下图表示某科学家利用胚胎干细胞对干扰素基因缺失小鼠进行基因治疗的相关过程，据图回答下列问题：
（1）步骤①②利用的技术名称分别是________、_______ 。图中造血干细胞中的遗传物质至少有_________个来源。
（2）若利用PCR技术扩增目的基因并完成图示小鼠的基因治疗，涉及的酶有限制性核酸内切酶、DNA连接酶、__________________和胰蛋白酶等。
（3）下图所示的一个质粒分子经EcoRⅠ切割前后，分别含有______、__________个游离的磷酸基团。由于DNA复制时，子链只能由5′向3′方向延伸，故利用PCR技术扩增干扰素基因时，可以从下图A、B、C、D四种单链DNA片段中选取_______作为引物。一个目的基因通过PCR技术扩增第n次时，需要________个引物。
（4）将步骤③获得的ES细胞在荧光显微镜下观察，选择发_______色荧光的细胞进行体外诱导。为检测干扰素基因是否转录，可以采用________________________的技术。
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下图表示某科学家利用胚胎干细胞对干扰素基因缺失小鼠进行基因治疗的相关过程，据图回答下列问题：
（1）步骤①②利用的技术名称分别是________、_______ 。图中造血干细胞中的遗传物质至少有_________个来源。
（2）若利用PCR技术扩增目的基因并完成图示小鼠的基因治疗，涉及的酶有限制性核酸内切酶、DNA连接酶、__________________和胰蛋白酶等。
（3）下图所示的一个质粒分子经EcoRⅠ切割前后，分别含有______、__________个游离的磷酸基团。由于DNA复制时，子链只能由5′向3′方向延伸，故利用PCR技术扩增干扰素基因时，可以从下图A、B、C、D四种单链DNA片段中选取_______作为引物。一个目的基因通过PCR技术扩增第n次时，需要________个引物。
（4）将步骤③获得的ES细胞在荧光显微镜下观察，选择发_______色荧光的细胞进行体外诱导。为检测干扰素基因是否转录，可以采用________________________的技术。
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科研人员利用胚胎干细胞（ES细胞）对干扰素基因缺失小鼠进行基因治疗。其技术流程如图，请回答下列问题：
（1）图中卵母细胞应在体外培养到______期，步骤①应先对卵母细胞进行______处理。
（2）由图可知，步骤②要分离出ES细胞，需将重组胚胎培养到______期。
（3）步骤③选择ES细胞作为受体细胞而不是上皮细胞，是因为ES细胞______，该过程需要先利用______技术扩增干扰素基因，其前提是要有一段已知干扰素基因的核苷酸序列以便合成______。
（4）步骤④应在培养液中加入______。为检测干扰素基因是否在小鼠体内成功表达，可以采用______技术。
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科研人员利用胚胎干细胞对干扰素基因缺失小鼠进行基因治疗， 其技术流程如图。 请回答：
⑴ 过程①获得重组胚胎之前需要通过______技术获得重组细胞， 接受细胞核的卵母细胞应处于时期， 并用微型吸管吸出______。
⑵ 步骤②中， 重组胚胎培养到囊胚期时， 可从其______分离出 ES 细胞， ES 细胞在形态上表现为细胞核______ 、明显， 在功能上具有______。
⑶ 步骤③中， 需要构建含干扰素基因的______， 构建之前可以利用______技术对目的基因进行扩增。
⑷ 步骤③中将基因导入 ES 细胞的方法通常是______法， 为了检测 ES 细胞的 DNA 上是否插入了干扰素基因， 可采用______技术。 在正常的小鼠体内， 干扰素是在______(填一种细胞器)上合成的。
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科研人员利用胚胎干细胞（ES细胞）对干扰素基因缺失小鼠进行基因治疗。其技术流程如下图，下列说法正确的是
A. ①过程中，需将体内取出的卵母细胞在体外培养至某时期，该期卵母细胞核的位置靠近第二极体
B. 重组胚胎经②过程培养到囊胚期，可从其内细胞团分离出ES细胞
C. 过程③说明此技术是利用基因工程产品治疗小鼠疾病
D. 体外诱导ES细胞要在培养液中加入促生长因子以诱导其向不同类型的组织细胞分化
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科研人员利用胚胎干细胞（ES细胞）对干扰素基因缺失小鼠进行基因治疗。其技术流程如下图，下列说法正确的是
A. ①过程中，需将体内取出的卵母细胞在体外培养至某时期，该期卵母细胞核的位置靠近第二极体
B. 重组胚胎经②过程培养到囊胚期，可从其内细胞团分离出ES细胞
C. 过程③说明此技术是利用基因工程产品治疗小鼠疾病
D. 体外诱导ES细胞要在培养液中加入促生长因子以诱导其向不同类型的组织细胞分化
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Rag2基因缺失小鼠不能产生成熟的淋巴细胞。科研人员利用胚胎干细胞(ES细胞)对Rag2基因缺失小鼠进行基因治疗。其技术流程如图：
(1)步骤①中，在核移植前应去除卵母细胞的________。
(2)步骤②中，重组胚胎培养到________期时，可从其内细胞团分离出ES细胞。
(3)步骤③中，需要构建含有Rag2基因的表达载体。可以根据Rag2基因的________设计引物，利用PCR技术扩增Rag2基因片段。用Hind Ⅲ和Pst Ⅰ限制酶分别在片段两侧进行酶切获得Rag2基因片段。为将该片段直接连接到表达载体，所选择的表达载体上应具有________________酶的酶切位点。
(4)为检测Rag2基因的表达情况，可提取治疗后小鼠骨髓细胞的________，用抗Rag2蛋白的抗体进行杂交实验。
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Rag2 基因缺失小鼠不能产生成熟的淋巴细胞。科研人员利用胚胎干细胞（ES 细胞）对 Rag2 基因缺失小鼠进行基因治疗。其技术流程如图：
（1）步骤①中，在核移植前应去除卵母细胞的_____。小鼠体细胞体外培养时， 所需气体主要是 O2 和 CO2，其中 CO2 的作用是维持培养液（基）的_____。
（2）步骤②中，重组胚胎培养到_________期时，可从其内细胞团分离出 ES 细胞。体外培养条件下，ES 细胞在_____细胞上，能够维持只增殖不分化的状态。
（3）步骤③中，需要构建含有 Rag2 基因的表达载体。可以根据 Rag2 基因的__________设计引物，利用 PCR 技术扩增 Rag2 基因片段。PCR 过程需要经过多次循环，每一个循环包括：加热变性→冷却复性→_____，其中冷却复性的目的_________。用 HindⅢ和 PstⅠ限制酶分别在片段两侧进行酶切获得 Rag2 基因片段。为将该片段 直接连接到表达载体，所选择的表达载体上应具有_____酶的酶切位点。
（4）为检测 Rag2 基因的表达情况，可提取治疗后小鼠骨髓细胞的_____，用_______________的抗体进行杂交实验。
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干扰素是抗病毒的特效药，干扰素基因缺失的个体，免疫力严重下降。科学家利用胚胎干细胞(ES细胞）对干扰素基因缺失的患者进行基因治疗。根据所学的知识，回答以下问题：
（1）干扰素的作用机理是：干扰素作用于宿主细胞膜上的相应受体，激活细胞核中基因表达产生多种抗病毒蛋白，其中有些蛋白可通过激活__________酶，使病毒的RNA水解。
（2）ES细胞是由早期胚胎或_________________中分离出来的—类细胞，这类细胞在形态上表现为_______________等胚胎细胞的特性。
（3）将经过修饰的腺病毒与干扰素基因重组形成的_______________转移到ES细胞中， 再筛选出成功转移的细胞进行扩增培养。对改造的ES细胞进行培养的过程中，为防止细菌的污染，可向培养液中添加一定量的_______________；培养液应定期更换，其目的是_______________；当细胞分裂生长到表面相互接触时,细胞会停止分裂增殖，这种现象称为_______________，此时在培养瓶内会形成_______________层细胞。最后将培养的ES细胞输入到患者体内，这种治疗方法称为_______________。
（4）由于干扰素在体外保存困难，可利用蛋白质工程对干扰素进行改造，基本途径是：预期蛋白质功能→____________→推测应有氨基酸序列→找到对应的脱氧核甘酸序列。
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Rag2基因缺失小鼠不能产生成熟的淋巴细胞。科研人员利用胚胎干细胞(ES细胞)对Rag2基因缺失小鼠进行基因治疗。其技术流程如下图：
(1)步骤①中所选的卵母细胞应处于________________________期。
(2)步骤②中，重组胚胎培养到囊胚期时，可从其________________分离出ES细胞，ES细胞在形态上表现为_____________________________的特点。
(3)步骤③中，需要构建含有Rag2基因的__________________。可以根据Rag2基因的核苷酸序列设计合成_____________，利用_______________技术扩增Rag2基因片段。用HindⅢ和PstⅠ限制酶分别在目的基因所在DNA片段两侧进行酶切获得Rag2基因片段。为将该片段直接连接到表达载体，所选择的表达载体上应具有_________________酶的酶切位点。
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Rag2基因缺失小鼠不能产生成熟的淋巴细胞。科研人员利用胚胎干细胞（ES细胞）对Rag2基因缺失小鼠进行基因治疗。其技术流程如下图：
（1）步骤①中所选的卵母细胞应处于__________________期。
（2）步骤②中，分离出ES细胞比体细胞全能性________。
（3）步骤③中，首先要获取目的基因，以下几种方法中需要模板的是___________
A．从基因组文库中获取目的基因
B．利用PCR 技术扩增目的基因
C．构建cDNA 文库
D．通过DNA 合成仪利用化学方法人工合成目的基因
（4）步骤③中，需要构建含有Rag2基因的______________。
（5）为检测Rag2基因的表达情况，可提取治疗后小鼠骨髓细胞的蛋白质，用抗Rag2蛋白的抗体进行________。
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