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（20分）玉米自交系（遗传稳定的育种材料）B具有高产、抗病等优良性质，但难以直接培育成转基因植株，为使其获得抗除草剂性状，需依次进行步骤I、II试验。
Ⅰ．获得抗除草剂转基因玉米自交系A，技术路线如下图。
（1）为防止酶切产物自身环化，构建表达载体需用2种限制酶，选择的原则是______（单选）。
①Ti质粒内，每种限制酶只有一个切割位点
②G基因编码蛋白质的序列中，每种限制酶只有一个切割位点
③酶切后，G基因形成的两个黏性末端序列不相同
④酶切后，Ti质粒形成的两个黏性末端序列相同
A．①③ B．①④ C．②③ D．②④
（2）下表是4种玉米自交系幼胚组织培养不同阶段的结果。据表可知，细胞脱分化时使用的激素是_______________，自交系_______________的幼胚最适合培养成愈伤组织作为转化受体。
（3）农杆菌转化愈伤组织时，T-DNA携带插入其内的片段转移到受体细胞。筛选转化的愈伤组织，需使用含_____________________的选择培养基。
（4）转化过程中，愈伤组织表面常残留农杆菌，导致未转化愈伤组织也可能在选择培养基上生长。含有内含子的报告基因只能在真核生物中正确表达，其产物能催化无色物质K呈现蓝色。用K分别处理以下愈伤组织，出现蓝色的是_______________（多选）。
A．无农杆菌附着的未转化愈伤组织
B．无农杆菌附着的转化愈伤组织
C．农杆菌附着的未转化愈伤组织
D．农杆菌附着的转化愈伤组织
（5）组织培养获得的转基因植株（核DNA中仅插入一个G基因）进行自交，在子代含G基因的植株中，纯合子占_____________。继续筛选，最终选育出抗除草剂纯合自交系A。
II．通过回交使自交系B获得抗除草剂性状
（6）抗除草剂自交系A（GG）与自交系B杂交产生F1，然后进行多轮回交（下图）。自交系B作为亲本多次回交的目的是使后代______________。
（7）假设子代生活力一致，请计算上图育种过程F1、H1、H2、H3各代中含G基因植株的比例，并在图1中画出对应的折线图。若回交后每代不进行鉴定筛选，直接回交，请在图2中画出相应的折线图。
（8）下表是鉴定含G基因植株的4种方法。请预测同一后代群体中，4种方法检出的含G基因植株的比例，从小到大依次是________。
| 方法 检测对象 检测目标 检出的含G基因植株的比例 |
| PCR扩增 基因组DNA G基因 x1 分子杂交 总mRNA G基因转录产物 x2 抗原-抗体杂交 总蛋白质 G基因编码的蛋白质 x3 喷洒除草剂 幼苗 抗除草剂幼苗 x4 |
对Hn继续筛选，最终选育出高产、抗病、抗除草剂等优良性状的玉米自交系
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玉米自交系（遗传稳定的育种材料）B具有高产、抗病等优良性质，但难以直接培育成转基因植株，为使其获得抗除草剂性状，需依次进行步骤I、II试验。
Ⅰ．获得抗除草剂转基因玉米自交系A，技术路线如下图。
（1）为防止酶切产物自身环化，构建表达载体需用2种限制酶，选择的原则是______（单选）。
①Ti质粒内，每种限制酶只有一个切割位点
②G基因编码蛋白质的序列中，每种限制酶只有一个切割位点
③酶切后，G基因形成的两个黏性末端序列不相同
④酶切后，Ti质粒形成的两个黏性末端序列相同
A．①③ B．①④ C．②③ D．②④
（2）下表是4种玉米自交系幼胚组织培养不同阶段的结果。据表可知，细胞脱分化时使用的激素是_______________，自交系_______________的幼胚最适合培养成愈伤组织作为转化受体。
（3）农杆菌转化愈伤组织时，T-DNA携带插入其内的片段转移到受体细胞。筛选转化的愈伤组织，需使用含_____________________的选择培养基。
（4）转化过程中，愈伤组织表面常残留农杆菌，导致未转化愈伤组织也可能在选择培养基上生长。含有内含子的报告基因只能在真核生物中正确表达，其产物能催化无色物质K呈现蓝色。用K分别处理以下愈伤组织，出现蓝色的是_______________（多选）。
A．无农杆菌附着的未转化愈伤组织
B．无农杆菌附着的转化愈伤组织
C．农杆菌附着的未转化愈伤组织
D．农杆菌附着的转化愈伤组织
（5）组织培养获得的转基因植株（核DNA中仅插入一个G基因）进行自交，在子代含G基因的植株中，纯合子占_____________。继续筛选，最终选育出抗除草剂纯合自交系A。
II．通过回交使自交系B获得抗除草剂性状
（6）抗除草剂自交系A（GG）与自交系B杂交产生F1，然后进行多轮回交（下图）。自交系B作为亲本多次回交的目的是使后代______________。
（7）假设子代生活力一致，请计算上图育种过程F1、H1、H2、H3各代中含G基因植株的比例，并在图1中画出对应的折线图。若回交后每代不进行鉴定筛选，直接回交，请在图2中画出相应的折线图。________
（8）下表是鉴定含G基因植株的4种方法。请预测同一后代群体中，4种方法检出的含G基因植株的比例，从小到大依次是________。
| 方法 检测对象 检测目标 检出的含G基因植株的比例 |
| PCR扩增 基因组DNA G基因 x1 分子杂交 总mRNA G基因转录产物 x2 抗原-抗体杂交 总蛋白质 G基因编码的蛋白质 x3 喷洒除草剂 幼苗 抗除草剂幼苗 x4 |
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利用杂交育种方法，培育具有两种优良性状的作物新品种，下列说法中错误的是
A．所选的原始材料分别具有某种优良性状且能稳定遗传
B．杂交一次，得F1，若F1在性状上符合要求，则可直接用于扩大栽培
C．让F1自交，得F2，从F2中初步选取性状上符合要求的类型
D．把初步选出的类型进一步隔离自交和汰劣留良，直到确认不在发生性状分离为止
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下列关于作物育种的叙述，不正确的是
A.把两个玉米的优良性状结合在一起常采用杂交育种方法
B.改良缺乏某种抗病性的水稻品种可采用诱变育种方法
C.袁隆平培育的高产、抗逆性强的杂交水稻是基因重组的结果
D.单倍体幼苗用秋水仙素处理得到的染色体数目加倍的植株一定是纯合的
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(12分)
转基因育种是利用遗传转化方法将有价值的外源基因导入受体物种获得转化体，再将转化体植株经过常规育种程序加以选择和培育，最后选育出具有优良性状的新品种，对于作物育种具有重大的意义。图甲表示我国自主研发的转基因抗虫玉米的主要培育流程，图乙表示天然土壤农杆菌Ti质粒结构(部分基因及限制性内切酶作用位点如图所示)。请回答：
（1）若限制酶I的识别序列和切割位点是
，限制酶II的识别序列和切割位点是
，那么在①过程中，应用限制酶_________切割质粒，用限制酶_______切割抗虫基因。
（2）为了保证改造后的质粒进入玉米细胞后不会引起细胞的无限分裂和生长，必须用限制酶去除质粒上_________和___________(基因)。
（3）将构建的重组Ti质粒，导入土壤农杆菌，在选择培养基上进行培养，观察农杆菌在含__________的培养基中能够生长、在含___________的培养基中不能生长。
（4）④过程应用的生物技术主要是__________，从个体水平检测玉米具有抗虫性状的方法是_________。
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下列关于育种的说法错误的是（ ）
A. 诱变育种可以创造新的基因，获得新的性状
B. 杂交育种就是为了获得稳定遗传的优良性状
C. 单倍体育种和多倍体育种中秋水仙素的作用机理相同
D. 是否培育出多倍体可以用显微镜观察来判断
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下列关于培育生物新品种的叙述，正确的是
A. 杂交育种培育的新品种必须是纯合子
B. 单倍体育种是为了获取单倍体新品种
C. 空间诱变育种获得的优良性状均可稳定遗传
D. 培育三倍体转基因植物，可以防止基因污染
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欲获得能稳定遗传的优良品种，某生物育种小组用基因型为Dd的玉米用两种方法进行育种试验，第一种育种方法为连续自交并逐代淘汰隐性个体，第二种育种方法为随机交配并逐代淘汰隐性个体。下列说法正确的是（ ）
A. 上述两种育种方法所遵循的原理为基因重组
B. 上述两种育种过程中，子代的基因频率始终不变
C. 通过上述两种育种方法所得的F2中Dd的频率相等
D. 第一种育种方法比第二种育种方法的育种效率更高
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欲获得能稳定遗
传的优良品种，某生物育种小组用基因型为Dd的玉米用两种方法进行育种试验，第一种育种方法为连续自交并逐代淘汰隐性个体，第二种育种方法为随机交配并逐代淘汰隐性个体。下列说法正确的是（ ）
A．上述两种育种方法所遵循的原理为基因重组
B．上述两种育种过程中，子代的基因频率始终不变
C．通过上述两种育种方法所得的F2中Dd的频率相等
D．第一种育种方法比第二种育种方法的育种效率更高
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欲获得能稳定遗传的优良品种，某生物育种小组用基因型为Dd的玉米用两种方法进行育种试验，第一种育种方法为连续自交并逐代淘汰隐性个体，第二种育种方法为随机交配并逐代淘汰隐性个体。下列说法正确的是
A. 上述两种育种方法所进循的原理为基因重组
B. 上述两种育种过程中，子代的基因频率始终不变
C. 第一种育种方法比第二种育种方法的育种效率更高
D. 通过上述两种育种方法所得的F2中Dd的基因型频率相等
，限制酶II的识别序列和切割位点是
，那么在①过程中，应用限制酶_________切割质粒，用限制酶_______切割抗虫基因。
传的优良品种，某生物育种小组用基因型为Dd的玉米用两种方法进行育种试验，第一种育种方法为连续自交并逐代淘汰隐性个体，第二种育种方法为随机交配并逐代淘汰隐性个体。下列说法正确的是（ ）