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（6分）回答下列有关动物细胞培养的问题：
（1）动物细胞培养的原理是 。
（2）在动物细胞培养过程中，当贴壁细胞分裂生长到细胞表面相互接触时，细胞会停止分裂增殖，这种现象称为细胞的 。
（3）随着细胞传代次数的增多，绝大部分细胞分裂停止，但极少数细胞可以连续增殖，其中有些细胞会因遗传物质发生改变而获得了不死性，该种细胞的黏着性 ，细胞膜表面糖蛋白的量 。
（4）现用某种大分子染料，对细胞进行染色时，观察到被染色的细胞应该是 （填写“活细胞”或“死细胞”）。
（5）检查某种毒物是否能改变细胞染色体的数目，需要用显微镜观察有丝分裂 期的细胞。
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近十年来，动物细胞工程发展出一系列的技术，运用所学知识回答下列问题。（１）动物细胞培养的原理是_____________________。在动物细胞培养时，应在含5%CO2的恒温培养箱中进行，CO2的作用________ ____________________。
（２）克隆动物是通过________________技术得到的，原理是______________________ 。
(３）已知IgG抗体能消除狂犬病病毒。特异性IgG抗体获取也可用单克隆抗体制备法，下面是单克隆抗体的制备过程示意图，请回答下列问题。
①从小鼠的脾脏中取得B淋巴细胞之前，给小鼠注射的物质A是__________________，从免疫学角度分析，该过程发生了_________________免疫。
②图中HAT培养基的作用是__________________ 。
③B过程的目的是__________。
④单克隆抗体与常规的血清抗体相比，最大的优越性是_________________ 和_________________。
⑤由图中可看出，单克隆抗体制备过程运用了__ ____________和________________________的动物细胞工程技术手段。
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十年来，动物细胞工程发展出一系列的技术，运用所学知识回答下列问题。
（1）动物细胞融合、生产单克隆抗体等技术的基础是____________________。
（2）动物细胞培养的原理是________________________________________。
（3）克隆动物是通过__________方法得到的，供体细胞一般都选择传代10代以内的细胞，原因是____________________________________________________________。
（4）已知IgG抗体能消除狂犬病病毒。特异性IgG抗体获取也可用单克隆抗体制备法，下面是单克隆抗体的制备过程示意图，请回答下列问题。
①从小鼠的脾脏中取得B淋巴细胞之前，给小鼠注射的物质A是__________。
②动物细胞融合除了采用植物原生质体融合常用的诱导方法外，还可以采用灭活的病毒。从分子水平解释灭活的病毒作用机理是____________________________________ __ 。
③根据培养基的用途分类，图中HAT培养基属于__________培养基。
④B过程的目的是__________。
⑤单克隆抗体与常规的血清抗体相比，最大的优越性是____________________、___________________。
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现有甲、乙两种可能有一定毒性的化学物质，实验室研究人员欲通过动物细胞培养的方法来鉴定它们是否有毒性并比较二者毒性的强弱。请你以一个研究人员的身份参与此项研究，完成下列有关问题：
Ⅰ．实验原理：________。
根据这种变异细胞占全部培养细胞的百分数（以下称Q值），可判断该化学物质的毒性。
Ⅱ．材料用具：活的小白鼠胚胎、胰蛋白酶液、动物细胞培养液、动物细胞固定液、适宜浓度的龙胆紫溶液、适宜浓度的化学物质甲溶液、适宜浓度的化学物质乙溶液、蒸馏水、滴管、培养皿、剪刀、锥形瓶、恒温箱、载玻片、盖玻片、显微镜、小白鼠正常有丝分裂各时期的高倍显微照片。
Ⅲ．实验步骤：
（1）制备细胞悬浮液。
把活的小白鼠胚胎放在培养皿中剪碎，转入锥形瓶中，加入胰蛋白酶液处理，使胚胎组织离散成单个细胞，再加入动物细胞培养液，制成细胞悬浮液。
（2）进行细胞培养。
①取A、B、C 3个洁净的培养瓶，________；
②A、B两个培养瓶中分别加入等量的甲、乙溶液。C瓶中加入等量的蒸馏水，摇匀；
③ ________
（3）制作临时装片。
①当细胞增殖到大约8代左右时，同时从恒温箱中取出3个培养瓶，用胰蛋白酶液处理，加入动物细胞固定液，迅速杀死细胞并固定细胞分裂相；
②静置一段时间后，分别从各培养瓶底部吸取适量的细胞悬浮液，滴在与培养瓶有相同编号的载玻片的中央，________，3min~5min后，盖上盖玻片。
（4）镜检和统计。
把临时装片放在显微镜下，先用低倍镜后用高倍镜，寻找处于________期的细胞，并与________进行对比，统计并计算该期变异的细胞占该期细胞总数的百分数（Q值）。
Ⅳ．结果分析与结论：
（1）经研究人员实验得知，A、B、C三个培养瓶的Q值依次为：QA=1.3%，QB=12.5%，QC=0.1%，由此可知该实验的结论是 。
（2）在实验中，C培养瓶起________作用，C瓶的Q值说明________。
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某研究小组进行药物试验时，以动物肝细胞为材料，测定药物对体外培养细胞的毒性。供培养的细胞有甲、乙两种，甲细胞为肝肿瘤细胞，乙细胞为正常肝细胞。请回答下列有关动物细胞培养的问题：
（1）在动物细胞培养时，通常在合成培养基中加入适量 。细胞培养应在含5%CO2的恒温培养箱中进行，CO2的作用是 。
（2）在两种细胞生长过程中，当乙细胞铺满瓶壁时，其生长 。若用动物的肝脏组织块制备肝细胞悬液，需用 消化处理。
（3）为了防止细胞培养过程中细菌的污染，可向培养液中加入适量的 。
（4）已知癌基因X过量表达与肝肿瘤的发生密切相关，要试验一种抗肿瘤药物Y对甲细胞生长的影响，可将甲细胞分为A、B两组，A组细胞培养液中加入 ，B组细胞培养液中加入等量无菌生理盐水，经培养后，从A、B两组收集等量细胞，通过分别检测X基因在A、B两组细胞中的 合成水平的差异，确定Y的药效。
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（共9分，每空1分）回答下列有关动物细胞培养的问题：
（1）在动物细胞培养过程中，当贴壁细胞分裂生长到细胞表面相互接触时，细胞会停止分裂增殖，这种现象称为细胞的 。此时，瓶壁上形成单层细胞，这种单层培养法的出现，对细胞培养的发展起了很大的推动作用。
（2）随着细胞传代次数的增多，绝大部分细胞分裂停止，但极少数细胞克服细胞寿命的自然极限，获得 ，朝着等同于癌细胞的方向发展，该种细胞由于细胞膜上 减少，导致细胞间的黏着性 。
（3）在动物细胞体外培养过程中，一般要满足四个方面的条件：无菌、无毒的环境、营养、温度和pH和气体环境，其中在培养液中添加 ，以防培养过程中的污染；由于人们对细胞所需的营养物质还没有完全搞清楚，故在使用合成培养基时，通常需加入 等天然成分；气体环境主要是提供细胞所需的O2和CO2，其中O2的作用是 ，CO2的作用是 。
（4）动物细胞培养可用于检测某种物质的毒性大小，若用被检测物质培养的细胞与对照组相比，发生变异的细胞数目所占的百分比大，则该物质的毒性大，判断的依据是 。
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（10分）回答下列有关动物细胞工程的相关问题
（1）动物细胞培养的流程：取动物组织块（动物胚胎或幼龄动物的器官或组织）→剪碎→用＿＿＿＿＿酶处理分散成单个细胞→制成＿＿＿＿＿→转入培养瓶中进行原代培养→贴满瓶壁的细胞用＿＿＿＿＿酶处理分散成单个细胞继续＿＿代培养。在此过程中，当贴壁细胞分裂生长到表面相互抑制时，细胞就会停止分裂增殖，这种现象称为细胞的＿＿＿＿＿。
（2）动物细胞培养需要满足以下条件：
①＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿；
②营养：在合成培养基中通常需加入＿＿＿＿等天然成分。
③适宜＿＿＿＿；
④气体环境：95%空气＋5%CO2。O2是细胞代谢所必需的，CO2的主要作用是＿＿＿＿＿＿＿＿。
（3）动物细胞融合的意义：使＿＿＿＿＿成为可能，成为研究细胞遗传、细胞免疫、肿瘤和生物生物新品种培育的重要手段。
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（9分）某研究小组进行药物试验时，以动物肝细胞为材料，测定药物对体外培养细胞的毒性。供培养的细胞有甲、乙两种，甲细胞为肝肿瘤细胞，乙细胞为正常肝细胞。请回答下列有关动物细胞培养的问题：
（1）将数量相等的甲细胞和乙细胞分别置于培养瓶中培养，培养液及其它培养条件均相同。一段时间后，观察到甲细胞数量比乙细胞数量_________。
（2）在动物细胞培养时，为了补充合成培养基中缺乏的物质，通常在合成培养基中加入适量的 。细胞培养应在含5%CO2的恒温培养箱中进行，CO2的作用是___________________。
（3）在两种细胞生长过程中，当乙细胞铺满瓶壁时，其生长____________。药物试验需要大量细胞，两种细胞频繁传代，甲细胞比乙细胞可以传代的次数更_______。若用动物的肝脏组织块制备肝细胞悬液，需用___________消化处理。
（4）已知癌细胞X过量表达与肝肿瘤的发生密切相关，要试验一种抗肿瘤药物Y对甲细胞生长的影响，可将甲细胞分为A．B两组，A组细胞培养液中加入___________，B组细胞培养液中加入无菌生理盐水，经培养后，从A．B两组收集等量细胞，通过分别检测X基因在A．B两组细胞中的________或_______合成水平的差异，确定Y的药效。
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（14分）某研究小组进行药物试验时，以动物肝细胞为材料，测定药物对体外培养细胞的毒性。供培养的细胞有甲、乙两种，甲细胞为肝肿瘤细胞，乙细胞为正常肝细胞。请回答下列有关动物细胞培养的问题：
（1）将数量相等的甲细胞和乙细胞分别置于培养瓶中培养，培养液及其它培养条件均相同。一段时间后，观察到甲细胞数量比乙细胞数量 ，因为甲具有 特点。
（2）动物细胞培养时，常在合成培养基中加入适量血清，其原因是 。细胞培养应在含5% CO2的恒温培养箱中进行，CO2的作用是________。
（3）在两种细胞生长过程中，当乙细胞铺满瓶壁时，其生长 。药物试验需要大量细胞，两种细胞频繁传代，甲细胞比乙细胞可以传代的次数更 。若用动物的肝脏组织块制备肝细胞悬液，需用 消化处理。
（4）为了防止细胞培养过程中细菌的污染，可向培养液中加入适量的 。如细胞培养过程中要保存细胞，则通常在 条件下，因为在这种条件下，细胞中 ________ 的活性降低，细胞 的速率降低。
（5）已知癌基因X过量表达与肝肿瘤的发生密切相关，要试验一种抗肿瘤药物Y对甲细胞生长的影响，可将甲细胞分为A、B两组，A组细胞培养液中加入 ，B组细胞培养液中加入无菌生理盐水，经培养后，从A、B两组收集等量细胞，通过分别检测X基因在A、B两组细胞中的 或 合成水平的差异，确定Y的药效。
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下面两幅图分别是植物体细胞杂交和动物细胞培养过程示意图，请据图回答下列问题：
（1）图甲中，过程b用到的原理是_________。植物细胞融合成功的标志是_______。植物体细胞杂交的意义是_________________。
（2）过程d的原理是______________，从培养条件而言，过程d与图乙过程的共同点是______________（答出两点即可），两过程中细胞分裂的方式______________（填“相同”或“不相同”）
（3）图乙中，①过程是动物组织消化后的初次培养，称之为_______________，在培养时要求培养瓶或培养皿的内表面光滑、无毒，易于________________。
（4）当贴壁细胞分裂生长到停止分裂增殖时，内壁上的细胞有__________层。当细胞培养传至10代以后就不易传下去，继续培养时，少数细胞会克服细胞寿命的自然极限，获得不死性，此时这些细胞________突变（填“已发生”或“未发生”），正在朝着等同于癌细胞的方向发展。目前使用的或冷冻保存的细胞通常为10代以内的，以保持细胞正常的_______________。
（5）_______________技术是其他动物细胞工程技术的基础。
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