【生物——选修1:生物技术实践】（15分）由于石油价格的不断上涨，替代化石燃料的产品如燃料酒精、生物柴油、沼气等的开发备受世界关注，有人想利用玉米秸秆生产燃料酒精，其大致流程为：
（1）玉米秸秆预处理后，应该选用 进行水解，使之转化为发酵所需的葡萄糖。
（2）分离这种水解酶的野生菌株一般从土壤中筛选，所需要的培养基为 培养基，但现有的野生菌株对玉米秸秆的转化效率低，某同学尝试对其进行改造，以获得高效菌株。
实验步骤：
①配制 (固体、半固体、液体)培养基，该培养基的碳源应为 。
②将野生菌株接入已经用 法灭菌的培养基平板上。
③立即用适当剂量的紫外线照射，其目的是对野生菌株进行 。
④菌落形成后，加入 染液，观察菌落周围培养基的颜色变化和变化范围的大小，周围出现 (现象)的菌落即为初选菌落。
⑤分离、纯化菌种时为得到单菌落，常用 法和 法接种。
（3）发酵阶段需要的菌种是 ，生产酒精必须要控制的条件是 。
（4）生产的酒精易挥发但可溶于水，宜选用水蒸气蒸馏的方法从酵母菌代谢产物中提取。
高三生物多选题中等难度题
【生物——选修1:生物技术实践】（15分）由于石油价格的不断上涨，替代化石燃料的产品如燃料酒精、生物柴油、沼气等的开发备受世界关注，有人想利用玉米秸秆生产燃料酒精，其大致流程为：
（1）玉米秸秆预处理后，应该选用 进行水解，使之转化为发酵所需的葡萄糖。
（2）分离这种水解酶的野生菌株一般从土壤中筛选，所需要的培养基为 培养基，但现有的野生菌株对玉米秸秆的转化效率低，某同学尝试对其进行改造，以获得高效菌株。
实验步骤：
①配制 (固体、半固体、液体)培养基，该培养基的碳源应为 。
②将野生菌株接入已经用 法灭菌的培养基平板上。
③立即用适当剂量的紫外线照射，其目的是对野生菌株进行 。
④菌落形成后，加入 染液，观察菌落周围培养基的颜色变化和变化范围的大小，周围出现 (现象)的菌落即为初选菌落。
⑤分离、纯化菌种时为得到单菌落，常用 法和 法接种。
（3）发酵阶段需要的菌种是 ，生产酒精必须要控制的条件是 。
（4）生产的酒精易挥发但可溶于水，宜选用水蒸气蒸馏的方法从酵母菌代谢产物中提取。
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（2012•唐山三模）由于石油价格的不断上涨，替代化石燃料的产品如燃料酒精、生物柴油、沼气等开发备受世界关注，有人想利用玉米秸秆生产燃料酒精，其大致流程如图所示：
（1）玉米秸秆预处理后，应该选用 纤维素 酶进行水解，使之转化为发酵所需的葡萄糖．
（2）分离这种水解酶的野生菌株一般从土壤中筛选，所需要的培养基为 选择 培养基，但现有野生菌株对玉米秸秆的转化效率低，某同学尝试对其进行改造，以获得高效菌株．
实验步骤：
①配置 固体 （固体、半固体、液体）培养基，该培养基的碳源应为 纤维素 ．
②将野生菌株接入已经 高压蒸汽灭菌 法灭菌的培养基平板上．
③立即用适当剂量的紫外线照射，其目的是对野生菌株进行 诱变 ．
④菌落形成后，加入 刚果红 染料，观察菌落周围培养基的颜色变化和变化范围的大小．周围出现 透明圈范围大 （现象）的菌落即为初选菌落．
⑤分离、纯化菌种时为得到单菌落，常用 平板划线 和 稀释涂布平板 接种方法．
（3）发酵阶段需要的菌种是 酵母菌 ，生产酒精必要控制的条件是 无氧（密封、密闭） ．
（4）生产的酒精易挥发但又可溶于水，宜选用 水蒸气蒸馏 方法从酵母菌的代谢产物中提取．
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由于石油价格的不断上涨，替代化石燃料的产品如燃料酒精、生物柴油、沼气等的开发备受世界关注，有人想利用玉米秸秆生产燃料酒精，其大致流程为：
（1）玉米秸秆预处理后，应该选用 进行水解，使之转化为发酵所需的葡萄糖．
（2）分离这种水解酶的野生菌株一般从土壤中筛选，所需要的培养基为 培养基，但现有的野生菌株对玉米秸秆的转化效率低，某同学尝试对其进行改造，以获得高效菌株．
实验步骤：
①配制 （固体、半固体、液体）培养基，该培养基的碳源应为 ．
②将野生菌株接入已经用 法灭菌的培养基平板上．
③立即用适当剂量的紫外线照射，其目的是对野生菌株进行 ．
④菌落形成后，加入 染液，观察菌落周围培养基的颜色变化和变化范围的大小，周围出现 （现象）的菌落即为初选菌落．
⑤分离、纯化菌种时为得到单菌落，常用 法接种．
（3）发酵阶段需要的菌种是酵母，生产酒精必须要控制的条件是 ．
（4）生产的酒精易挥发但可溶于水，宜选用 的方法从酵母菌代谢产物中提取．
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（《生物技术实践》，15分）
为了实现燃料供应来源多样化，发展长期替代化石燃料的产品如燃料酒精、生物柴油、沼气等已经列入我国未来10年的发展计划。
广东省是我国甘蔗主产区之一。甘蔗是一种高光效的C3植物，单位面积产量很高，种植面积日益扩大， 目前已成为南方地区燃料酒精生产的重要原料。利用甘蔗生产燃料酒精的一般工艺流程为：甘蔗 榨汁（蔗糖） 酵母发酵 蒸馏 成品（燃料酒精）。
请根据上述材料，回答下列问题：
（1）简述甘蔗大规模快速繁殖技术的过程。
（2）具有耐高糖和耐酸特性的酵母菌是理想的酒精发酵菌种，对野生酵母菌进行诱变后通过筛选可以得到具有这些特性的突变菌，诱变及筛选过程如下：
步骤1：野生菌液体培养一段时间后接受紫外线照射诱变处理。
步骤2：制备选择培养基。在基本培养基的基础上，注意________和________，加琼脂后灭菌，制成固体平板。
步骤3：将紫外照射后的菌液稀释涂布平板。
步骤4：根据________筛选出突变菌。
（3）上述步骤2、3和4的依据分别是________。
（4）利用获得的突变菌和蔗汁进行酒精发酵实验，除了将培养基灭菌、保持空间洁净外，发酵过程中防止外来杂菌入侵还有哪些可行方法?（列举两种）
（5）甘蔗榨汁以后还有大量的蔗渣废弃物，主要成分为木质素、纤维素和半纤维素，但是酵母菌无法直接利用，原因是其________。请提出解决该问题的方法。（列举两种方法）
（6）突变菌往往带有一些特殊的基因。在获得这些基因的过程中，PCR技术相当重要。PCR扩增反应中加入引物和DNA聚合酶的作用分别是什么?
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A．[生物——选修1：生物技术实践]随着全球环境污染严重，石油资源逐步减少，近年来乙醇等“绿色能源”的开发备受关注。科技工作者研制出利用秸秆生产燃料酒精的技术，大致流程如下图所示。
（1）若要从土壤中分离出能分解植物秸秆的微生物，培养基中的碳源是 ，对该培养基可采取 的方法进行灭菌。
（2）某同学对分离得到的微生物培养液进行数量测定，在稀释倍数为105对应的培养基中测定平板上菌落数的平均值为23．4，则每毫升样品中的细菌数是（涂布平板时稀释液的体积为0．2 mL） 。
（3）用上述方法测定目的菌的密度，实际活菌数量要比测得的菌落数量多，原因是 。
（4）上述流程图中，糖液发酵产生酒精需要的菌种是____，酒精是在目的菌的 （结构）中产生的。
B．[生物——选修3：现代生物科技专题]马铃薯块茎含有大量的淀粉，富含多种维生素和无机盐，我国已将马铃薯作为主粮产品进行产业化开发。下图是转基因抗盐马铃薯的培育过程，请分析回答问题：
（1）为获取抗盐基因，可以从碱蓬细胞研磨液中提取抗盐基因的 来合成cDNA。
（2）上图构建基因表达载体时，最好选用 酶切割含目的基因的外源DNA和质粒，不能使用Sma l切割的原因是 。构建好的重组质粒在抗盐基因前要加上特殊的启动子，启动子是一段有特殊结构的 片段。
（3）将基因表达载体导入农杆菌中的Ti质粒上的T-DNA上的原因是 。通过农杆菌的转化作用，使抗盐基因插入到马铃薯细胞中的染色体DNA上，从而使抗盐基因的遗传特性得以 。
（4）上图转基因抗盐马铃薯培育过程中，属于脱分化阶段的是 （填序号）。从个体水平上检验转基因抗盐马铃薯是否培育成功的方法是 。
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[生物——选修1：生物技术实践]乙醇是目前世界上生产规模最大的生物能源，由于石油面临枯竭，可再生的乙醇作为可替代石油的新能源已成为全球关注的焦点。科研工作者研制出利用微生物降解秸秆生产乙醇的技术，大致流程如下图所示。
（1）若要从土壤中分离出能降解植物秸秆的微生物，培养基中的碳源是____，对该培养基可采取______的方法进行灭菌。
（2）某小组对分离得到的微生物培养液进行数量测定，在稀释倍数为105对应的培养基中测定平板上菌落数的平均值为234，则每毫升样品中的细菌数是（涂布平板时稀释液的体积为0.2mL）______个。
（3）用上述方法测定目的菌的密度，实际活菌数量要比测得的菌落数量多，原因是_________。
（4）上述流程图中，糖液发酵产生乙醇需要的菌种是_____，乙醇是在目的菌的______（结构）中产生的。
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[生物——选修1：生物技术实践]乙醇等“绿色能源”的开发备受世界关注。利用玉米秸秆生产
燃料酒精的大致流程为：
（1）玉米秸秆预处理后，因该选用____酶和____酶形成纤维二糖，再使用___________酶使之转化为发酵所需的葡萄糖。
（2）从以下哪些微生物中可以提取上述酶？________（多选）
A．酿制果醋的醋酸菌
B．生长在腐木上的霉菌
C．制作酸奶的乳酸菌
D．反刍动物瘤胃中生存的某些微生物
（3）若从土壤中分离产生这种酶的微生物，所需要的培养基为______（按功能分），培养基中的碳源为________。微生物在纯化培养时常用方法是_________和___________。
（4）发酵阶段需要的菌种是_________，生产酒精时要控制的必要条件是 。
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【选修1——生物技术实践】
乙醇等“绿色能源”的开发备受世界关注。利用玉米秸秆生产燃料酒精的大致流程为：
(1)玉米秸秆预处理后，因该选用________酶进行水解，使之转化为发酵所需的葡萄糖。
(2)从以下哪些微生物中可以提取上述酶? ________ (多选)
A、酿制果醋的醋酸菌
B、生长在腐木上的霉菌
C、制作酸奶的乳酸菌
D、生产味精的谷氨酸棒状杆菌
E、反刍动物瘤胃中生存的某些微生物
(3)若从土壤中分离生产这种酶的微生物，所需要的培养基为________ (按功能分)，培养基中的碳源为________。
(4) 在微生物培养操作过程中，为防止杂菌污染，需对培养基和培养皿进行________；操作者的双手需要进行清洗和______。
(5)发酵阶段需要的菌种是________，生产酒精时要控制的必要条件是________。
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【生物—生物技术实践】
生物柴油是一种可再生的清洁能源，其应用在一定程度上能够减缓人类对化石燃料的消耗，科学家发现，在微生物M产生的脂肪酶作用下，植物油与甲醇反应能够合成生物柴油（如下图）。
（1）用于生产生物柴油的植物油不易发挥，宜选用_____、_____方法从油料作物中提取。
（2）筛选产脂肪酶的微生物M时，选择培养基中的添加的植物油为微生物生长提供____，培养基灭菌采用的最适方法是____法。
（3）测定培养液中微生物数量，可选用_____法直接计数；从微生物M分离提取的脂肪酶通常需要检测______，以确定其应用价值；为降低生物柴油生产技术，可利用______技术使脂肪酶能够重复使用。
（4）若需克隆脂肪酶基因，可应用耐热DNA聚合酶催化的_____技术。
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【生物—生物技术实践】
生物柴油是一种可再生的清洁能源，其应用在一定程度上能够减缓人类对化石燃料的消耗，科学家发现，在微生物M产生的脂肪酶作用下，植物油与甲醇反应能够合成生物柴油（如下图）。
（1）用于生产生物柴油的植物油不易发挥，宜选用_____、_____方法从油料作物中提取。
（2）筛选产脂肪酶的微生物M时，选择培养基中的添加的植物油为微生物生长提供____，培养基灭菌采用的最适方法是____法。
（3）测定培养液中微生物数量，可选用_____法直接计数；从微生物M分离提取的脂肪酶通常需要检测______，以确定其应用价值；为降低生物柴油生产技术，可利用______技术使脂肪酶能够重复使用。
（4）若需克隆脂肪酶基因，可应用耐热DNA聚合酶催化的_____技术。
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