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自然界中的微生物往往是混杂生长的。人们在研究微生物时一般要将它们分离提纯,然后进行数量的测定。下面是有关土壤中分解尿素的细菌分离和计数的实验过程,请回答有关问题。

(1)为分离出土壤中分解尿素的细菌,应该用_______________________的培养基进行分离,这种培养基属于______培养基(按功能分类)。可在培养基中加入_________指示剂对该类微生物鉴别。

(2)若取土样6g,应加入_______mL的无菌水配制成稀释10倍土壤溶液。因土壤中细菌密度很大,需要不断加以稀释,配制成101~107不同浓度的土壤溶液。将103~107倍的稀释液分别吸取0.2mL加入到固体培养基上,用涂布器将菌液铺平,每个稀释度下至少涂布3个平板,这种接种方法称为_______________。将接种的培养皿放置在37℃恒温培养箱中培养24h~48h,观察并统计菌落数,结果如下表,其中_______倍的稀释比较合适,由此计算出每克土壤中的菌落数为__________ 。这种方法测定的菌落数往往比活菌的实际数目_______(低/高)。

稀释倍数

103

104

105

106

107

菌落数

(个)

1号平板

478

367

277

26

5

2号平板

496

354

261

20

8

3号平板

509

332

254

29

3

(3)若研究尿素分解菌的群体生长规律,可采用平板划线法分离土壤中的尿素分解菌。操作时,接种环通过灼烧灭菌,在第二次及以后划线时,总是从上一次的末端开始划线。这样做的目的是_______________________。将分离纯化后的单个菌落进行液体培养,可采用定期取样的方法进行计数。若以一个大方格(体积为0.1mm3)有25个中方格的计数板为例进行计算,设五个中方格中总菌数为45,菌液稀释倍数为102,那么原菌液的菌群密度为________个/mL。

高三生物非选择题困难题

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