为了从泡菜汁中筛选分离出发酵产酸速度快、亚硝酸盐降解能力强的乳酸菌,科研人员做了如下实验(实验室中常用MRS培养基培养乳酸菌,在加入CaCO3的MRS培养基中,菌落周围能形成透明圈)。
请回答问题:
(1)在无菌操作下,使用无菌水对泡菜汁进行_________,将不同稀释度的泡菜汁涂布于添加了CaCO3的乳酸细菌培养基(MRS培养基)平板上。在适宜条件下培养后,挑取有_________________的菌落,立即继续在MRS平板上用________法分离,得到单菌落。
(2)加入CaCO3的MRS培养从功能上看属于________培养基。取分离到的乳酸菌接入MRS液体培养基中,间隔取样测定pH,目的是筛选出_______________的乳酸菌。
(3)取上一步筛选出的乳酸菌接入含有NaNO2的MRS培养基中,培养一段时间后,用比色方法测定NaNO2的含量,筛选出_____________的菌株。
(4)乳酸菌细胞结构的最主要特点是___________,其代谢类型为__________。
高三生物综合题中等难度题
为了从泡菜汁中筛选分离出发酵产酸速度快、亚硝酸盐降解能力强的乳酸菌,科研人员做了如下实验(实验室中常用MRS培养基培养乳酸菌,在加入CaCO3的MRS培养基中,菌落周围能形成透明圈)。
请回答问题:
(1)在无菌操作下,使用无菌水对泡菜汁进行_________,将不同稀释度的泡菜汁涂布于添加了CaCO3的乳酸细菌培养基(MRS培养基)平板上。在适宜条件下培养后,挑取有_________________的菌落,立即继续在MRS平板上用________法分离,得到单菌落。
(2)加入CaCO3的MRS培养从功能上看属于________培养基。取分离到的乳酸菌接入MRS液体培养基中,间隔取样测定pH,目的是筛选出_______________的乳酸菌。
(3)取上一步筛选出的乳酸菌接入含有NaNO2的MRS培养基中,培养一段时间后,用比色方法测定NaNO2的含量,筛选出_____________的菌株。
(4)乳酸菌细胞结构的最主要特点是___________,其代谢类型为__________。
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为了培育高效利用木糖发酵产乳酸的菌株,科研人员将能利用木糖产乳酸的菌种搭载于中国“实践八号”育种卫星,卫星返回后进行筛选,其主要流程如下图,其中乳酸能溶解培养基中的碳酸钙形成透明圈。请回答:
(1)与步骤②相比,步骤③的培养基成分还含有_______、______。两培养基均以木糖作为唯一碳源的目的是________。
(2)步骤③中,应在________附近倒平板,不采用涂布接种的原因是_________。平板在适宜条件下培养一段时间后,筛选有透明圈的菌落作为候选菌。
(3)科研人员从候选菌中初步筛选出产乳酸能力较强的四种菌株,再通过连续转接和液体发酵进行遗传稳定性检测,得到下表所示结果(单位:g·L-1),最终确定卫10为最优菌株,依据是________。
传代次数 | 菌株 | |||
卫10 | 卫32 | 卫56 | 卫69 | |
2 | 70.78 | 71.23 | 70.52 | 69.24 |
5 | 70.23 | 69.52 | 67.46 | 65.65 |
8 | 69.58 | 62.16 | 60.52 | 61.53 |
11 | 70.75 | 55.69 | 52.42 | 55.72 |
14 | 69.42 | 42.28 | 40.22 | 44.38 |
(4)若要进一步探究卫10发酵的最适木糖浓度,试写出实验思路:________。
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对于农作物秸秆的处理手段越来越倾向于添加高效降解微生物进行腐熟堆肥。为了寻求高效降解纤维素的微生物,某科研团队进行了纤维素优势分解菌的筛选实验。主要步骤如下:
①制备培养基。
②纤维素分解菌的分离、纯化。取富集培养后的土样培养液,经适当稀释后,移取培养液各0.1mL分别接种到能分别筛选出细菌、真菌和放线菌的固体培养基上进行分离、纯化培养。
③纤维素分解菌的初筛。将已经纯化的菌株接种到同一个以纤维素为唯一碳源的固体培养基上,使用刚果红染色法,根据培养基平板上透明圈直径(D)与菌落直径(d)比值的大小,初步筛选出纤维素优势分解菌。
回答下列问题:
(1)为了制成固体培养基,除了水、碳源、氮源和无机盐等基本配方以外,培养基中通常还需加入________。微生物吸收的无机盐的作用是_________________________________________________________________(答出两点即可)。
(2)步骤②、③中,若将稀释后且富含多种类型微生物的土样培养液直接涂布于同一个以纤维素为唯一碳源的固体培养基上,可能导致错过优势纤维素分解菌的发现,原因是___________________________。某研究人员将1mL培养液稀释100倍后,在4个平板上分别接入0.1mL的稀释液,经适当培养后,4个平板上的菌落数分别是15、151、155、159,据此可得出1L培养液中的活菌数是__________个。
(3)步骤③中,刚果红可以与纤维素形成______色复合物。接种在培养基上初筛分离得到的4个菌株的观察结果如下表。据表分析,哪号菌株产生的纤维素酶活性最高或其纤维素酶量最大?理由是什么?_______________________________________________
菌株编号 | 菌落直径d(cm) | 透明圈直径D(cm) | D/d |
1 | 0.3 | 0.9 | 3.00 |
2 | 0.3 | 0.6 | 2.00 |
3 | 0.3 | 1.3 | 4.33 |
4 | 0.6 | 2.0 | 3.33 |
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酸奶是以牛奶为主要原料,经乳酸菌发酵制成的一种营养丰富的保健饮品,现对酸奶中的乳酸菌进行筛选、分离,步骤如下:
牛奶→酸奶→稀释10倍→涂布MRS琼脂培养基→36±1℃、厌氧下培养→挑取单个菌落→接种于MRS琼脂平板→菌种鉴定→接种于MRS液体培养基→菌种保藏。
请回答下列相关问题:
(1)制作酸奶时一般要在牛奶中添加少量的蔗糖,除了可以调味外,还可以成为乳酸菌利用的_______之一,搅匀后要对原料进行消毒,消毒方法宜选用_____________法
(2)刚消毒完的牛奶必须冷却,然后按一定比例将市售优质酸奶加入并搅匀,根据乳酸菌的代谢特点,容器必须____________,然后发酵。
(3)制备稀释液时,先将酸奶样品充分摇匀,以无菌吸管吸取样品____________mL放入装有270mL无菌水的锥形瓶中,充分振荡,制成1:10的样品液。
(4)为了便于统计样品中活菌数目,应使用______________法将菌种接种于MRS琼脂平板,36±1℃、厌氧条件下倒置培养48h后,再挑取单个菌落,根据菌落的形状和______________(请写出两点)等特征进行菌种鉴定。
(5)菌种鉴定后将其接种至MRS液体培养基的目的是_______________。将得到的纯种菌株进行长期保藏时,可采用_____________的方法。
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回答与泡菜腌制和亚硝酸盐测定有关的问题:
(1)制作泡菜时,为缩短发酵周期,腌制前可加入乳酸菌。取少量酸奶,用无菌蒸馏水稀释后,再用________蘸取少量的稀释液,在MRS 乳酸菌专用培养基的平板上划线,以获得乳酸菌单菌落。下图所示的划线分离操作,正确的是________。
(2)泡菜腌制过程中,会产生有机酸、醇类和亚硝酸盐,其中醇类是由_______进行厌氧呼吸产生。亚硝酸盐对人体有害,为测定泡菜中亚硝酸盐含量,从泡菜中提取亚硝酸盐,与_______发生重氮化反应,再与N-1-萘基乙二胺偶联,形成紫红色产物。然后用光程为1cm 的_______,在550nm 光波下测定光密度值,与由一直浓度梯度亚硝酸钠制作的_______比对,计算样品中亚硝酸盐的含量。
(3)已知乳酸菌中的亚硝酸还原酶能降解亚硝酸盐。在一定的腌制时间内,随着腌制时间的延长,泡菜中亚硝酸盐含量逐渐降低,是由于在厌氧和_______环境下亚硝酸盐被亚硝酸还原酶降解。
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某化工厂的污水池中含有一种有害的、难以降解的有机化合物A,研究人员用化合物A、磷酸盐、镁盐以及微量元素配制的培养基成功筛选到能高效降解化合物A的细菌。实验的主要步骤如下图所示,请分析回答:
(1)培养基中加入化合物A的目的是筛选________,这种培养基属于________培养基。
(2)“目的菌”生长所需的氮源和碳源是来自培养基中的________。实验需要振荡培养,由此推测“目的菌”的代谢类型是________。
(3)培养若干天后,应选择培养瓶中化合物A含量 的培养基,接入新的培养液中连续培养,使“目的菌”的数量________。
(4)转为固体培养时,常采用________的方法接种,获得单菌落后继续筛选。
(5)若研究“目的菌”的生长规律,将单个菌落进行液体培养,可采用________的方法进行计数。若以一个大方格(体积为0.1 mm3)有25个中方格的计数板为例进行计算,设五个中方格中总菌数为B,菌液稀释倍数为C,那么原菌液的菌群密度为________个/mL。
(6)实验结束时,使用过的培养基应该进行__________处理后,才能倒掉。
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某化工厂的污水池中含有一种有害的、难以降解的有机化合物A,研究人员用化合物A、磷酸盐、镁盐以及微量元素配制的培养基成功筛选到能高效降解化合物A的细菌。实验的主要步骤如下图所示,请分析回答:
(1)培养基中加入化合物A的目的是筛选________,这种培养基属于________培养基。
(2)“目的菌”生长所需的氮源和碳源是来自培养基中的________。实验需要振荡培养,由此推测“目的菌”的代谢类型是________。
(3)培养若干天后,应选择培养瓶中化合物A含量________的培养基,接入新的培养液中连续培养,使“目的菌”的数量________ 。
(4)转为固体培养时,常采用________的方法接种,获得单菌落后继续筛选。
(5)若研究“目的菌”的群体生长规律,将单个菌落进行液体培养,可采用________的方法进行计数。若以一个大方格(体积为0.1 mm3)有25个中方格的计数板为例进行计算,设五个中方格中总菌数为B,菌液稀释倍数为C,那么原菌液的菌群密度为________个/mL。
(6)实验结束时,使用过的培养基应该进行________处理后,才能倒掉。
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(11分)某化工厂的污水池中,含有一种有害的、难于降解的有机化合物A。研究人员用化合物A、磷酸盐、镁盐以及微量元素配制的培养基,成功地筛选到能高效降解化合物A的细菌(目的菌),实验的主要步骤如下图所示。请分析回答问题:
(1)培养基中加入化合物A的目的是筛选______________,这种培养基属于_____________培养基。
(2)“目的菌”生长所需的氮源和碳源是来自培养基中的_____________,实验需要振荡培养,由此推测“目的菌”的代谢类型是______________________。
(3)培养若干天后,应该选择培养瓶中化合物A含量________的培养液取出“目的菌”,接入新的培养液中连续培养,使“目的菌”的数量_______________。
(4)接种到固体培养基的作用是_________________________。采用划线法接种时要转动培养皿在三个方向上划线,其目的是使_____________________,培养后出现________________,有利于继续筛选。
(5)实验结束后,使用过的培养基应该进行_____________处理后才能倒掉。
(6)下列分离微生物的方法,不正确的是( )
A.在培养基中添加青霉素,能分离出真菌
B.在缺氮的培养基中,能分离出硝化细菌
C.在培养基中添加伊红与美蓝染料,能选择出大肠杆菌
D.在缺氮的培养基中,能分离出圆褐固氮菌
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某化工厂的污水池中,含有一种有害的、难于降解的有机化合物A。研究人员用化合物A、磷酸盐、镁盐以及微量元素配制的培养基,成功地筛选到能高效降解化合物A的细菌(目的菌)实验的主要步骤如下图所示。请分析回答问题。
(1)接种前需要对培养基及培养皿等进行灭菌,常用的灭菌方法是____________。培养基中加入化合物A的目的是筛选________。
(2)实验需要振荡培养,由此推测“目的菌”的代谢类型是____________。
(3)培养若干天后,应选择培养瓶中化合物A含量________的培养液,接入新的培养液中连续培养,使“目的菌”的数量________。
(4)转为固体培养时,为获得单菌落进行继续筛选,常采用平板划线法或____________法,接种后,应将培养皿________(填“正放”或“倒置”)
(5)平板划线法操作在作第二次以及其后的划线操作时,为什么总是从上一次划线的末端开始划线?______________________________________________________
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某化工厂的污水池中含有一种有害的难以降解的有机化合物A。研究人员用化合物A、磷酸盐、镁盐以及微量元素配制的培养基,成功筛选到能高效降解化合物A的细菌(目的菌)。实验的主要步骤如下图所示。请分析回答下列问题。
(1)培养基中加入化合物A的目的是_____________,这种培养基属于_________培养基。
(2)“目的菌”生长所需的氮源和碳源是来自培养基中的___________________。实验需要振荡培养,由此推测“目的菌”的呼吸作用类型是___________________。
(3)转为固体培养基时,常采用平板划线的方法进行接种,此过程中所用的接种工具是___________________,操作时采用___________________灭菌的方法。
(4)实验结束后,使用过的培养基应该进行灭菌处理才能倒掉,这样做的目的是____。
(5)某同学计划统计污水池中“目的菌”的总数,他选用10-4、10-5、10-6稀释液进行平板划线,每种稀释液都设置了3个培养皿。从设计实验的角度看,还应设置的一组对照实验是_____________,此对照实验的目的是证明__________过程中是否被杂菌污染。
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