞中的pyhA少了__________等结构（至少写两个）。

（2）由图可知，科学家首先将黑曲霉植酸酶基因pyhA与猪腮腺分泌蛋白基因信号肽基因（ps）拼接在一起，其目的是__________。实验室中，过程②（解链）一般可通过__________方法完成，利用_______将这两个DNA片段连接起来。

（3）限制酶XhoⅠ切割DNA形成的粘性末端可以表示为__________。过程④中同时利用NheⅠ酶和XhoⅠ酶处理目的基因和运载体，其主要优点是____________________。

（4）研究中需要将重组质粒导入__________，再运用胚胎工程技术培育获得转基因猪，选取这类细胞作为目的基因受体细胞的主要依据是__________。

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