PCR技术是一种DNA的扩增技术，操作步骤简介如下：第一步：准备反应式溶液和模块DNA。A...

PCR技术是一种DNA的扩增技术，操作步骤简介如下：

第一步：准备反应式溶液和模块DNA。

A．配制聚合酶链式反应溶液：

配方：按如下比例进行配制：蒸馏水100、缓冲溶液15、氯化镁溶液8、引物13、引物23、DNA聚合酶、矿物油1(防止聚合酶在冻结时受伤害)；dATP、dGTP、dCTP、dTTP每一种各加5。

B．准备要拷贝的DNA：

提取准备要拷贝的DNA

(如可以用一牙签轻刮口腔内壁，将牙签放入蒸馏水中摇动。加热蒸馏水沸腾，使细胞破碎放出DNA。用离心机离心后，去除蒸馏水中较大的细胞碎片。这时上清液中就有了较纯的DNA。)

第二步：聚合酶链式反应。

①将要拷贝的DNA“B”放入反应液“A”中。

②水浴加热。首先，94 ℃，使DNA双螺旋解旋，历时1 min；然后，56 ℃，使引物结合到DNA上，历时90 s；最后，72 ℃，用聚合酶使DNA拷贝，历时90 s。③重复步骤②。每重复一次，即完成一次拷贝。

分析回答下列问题：

(1)以上材料可以说明（　　）

A．DNA的复制必须在活细胞内才能完成

B．DNA能指导蛋白质的合成

C．在合适的条件下，非细胞环境也能进行DNA复制

D．PCR技术是一种无性生殖技术

(2)为什么要加入两种引物。________________________________________________________________________

________________________________________________________________________。

引物的作用是什么？________________________________________________________________________

________________________________________________________________________。

(3)PCR技术中用到的DNA聚合酶，取自生长在温泉中的一种细菌，就PCR技术来讲，你认为使用这种细菌中提取的酶较普通的动植物体内提取的DNA聚合酶的优势是________________________________________________________________________

________________________________________________________________________。

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PCR技术是一种体外迅速扩增DNA片段的技术，操作步骤简介如下：

第Ⅰ步：准备“汤”和模板DNA

A．配制多聚酶链式反应“汤”

配方：蒸馏水100SPU　　缓冲液15SPU　　

氯化镁溶液8SPU　　引物Ⅰ3SPU　　

引物Ⅱ3SPU　　DNA聚合酶1SPU　　

矿物油1SPU　　dNTP每一种各加4SPU　　

注：①SPU是一种溶液的计量单位；②矿物油可防止聚合酶在冻结时受伤害，以保证酶的活性；③dNTP有四种：dATP、dGTP、dCTP、dTTP。

B．准备要拷贝的DNA

如要拷贝自己的DNA，可以用一牙签轻刮口腔内壁，将牙签放入蒸馏水中摇动。加热使蒸馏水沸腾，使细胞破碎释放出DNA。用离心机离心后，去除蒸馏水中较大的细胞碎片。这时上清液中就有了较纯的DNA。

第Ⅱ步：多聚酶链式反应

①将DNA(B)放入汤(A)中。②水浴加热。首先，95℃，使DNA双螺旋打开，历时1min；然后，55℃，使引物结合到DNA上，历时30s；最后，72℃，与DNA聚合酶结合使DNA复制，历时1min。③重复步骤②。每重复一次，即完成一次拷贝。

根据上述操作过程回答下列问题：

(1)以上材料可以说明（____）

A．DNA的复制必须在活细胞中才能完成

B．DNA能指导蛋白质的合成

C．在合适的条件下，非细胞环境也能进行DNA的复制

D．PCR技术是一种无性生殖技术

(2)若用人体细胞内的遗传物质做PCR扩增，则扩增后的几百亿个DNA分子起码可分为46种。要将其分开，可用电泳、染色等技术，常用的试剂有溴化乙锭等。有些试剂毒性较强，因此应戴上化学实验专用手套作为保护措施，以免其与皮肤接触。溴化乙锭是一种强烈的诱变物，若接触皮肤活细胞，很可能会引起（____）

A．基因重组

B．该个体会产生变异较大的后代

C．癌变

D．皮肤外层是死细胞，该物质接触皮肤后对人体不会有影响

(3)PCR技术中用到的DNA聚合酶，取自生长在热泉中的一种细菌。就PCR技术来讲，你认为使用这种细菌中提取的酶较普通的动植物体内提取的DNA聚合酶的优势是___________________。

(4)PCR技术能将某一DNA分子扩增成许多相同的DNA片段，原因是：①DNA分子具有____________________结构；②DNA复制时遵循______________________________原则。

(5)DNA分子进行扩增时，除了所要扩增的DNA片段外，还需要四种________________、__________和__________等条件。若已知DNA的一条单链的碱基组成为ATCCGAT，则与它互补的另一条单链的碱基组成为__________________________________________________。

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在进行DNA亲子鉴定时，需大量的DNA。PCR技术 （聚合酶链式反应）可以使样品DNA扩增，获得大量DNA克隆分子。该技术的原理是利用DNA的半保留复制，在试管中进行DNA的人工复制（如下图，图中黑色长方形是引物）。在很短的时间内将DNA扩增几百倍甚至几十亿倍，使实验室所需的遗传物质不再受限于活的生物体。

（1）图中的变性、延伸分别是指________、

。

（2）假设PCR反应中的DNA模板为P，第一轮循环的产物2个子代DNA为N₁，第二轮的产物4个子代DNA为N₂，N₁、N₂中分别含有模板DNA单链的DNA分别有________、________个。若继续循环，该DNA片段共经过30次循环后能形成________个这样的片段。

（3）某样品DNA分子中共含3000个碱基对，碱基数量满足：（A+T）/（G+C）＝1/2，若经5次循环，至少需要向试管中加入个腺嘌呤脱氧核苷酸。（不考虑引物所对应的片段）

（4）若下图为第1轮循环产生的产物。请在下面试卷空白处绘出以a链和b链为模板经PCR扩增的产物。

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在进行DNA亲子鉴定时，需大量的DNA。PCR技术(聚合酶链式反应)可以使样品DNA扩增，获得大量DNA克隆分子。该技术的原理是利用DNA的半保留复制，在试管中进行DNA的人工复制(如下图，图中黑色长方形是引物)。在很短的时间内将DNA扩增几百万倍甚至几十亿倍，使实验室所需的遗传物质不再受限于活的生物体。

(1)图中的变性、延伸分别是指________、________。

(2)假设PCR反应中的DNA模板为P，第一轮循环的产物2个子代DNA为N1，第二轮的产物4个子代DNA为N2，N1、N2中分别含有模板DNA单链的DNA分别有____个、____个。若继续循环，该DNA片段共经过30次循环后能形成____个DNA片段。

(3)若下图为第一轮循环产生的产物。请绘出以a链和b链为模板经PCR扩增的产物。

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下列关于PCR技术的描述，错误的是（ ）

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资料显示，近十年来，PCR技术（DNA聚合酶链式反应技术）成为分子生物实验的一种常规手段，其原理是利用DNA半保留复制的特性，在试管中进行DNA的人工复制（如下图），在很短的时间内，将DNA扩增几百万倍甚至几十亿倍，使分子生物实验所需的遗传物质不再受限于活的生物体。请据图回答：

（1）加热至94℃的目的是使DNA样品的键断裂，这一过程在生物体细胞内是通过________酶的作用来完成的。通过分析得出新合成的DNA分子中，A=T，C=G，这个事实说明DNA分子的合成遵循________。

（2）新合成的DNA分子与模板DNA分子完全相同的原因是

________和________。

（3）通过PCR技术使DNA分子大量复制时，若将一个用¹⁵N标记的模板DNA分子（第一代）放入试管中，以¹⁴N标记的脱氧核苷酸为原料，连续复制到第五代时，含¹⁵N标记的DNA分子单链数占全部DNA总单链数的比例为________。

（4）PCR技术不仅为遗传病的诊断带来了便利，而且改进了检测细菌和病毒的方法。若要检测一个人是否感染了艾滋病病毒，你认为可以用PCR扩增血液中的（    ）

A．白细胞DNA   　   B．病毒蛋白质 　     C．血浆抗体  　     D．病毒核酸

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资料显示，近十年来，PCR技术（DNA聚合酶链式反应技术）成为分子生物实验的一种常规手段，其原理是利用DNA半保留复制的特性，在试管中进行DNA的人工复制（如下图），在很短的时间内，将DNA扩增几百万倍甚至几十亿倍，使分子生物实验所需的遗传物质不再受限于活的生物体。请据图回答：

（1）加热至94℃的目的是使DNA样品的＿＿＿键断裂，这一过程在生物体细胞内是通过＿＿＿＿酶的作用来完成的。PCR技术中所用的DNA聚合酶与生物体内的DNA聚合酶有什么区别？＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿。

（2）新合成的DNA分子与模板DNA分子完全相同的原因是＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿和＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿。

（3）通过PCR技术使DNA分子大量复制时，若将一个用¹⁵N标记的模板DNA分子（第一代）放入试管中，以¹⁴N标记的脱氧核苷酸为原料，连续复制到第五代时，含¹⁵N标记的DNA分子单链数占全部DNA总单链数的比例为＿＿＿＿。

（4）PCR技术不仅为遗传病的诊断带来了便利，而且改进了检测细菌和病毒的方法。若要检测一个人是否感染了艾滋病病毒，你认为可以用PCR扩增血液中的（    ）

A．白细胞DNA   　   B．病毒蛋白质 　     C．血浆抗体     D．病毒核酸

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资料显示，近10年来，PCR技术（DNA聚合酶链反应技术）成为分子生物实验的一种常规手段，其原理是利用DNA半保留复制的特征，在试管中进行DNA的人工复制（如下图），在很短时间内，将DNA扩增几百万倍甚至几十亿倍，使分子生物实验所需的遗传物质不再受限制于活的生物体。请据图回答：

（1）加热至94℃的目的是使DNA样品的_____键断裂，这一过程在生物体细胞内是通过______酶的作用来完成的。通过分析得出新合成的DNA分子中，A=T，C=G，这个事实说明DNA分子的合成遵循______。

（2）新合成的DNA分子与模板DNA分子完全相同的原因是________、________。

（3）通过PCR技术使DNA分子大量复制时，若将一个用15N标记的模板DNA分子（第一代）放入试管中，以14N标记的脱氧核苷酸为原料，连续复制到第五代时，含15N标记的DNA分子单链数占全部DNA总单链数的比例为_________。

（4）PCR技术不仅为遗传病的诊断带来了便利，而且改进了检测细菌和病毒的方法。若要检测一个人是否感染了艾滋病病毒，你认为可以用PCR扩增血液中的_______。

A．白细胞DNA 　 B．病毒蛋白质 　　 C．血浆抗体　 　　 D．病毒核酸

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聚合酶链式反应是一种用于放大扩增特定的DNA片段的分子生物学技术，由1983年美国Mullis首先提出设想，1985年由其发明了聚合酶链反应，即简易DNA扩增法，意味着PCR技术的真正诞生。到如今2013年，PCR已发展到第三代技术。1973年，台湾科学家钱嘉韵，发现了稳定的Taq DNA聚合酶，为PCR技术发展也做出了基础性贡献。下图为PCR扩增中第一轮的变化，结合所学回答下列问题：

（1）PCR是一项在生物____________复制特定DNA片段的核酸合成技术，它是利用__________的原理，将基因的核苷酸序列不断的加以复制，使其数量呈________方式增加。利用PCR技术扩增目的基因的前提，是要有_____________。

（2）PCR技术每一轮扩增中，需要参与的引物有_______________种，引物的本质是________，PCR扩增中需要dATP、dTTP、dCTP、dGTP的参与，它们的作用是______。参与PCR扩增的酶是Tap酶，它与普通的DNA聚合酶相比，特点是____________。

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Taq DNA 聚合酶的发现使得PCR 技术的广泛运用成为可能，这是因为

Ａ．Taq DNA 聚合酶能使扩增反应在 DNA 变性条件下进行

Ｂ．Taq DNA 聚合酶催化下的扩增反应不需要引物

Ｃ．Taq DNA 聚合酶使扩增反应不需要ATP

Ｄ．Taq DNA 聚合酶能使扩增反应具有连续性

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