回答下了有关基因工程和遗传表达的问题（10分）苏云金杆菌(Bt)能产生具有杀虫能力的毒素蛋...

回答下了有关基因工程和遗传表达的问题（10分）苏云金杆菌(Bt)能产生具有杀虫能力的毒素蛋白。图是转Bt毒素蛋白基因植物的重组DNA形成过程示意图；图是毒素蛋白基因进入植物细胞后发生的二种生物大分子合成的过程，据图回答下列问题。

1．将图①的DNA用HindⅢ、BamHⅠ完全酶切后，反应管中有　　　 种DNA片段。过程②需要用到　　　　　　 酶。

2．假设图中质粒原来BamHⅠ识别位点的碱基序列变为了另一种限制酶BclⅠ的碱基序列，现用BclⅠ和HindⅢ切割质粒，则该图中①的DNA右侧还能选择BamH Ⅰ进行切割，并能获得所需重组质粒吗？并请说明理由　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　 。

3．若上述假设成立，并成功形成重组质粒，则重组质粒

A．既能被BamHⅠ也能被HindⅢ切开

B．能被BamHⅠ但不能被HindⅢ切开

C．既不能被BamHⅠ也不能被HindⅢ切开

D．能被HindⅢ但不能被BamHⅠ切开

4．图中链是　　 　 　 。不同组织细胞的相同DNA进行过程③时启用的起始点　 　　 （在“都相同”、“都不同”、“不完全相同”中选择），其原因是　　　　　 　　　　　　　 。

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回答下列有关基因工程的问题。

苏云金杆菌 （Bt）能产生具有杀虫能力的毒素蛋白。下图是转Bt毒素蛋白基因植物的培育过程示意图 （为抗氨苄青霉素基因），①~④表示过程。

（1）由HindⅢ酶切后，得到DNA片段的末端是 （　　　 ）

（2）将图中①的DNA用HindⅢ、BamHⅠ完全酶切后，产生　 　　 　 种DNA片段，②过程可获得　　 　 种重组质粒。如果只用BamHⅠ酶切，目的基因与质粒连接后可获得　　 　 种重组质粒。

（3）该过程中Bt毒素蛋白基因插入质粒后，不应影响质粒的 （　　　 ） （多选）

A．复制　　 B．转录　　 C．碱基对的数量　 D．抗性基因的表达

（4）此基因工程中大肠杆菌质粒的作用是　　　　　　 ，根瘤农杆菌的作用是　　　　　　 。生产上常将上述转基因作物与非转基因作物混合播种，其目的是降低害虫种群中的　　　　　　 基因的基因频率的增长速率。

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苏云金杆菌(Bt)能产生具有杀虫能力的毒素蛋白。图21是转Bt毒素蛋白基因植物的重组DNA形成过程示意图；图22是毒素蛋白基因进入植物细胞后发生的两种生物大分子合成的过程，据图回答下列问题。

（1）将图21①的DNA用HindⅢ、BamHⅠ完全酶切后，反应管中有　　　 种DNA片段。过程②需要用到　　　　　　　　 酶。

（2）假设图21中质粒原来BamHⅠ识别位点的碱基序列变为了另一种限制酶BclⅠ的碱基序列，现用BclⅠ和HindⅢ切割质粒，则该图21中①的DNA右侧还能选择BamH Ⅰ进行切割，能获得所需重组质粒吗？并请说明理由　　 　　　　　　　　　　　　　　　　 　 。

（3）若上述假设成立，并成功形成重组质粒，则重组质粒

A．既能被BamHⅠ也能被HindⅢ切开

B．能被BamHⅠ但不能被HindⅢ切开

C．既不能被BamHⅠ也不能被HindⅢ切开

D．能被HindⅢ但不能被BamHⅠ切开

（4）图22中链是　　　　 。不同组织细胞的相同DNA进行过程③时启用的起始点　　　　 （在“都相同”、“都不同”、“不完全相同”中选择），其原因是　　　　　　　　　　　　　 。

（5）要想检测导入的Bt毒素蛋白基因是否表达，在分子水平上可用　　　　 　 　 进行检测，如果出现杂交带，说明目的基因已经表达蛋白质产品，转基因植物培育成功。

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苏云金杆菌(Bt)能产生具有杀虫能力的毒素蛋白。图21是转Bt毒素蛋白基因植物的掣DNA形成过程示意图；图22是毒素蛋白基因进入植物细胞后发生的两种生物大分子合成的过程，据图回答下列问题。

（1）将图21①的DNA用HindIII、BanH I完全酶切后，反应管中有　　　　　 种DNA片段。过程②需要用到　　　　　　　 酶。

(2)假设图21中质粒原BamH I识别位点的碱基序列变为了另一种限制酶＆l I的碱基序列，现用Bcl I和Hindm切割质粒，则该图2l中①的DNA‘右侧还能选择BamH—I进行切割，并能获得所需垂组质粒吗?t。并请说明理由　　　　　　　　 。

(3)若上述假设成立，并成功形成重组质粒，则重组质粒

A．即能被BanH I也能被Hind III切开

B．即能被BanH 但也能被Hind III切开

C．即不能被BanH I也不能被Hind III切开

D．能被BanH I但不能被Hind III切开

（4）图22中a链是　　　　　　 。不同组织细胞的相同DNA进行过程③时启用的起始点　　　　　　 （在“都相同”、“都不同”、“不完全相同”中选择）。其原因是　　　　　　　　 。

（5）要想检测导入的Bt毒素蛋白基因是否表达，在分子水平上可用　　　　　　 法进行检测，如果出现杂交带，说明目的基因已经表达蛋白质产品，转基因植物培育成功。

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（15分）苏云金杆菌(Bt)能产生具有杀虫能力的毒素蛋白。图1是转Bt毒素蛋白基因植物的重组DNA形成过程示意图；图2是毒素蛋白基因进入植物细胞后发生的两种生物大分子合成的过程，据图回答下列问题。

（1）将图1①的DNA用HindⅢ、BamHⅠ完全酶切后，反应管中有________种DNA片段。过程②需要用到________酶。

（2）假设图1中质粒原来BamHⅠ识别位点的碱基序列变为了另一种限制酶BclⅠ的碱基序列，现用BclⅠ和HindⅢ切割质粒，则该图1中①的DNA右侧还能选择BamH Ⅰ进行切割，并能获得所需重组质粒吗？并请说明理由________。

（3）若上述假设成立，并成功形成重组质粒，则重组质粒

A．既能被BamHⅠ也能被HindⅢ切开

B．能被BamHⅠ但不能被HindⅢ切开

C．既不能被BamHⅠ也不能被HindⅢ切开

D．能被HindⅢ但不能被BamHⅠ切开

（4）图2中a链是。不同组织细胞的相同DNA进行过程③时启用的起始点（在“都相同”、“都不同”、“不完全相同”中选择），其原因是。

（5）要想检测导入的Bt毒素蛋白基因是否表达，在分子水平上可用________法进行检测，如果出现杂交带，说明目的基因已经表达蛋白质产品，转基因植物培育成功。

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苏云金杆菌(Bt)能产生具有杀虫能力的毒素蛋白。图21是转Bt毒素蛋白基因植物的重组DNA形成过程示意图；图22是毒素蛋白基因进入植物细胞后发生的两种生物大分子合成的过程，据图回答下列问题。

⑴将图21①的DNA用HindⅢ、BamHⅠ完全酶切后，反应管中有　　　　　　　　　　 种DNA片段。过程②需要用到　　　　　　　　 酶。

⑵假设图21中质粒原BamHⅠ识别位点的碱基序列变为了另一种限制酶BclⅠ的碱基序列，现用BclⅠ和HindⅢ切割质粒，则该图21中①的DNA右侧还能选择BamH Ⅰ进行切割，并能获得所需重组质粒吗？并请说明理由　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　 。

⑶若上述假设成立，并成功形成重组质粒，则重组质粒(　　　 )

A．既能被BamHⅠ也能被HindⅢ切开

B．能被BamHⅠ但不能被HindⅢ切开

C．既不能被BamHⅠ也不能被HindⅢ切开

D．能被HindⅢ但不能被BamHⅠ切开

⑷图22中α链是　　　　 。不同组织细胞的相同DNA进行过程③时启用的起始点　　　　 （在“都相同”、“都不同”、“不完全相同”中选择），其原因是　　　　　　　　　　　　　　　　 。

⑸要想检测导入的Bt毒素蛋白基因是否表达成功，在个体水平上如何检测。　　　　　　　　　　　　　

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(10分)苏云金杆菌(Bt)能产生具有杀虫能力的毒素蛋白。下图是转Bt毒素蛋白基因植物的培育过程示意图(amp^t为抗氨苄青霉素基因)，据图回答下列问题。

(1)将图中①的DNA用HindⅢ、BamHⅠ完全酶切后，反应管中有________种DNA片段。

(2)图中②表示HindⅢ与BamHⅠ酶切、DNA连接酶连接的过程，此过程可获得________种重组质粒；如果换用BstⅠ与BamHⅠ酶切，目的基因与质粒连接后可获得________种重组质粒。

(3)目的基因插入质粒后，不能影响质粒的________。

(4)图中③的Ti质粒调控合成的vir蛋白，可以协助带有目的基因的T-DNA导入植物细胞，并防止植物细胞中________对T-DNA的降解。

(5)已知转基因植物中毒素蛋白只结合某些昆虫肠上皮细胞表面的特异受体，使细胞膜穿孔，肠细胞裂解，昆虫死亡。而该毒素蛋白对人类的风险相对较小，原因是人类肠上皮细胞_______。

(6)生产上常将上述转基因作物与非转基因作物混合播种，其目的是降低害虫种群中的________基因频率的增长速率。

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苏云金杆菌（Bt）能产生具有杀虫能力的毒素蛋白。下图是转Bt毒素蛋白基因（A基因）植物的培育过程示意图据图回答下列问题。

（1）可利用_____________技术获得并扩增A基因。如果开始的A基因只有一个，第n次循环需要引物_____________对，引物的设计依据是___________________________。

（2）若选用双酶切构建重组质粒，可选择限制酶_______________对目的基因片段进行切割，选择对_________________质粒进行切割。

（3）目的基因插入质粒后，不能影响质粒的________________，重组大肠杆菌可通过涂布有氨苄青霉素的培养基筛选出是因为__________________。

（4）③过程中目的基因A需插入Ti质粒的_______________中，原因是_______________。

（5）生产上常将上述转基因作物与非转基因作物混合播种，其目的是______________。

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苏云金杆菌（Bt）能产生具有杀虫能力的毒素蛋白。下图是转Bt毒素蛋白基因植物的培育过程示意图（为抗氨苄青霉素基因），据图选择不正确说法

A. 将图中①的DNA用HindⅢ、BamHⅠ完全酶切后，反应管中有4种DNA片段。

B. 图中②表示 HindⅢ与BamHⅠ酶切、DNA连接酶连接的过程，此过程可获得2种重组质粒；如果换用Bst l与BamHⅠ酶切，目的基因与质粒连接后可获得1种重组质粒

C. 将重组质粒导入大肠杆菌的目的是借助大肠杆菌代谢快易增殖的特点，令目的基因在其内高效、快速地表达

D.  目的基因最终导入植物体借助了土壤农杆菌侵入宿主细胞的途径

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Bt毒蛋白基因是从苏云金芽孢杆菌中分离出来的抗虫基因，因其表达产物Bt毒蛋白具有杀虫效果好、安全、高效等优点而成为应用最为广泛的基因。请回答下列有关转基因抗虫植物的问题：

（1）要从苏云金芽孢杆菌中获取Bt毒蛋白基因，可根据Bt毒蛋白基因的部分已知序列，设计特异性___________，再利用____________技术扩增出Bt毒蛋白基因。

（2）构建重组质粒时，常用Ti质粒作为载体，是因为Ti质粒上具有_______，它能把目的基因整合到受体细胞（植株细胞）的___________上。这种将基因表达载体导入受体细胞的方法是______________法。

（3）要确定抗虫基因导入棉花细胞后，是否赋予了棉花抗虫特性，在个体水平上还需要做________实验；若要检测具有抗虫基因的棉花是否产生了相应毒蛋白，在分子水平上可利用____________方法进行检测。

（4）目前，转基因植物的安全性问题是社会争论的热点。如有些人认为转基因植物的种植会威胁环境安全；但也有人认为转基因植物的种植减少了________________的使用，有利于减轻污染。面对转基因技术的利弊，我们应持有的正确做法是________________。

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