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骨肉瘤是最常见的恶性成骨性肿瘤之一。科研人员研究曲古抑菌A（TSA）对人骨肉瘤细胞凋亡的影响及作用机制，为临床治疗寻找新方向。实验过程如下：
步骤1 用含青霉素和链霉素的高糖培养基，在37℃、5% CO2培养箱中培养人骨肉瘤细胞一段时间。
步骤2 取适宜浓度的处于生长旺盛期的人类骨肉瘤细胞，用加入不同浓度的TSA（0～200
ng·mL-1）的培养基继续培养24h。
步骤3 对各组细胞进行抽样检测，检测方法是先用台盼蓝试剂（一种细胞活性染料）染色再用血细胞计数板计数，统计细胞存活率（未染色细胞数/细胞总数×100%），结果如图1。
步骤4 分别提取TSA浓度为0 ng·mL-1、25 ng·mL-1、50 ng·mL-1处理的3组细胞，测量细胞中与凋亡相关的基因（Bax、Bcl-2）和β-肌动蛋白基因（不同的组织细胞中表达相对恒定）表达的蛋白质量并计算比值，结果如图2。
分析回答：
（1）与正常成骨细胞相比，骨肉瘤细胞容易在体内分散和转移，其主要原因是 。高糖培养基中加入青霉素和链霉素的目的是 ，细胞培养箱中保持5% CO2的作用是 。
（2）步骤2中，设置0 ng·mL-1 TSA实验的主要目的是 。
（3）用台盼蓝试剂检测细胞活性的主要原理是 。
（4）图1所示结果表明 。
（5）根据图2判断，骨肉瘤细胞中 基因过度表达会加速细胞凋亡。
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骨肉瘤是最常见的恶性成骨性肿瘤之一。科研人员研究曲古抑菌A（TSA）对人骨肉瘤细胞凋亡的影响及作用机制，为临床治疗寻找新方向。实验过程如下：
步骤1 用含青霉素和链霉素的高糖培养基，在37℃、5% CO2培养箱中培养人骨肉瘤细胞一段时间。
步骤2 取适宜浓度的处于生长旺盛期的人类骨肉瘤细胞，用加入不同浓度的TSA（0～ 200
ng·mL-1）的培养基继续培养24h。
步骤3 对各组细胞进行抽样检测，检测方法是先用台盼蓝试剂（一种细胞活性染料）染色再用血细胞计数板计数，统计细胞存活率（未染色细胞数/细胞总数×100%），结果如图1。
步骤4 分别提取TSA浓度为0 ng·mL-1、25 ng·mL-1、50 ng·mL-1处理的3组细胞，测量细胞中与凋亡相关的基因（Bax、Bcl-2）和β-肌动蛋白基因（不同的组织细胞中表达相对恒定）表达的蛋白质量并计算比值，结果如图2。
分析回答：
（1）与正常成骨细胞相比，骨肉瘤细胞容易在体内分散和转移，其主要原因是 。高糖培养基中加入青霉素和链霉素的目的是 ，细胞培养箱中保持5% CO2的作用是 。
（2）步骤2中，设置0 ng·mL-1 TSA实验的主要目的是 。
（3）用台盼蓝试剂检测细胞活性的主要原理是 。
（4）图1所示结果表明 。
（5）根据图2判断，骨肉瘤细胞中 基因过度表达会加速细胞凋亡。
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胃癌是我国常见的恶性肿瘤之一，发病率及死亡率都较高。Akt是一种蛋白激酶，在肿瘤的发生发展中起着重要作用。科研人员研究了Akt抑制剂对人胃癌细胞细胞周期的影响。
（1）环境中的致癌因子使细胞中 发生突变，导致正常细胞变成癌细胞。由于癌细胞膜上的
等物质减少，使癌细胞容易在体内转移。
（2）取人胃癌组织加入 将其分散成单个细胞，制成细胞悬液。接种于培养瓶中，加入Akt抑制剂进行培养，同时设置对照组。由于人们对细胞所需的营养物质还没有完全明确，因此在制备的培养液中通常需加入 等天然成分。将培养瓶置于5%CO2培养箱中进行培养的原因是 。
（3）细胞周期包括分裂间期和分裂期（M期）。分裂间期又包括一个DNA复制期（S期）和复制期前后的两个间隙期（G1期和G2期）。Akt抑制剂对人胃癌细胞细胞周期影响的实验结果如图。图中a峰与c峰之间的b段细胞发生的主要变化是 。该结果说明Akt抑制剂可以将细胞阻滞于细胞周期中的 期，这为胃癌的临床治疗提供了理论依据。
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胃癌是我国常见的恶性肿瘤之一，发病率及死亡率都较高。Akt是一种蛋白激酶，在肿瘤的发生发展中起着重要作用。科研人员研究了Akt抑制剂对人胃癌细胞细胞周期的影响。
（1）环境中的致癌因子使细胞中______发生突变，导致正常细胞变成癌细胞。由于癌细胞膜上的
_________________等物质减少，使癌细胞容易在体内转移。
（2）取人胃癌组织加入______将其分散成单个细胞，制成细胞悬液。接种于培养瓶中，加入Akt抑制剂进行培养，同时设置对照组。由于人们对细胞所需的营养物质还没有完全明确，因此在制备的培养液中通常需加入______等天然成分。将培养瓶置于5%CO2培养箱中进行培养的原因是____________。
（3）细胞周期包括分裂间期和分裂期（M期）。分裂间期又包括一个DNA复制期（S期）和复制期前后的两个间隙期（G1期和G2期）。Akt抑制剂对人胃癌细胞细胞周期影响的实验结果如图。图中a峰与c峰之间的b段细胞发生的主要变化是______。该结果说明Akt抑制剂可以将细胞阻滞于细胞周期中的______期，这为胃癌的临床治疗提供了理论依据。
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体细胞核移植已经成功克隆了多种哺乳动物，但成功率很低。研究表明一定浓度的TSA（曲古抑菌素A）能提高克隆胚胎的囊胚发育率及克隆后代的存活率，为了优化TSA的处理方案，科研人员研究了TSA浓度及处理时间对猪核移植胚胎体外发育的影响，其基本操作过程如下，过程①中添加TSA。请据图回答问题：
（1）收集的卵母细胞应培养到______期进行去核，去核的同时一并将______ 去掉。
（2）过程①除加入激素、氨基酸、维生素等营养物质外，还需加入__等天然成分，培养的气体中应控制5%左右的CO2,其目的是______。
（3）在进行过程②操作前应对代孕母猪进行______ 处理，使生殖器官处于相同的生理状态；通过手术进行过程②操作，应从______（部位）将早期胚胎注入子宫，可提高胚胎的着床率。
（4）下表1表示实验一（不同浓度TSA处理重组细胞12h）的实验结果，下表2表示在实验一基础之上做的实验二（某浓度TSA处理重组细胞12h和24h）的实验结果。实验二所用TSA的浓度是___，表2数据表明______ 有助于提高猪核移植胚胎的发育潜能。
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结肠癌是一种常见的消化道恶性肿瘤，在年轻人中的发生率呈上升趋势。白藜芦醇对结肠癌有一定的治疗作用，为探究其机制，做了相关研究。
（1 ）细胞发生癌变的根本原因的____________的突变，因其具有____________的特点，是癌症较难治愈的部分原因。
（2）为研究白藜芦醇对结肠癌H116细胞的作用机理，将H116细胞分别用不同浓度白藜芦醇处理，置于____________恒温培养箱中培养24、48、72小时后检测细胞增殖情况，如图所示：
结果表明____________________________________。
（3）为探究白藜芦醇的作用机理，用流式细胞仪分析不同浓度白藜芦醇处理的H116细胞的细胞周期，结果如下表：
| 日期白藜芦醇浓度（μM） | 0 | 20 | 80 | 100 |
| G1 | 49．81 | 78．04 | 82．74 | 84．34 |
| S | 38．99 | 18．61 | 8．48 | 8．48 |
| G2 | 11．20 | 3．35 | 8．78 | 8．78 |
结果表明，与对照组相比，白藜芦醇的作用是使细胞停留在__________期，其机理是____________。
（4）进一步研究发现，Akt对于细胞增殖具有重要作用，用不同浓度的白藜芦醇处理H116细胞，检测细胞中Akt和磷酸化的Akt表达量，如图2所示，推测白藜芦醇的作用是_______________________。
注：细胞中GAPDH表达量丰富且稳定，在实验中可作为标准参照。
（5 ）综合（2 ）、（ 3 ）、（ 4 ）实验结果推测，白藜芦醇治疗结肠癌的机理是___________________。
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相关研究表明，蜂毒素可引起细胞凋亡。科研人员为进一步研究蜂毒素对人胃癌细胞的影响及作用机制，进行了以下实验。请完善相关实验并回答问题。
（1）方法步骤：
a．取4只相同的培养瓶，编号，分别加入等量的完全培养液和__________。
b．1号培养瓶为空白对照，向2-4号培养瓶中分别加入____________。
c．培养48h后，检测并统计____________，结果如下图所示：
（2）分析与讨论：
a．图-1表明：_______________。增强
b．图-1、图-2表明：促进胃癌细胞凋亡的是__________，抑制胃癌细胞凋亡的是____________ 。因此，从基因水平上看，蜂毒素诱导胃癌细胞凋亡的原理是____________。
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恶性肿瘤严重危害人类健康，在机体对抗肿瘤细胞的过程中，DC 细胞（具有抗原呈递功能的树突状细胞）和 NK 细胞（自然杀伤细胞）发挥了重要的作用。研究人员针对这两类细胞在杀伤肿瘤细胞中的作用机制开展了相关研究。
（1）正常情况下人体内绝大多数的巨噬细胞仅具有较强的吞噬、处理抗原的能力。在受到抗原或特定信号刺激时，部分巨噬细胞可_____为 DC 细胞，将抗原呈递给 T 细胞，从而激活机体的_____免疫功能。
（2）正常机体中的NK 细胞能够杀伤肿瘤细胞，使其破裂，释放其内部抗原物质。这种杀伤作用是天然的，无需特定抗原预先加以致敏。因此，NK 细胞的功能属于免疫系统的第_____道防线。
（3）为研究 DC 细胞与 NK 细胞在杀伤肿瘤细胞过程中的关系，研究人员利用体外培养的DC 细胞、NK 细胞、多种肿瘤细胞等进行相关实验。
①研究者先用 51Cr标记肿瘤细胞，然后与不同处理下的NK 细胞共培养，通过检测________（选择填写“上清液”或“沉淀”）中的放射性强弱来确定 NK 细胞对肿瘤细胞的裂解能力。
②下图所示实验结果说明_____。
（4）肿瘤组织中会有大量 NK 细胞、DC 细胞和效应 T 细胞聚集，若清除实验动物体内的NK 细胞可导致肿瘤组织中 DC 细胞数量和效应 T 细胞数量大幅下降。请综合（1）~（3）信息对此实验现象进行解释 ______________________。
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药物X能够诱导肿瘤细胞凋亡，右图为用不同浓度的药物X体外处理人肝癌细胞的作用结果，相关叙述错误的是
A．细胞凋亡基因突变，可能引发肝癌
B．l.00g/L为临床治疗肝癌的最适药物X浓度
C．药物X可能影响细胞凋亡相关基因的表达
D．药物X的浓度及处理时间均影响肝癌细胞存活
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PD-1与PD-L1是目前肿瘤治疗的热门靶点蛋白。sPD-1是PD-1的可溶形式，能够被分泌至胞外。为探讨sPD-1对肿瘤疫苗抗乳腺癌作用的影响，科研人员进行了相关研究。
（1）因为癌细胞具有____________等特征，癌症的治疗非常困难。肿瘤疫苗是新型治疗方法，其原理是将肿瘤抗原导入人体内，激活患者自身的免疫应答，从而达到控制或清除肿瘤的目的，下列可做为肿瘤抗原的是____________（填写序号）。
①衰老肿瘤细胞②肿瘤相关蛋白或多肽③含有肿瘤抗原基因的表达载体④肿瘤细胞内的脱氧核糖
（2）研究发现，肿瘤疫苗可激活T细胞并诱导其产生IFN-γ（一种淋巴因子）。用不同浓度的IFN-γ培养小鼠乳腺癌细胞，并对其细胞膜上PD-L1表达情况进行检测，结果如图1：
与对照组相比，实验组小鼠乳腺癌细胞膜蛋白PD-L1表达____________。
（3）进一步研究发现，在正常机体中，组织细胞表面的PD-L1与T细胞表面的PD-1结合（如图2），使T细胞活性被适当抑制，避免了免疫过强而导致自身免疫性疾病的发生。肿瘤细胞PD-L1的高水平表达会____________（填“降低”或“增加”）肿瘤细胞被免疫系统清除的可能性。研究发现使用肿瘤疫苗时随着时间的延长而作用效果减弱，根据（2）和（3）推测可能的原因是____________，从而抑制了T细胞对肿瘤细胞的清除作用。
（4）为了解决这一问题，科研人员对作为肿瘤疫苗的衰老癌细胞疫苗进行了基因改造，使其可以大量分泌可与PD-L1结合的sPD-1，并进行了如下实验：实验小鼠皮下接种小鼠乳腺癌细胞，随机分为三组，分别给予衰老癌细胞疫苗、高表达sPD-1的衰老癌细胞疫苗、磷酸缓冲液（对照）处理，分别于6、12、18、24、30天记录并统计无瘤小鼠的比例，结果如图3所示。综合上述实验分析，解释高表达sPD-1的衰老癌细胞疫苗组无瘤小鼠比例最高的可能机理____________。