(一）为从养猪场周围土壤中分离产脲酶的微生物，进行了如下实验。（1）培养基的制备：本实验需...

(一）为从养猪场周围土壤中分离产脲酶的微生物，进行了如下实验。

（1）培养基的制备：本实验需在LB固体培养基和尿素固体培养基上进行接种，因尿素_____________，只能用_____________过滤。下列对本实验选用的尿素固体培养基和LB固体培养基的叙述，错误的是（____）

A.都要进行高压蒸汽灭菌   B.都含有N源   C.都要添加琼脂糖   D.都要添加酚红指示剂

（2）制备细菌悬液：在无菌条件下，将土样加到含有适量____________的三角瓶中，振荡摇匀，并以此方法制备不同浓度的土壤稀释液。

（3）接种：本实验采用的接种方法是____________。

(二）某研究小组利用下图所示的现代生物科学技术生产药用蛋白一一人组织纤溶酶原激活物（htPA)。请回答：

（1）构建重组表达载体时，通常用_____________切割htPA基因与载体，形成________，再通过DNA连接酶连接。

（2）为获取更多的实验用受精卵，要对供卵母羊注射相应激素，使其________________，获得较多的卵母细胞。采集的精子需要经过________________处理，才具备受精能力。

（3）若想获得更多转htPA基因母羊，还可以对含有htPA基因的胚胎进行________________。　　 然后再通过________________技术可获得较多后代。

（4）下列有关基因工程的叙述，正确的是（____）

A.载体上的抗性基因有利于筛选含重组DNA的细胞和促进目的基因的表达

B.大肠杆菌质粒是基因工程最常用的载体

C.若目的基因的序列是未知的，可选用PCR技术扩增目的基因

D.DNA连接酶催化形成氢键和磷酸二酯键的形成

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(一）为从养猪场周围土壤中分离产脲酶的微生物，进行了如下实验。

（1）培养基的制备：本实验需在LB固体培养基和尿素固体培养基上进行接种，因尿素_____________，只能用_____________过滤。下列对本实验选用的尿素固体培养基和LB固体培养基的叙述，错误的是（____）

A.都要进行高压蒸汽灭菌   B.都含有N源   C.都要添加琼脂糖   D.都要添加酚红指示剂

（2）制备细菌悬液：在无菌条件下，将土样加到含有适量____________的三角瓶中，振荡摇匀，并以此方法制备不同浓度的土壤稀释液。

（3）接种：本实验采用的接种方法是____________。

(二）某研究小组利用下图所示的现代生物科学技术生产药用蛋白一一人组织纤溶酶原激活物（htPA)。请回答：

（1）构建重组表达载体时，通常用_____________切割htPA基因与载体，形成________，再通过DNA连接酶连接。

（2）为获取更多的实验用受精卵，要对供卵母羊注射相应激素，使其________________，获得较多的卵母细胞。采集的精子需要经过________________处理，才具备受精能力。

（3）若想获得更多转htPA基因母羊，还可以对含有htPA基因的胚胎进行________________。　　 然后再通过________________技术可获得较多后代。

（4）下列有关基因工程的叙述，正确的是（____）

A.载体上的抗性基因有利于筛选含重组DNA的细胞和促进目的基因的表达

B.大肠杆菌质粒是基因工程最常用的载体

C.若目的基因的序列是未知的，可选用PCR技术扩增目的基因

D.DNA连接酶催化形成氢键和磷酸二酯键的形成

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某生物活动小组为测定当地农田土壤中分解尿素的细菌的数量，进行了随机取样、系列梯度稀释、涂布平板、培养、计数等步骤，实验操作如下：

请分析并回答下列问题：

（1）为了筛选和分离尿素分解菌，培养基中需要添加____________作为唯一氮源，除了必需的营养物质外，培养基中还需要添加____________。尿素分解菌能产生脲酶，把尿素分解成____________。

（2）在上述系列梯度稀释时，吸取前一试管（或锥形瓶）中lmL菌液到后一试管的工具是____________，该工具在使用前需要进行____________灭菌。

（3）实验结果：3号试管涂布的三个平板的菌落数为560、601、24，4号试管涂布的三个平板的菌落数为57、59、61，5号试管涂布的三个平板的菌落数为8、15、28。该10克土壤样品中含有尿素分解菌的估算数目是____________。通过该方法计算出来的数值往往比实际值低，原因是____________。在进行实验时，除了涂布的三个平板外，还需要至少准备一个空白培养培养基做对照，目的是____________。

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根据现代生物技术的相关知识,回答下列问题:

（1）当糖源充足或缺少糖源时，醋酸菌分別能将　　　　　　 物质最终转变成醋酸。

（2）为了分离和计数土壤中分解尿素的细菌，配制如下培养基进行实验:

若在上述培养基中加入酚红指示剂，该培养基能对培养的细菌起到　　　　　　　　　 的作用。若取土样4g,应加入　　　　　　　 ml的无菌水配制成稀释10倍土壤溶液。因土壤中细菌密度很大，需要不断加以稀释，将104-107倍的稀释液分别吸取0．2mL加人到固体培养基上，在对位稀释倍数为106的培养基中统计3个平板上的菌落数分別为:219、212、256，则每克该土壤样品中的菌株数为 　　　　　　 （小数点后保留一位小数）。

（3）若为了获得更多青蒿素，霱将青蒿离体的细胞或组织培养成愈伤组织。青蒿的细胞分裂、组织分化能力比菊花困难一些，需要借助外源激素才能更好的分裂和分化。若上述培养基用来进行青蒿细胞、组织的组织培养，还应加入的具体植物激素是　　　　　　　　　　　　　　　 。

（4）若在青蒿素的提取过程中需用果胶酶，探究果胶酶最适用量时的自变量是　　　　 。

（5）若用凝胶色谱柱分离果胶酶大分子蛋白质时，果胶酶在色谱柱中移动的速度是　　　　 。

（6）胡萝卜素粗品用　　　　　　　 法进行鉴定，鉴定过程中需用　　　　　　　　　 作为对照。

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某些菌可将尿素分解成CO2和NH3。欲从土壤中分离能分解尿素的细菌，某研究小组利用成分为KH2PO4、 Na2HPO4、葡萄糖、琼脂、尿素的培养基进行了相关实验。请回答：

（1）在土壤微生物的培养过程中，培养基中的KH2PO4与Na2HPO4可以作为______被细菌利用外，它们还具有的功能为____________；葡萄糖的作用是____________。

（2）该培养基对土壤中的微生物具有选择作用，理由是____________。微生物能分解尿素的原因是这些微生物能合成____________。

（3）为能获得目的菌的单菌落，常对土壤样液做______处理。为便于确认目的菌，可在培养基中加入______指示剂，接种并培养后，可根据菌落周围______来判断该菌能分解尿素。

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某同学依据下图操作步骤，从土壤中分离以尿素为氮源的微生物。其中尿素固体培养基和尿素液体培养基均以尿素为唯一氮源。下列叙述正确的是（　　 ）

A.尿素固体培养基比尿素液体培养基多了琼脂

B.以尿素为唯一氮源的培养基的灭菌方式是过滤灭菌

C.利用液体培养基的培养需要振荡以提高营养成分的利用率

D.两种步骤获得的菌落比值相等（甲1/甲2=乙1/乙2）

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为从土壤中分离以尿素为氮源的微生物，所配置的固体培养基中不能含有的成分是（　　 ）

A.尿素 B.氯化钠 C.葡萄糖 D.琼脂

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分离土壤中分解尿素的细菌的实验操作中，对于获得纯化的尿素分解菌的单菌落影响最大的是

A．制备浸出液的土壤取自土壤的表层

B．涂布前涂布器未在酒精灯外焰上灼烧灭菌

C．牛肉膏蛋白胨培养基中添加尿素作为氮源

D．接种操作者的双手未用酒精棉进行消毒

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分离土壤中分解尿素菌的实验操作中，对于获得纯化的尿素分解菌的单菌落影响最大的是(　　　 )

A．制备浸出液的土壤取自土壤的表层

B．涂布前涂布器未在酒精灯外焰上灼烧灭菌

C．牛肉膏蛋白胨培养基中添加尿素作为氮源

D．接种操作者的双手未用酒精棉进行消毒

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从土壤中分离以尿素为氮源的细菌，下列实验操作不正确的_( )

A. 将土壤用无菌水稀释，制备10^－3~1O^－5土壤稀释液

B. 将不同浓度的土壤稀释液涂布于不同平板上

C. 用加入刚果红指示剂的选择培养基筛选分解尿素的细菌

D. 从周围出现红色环带的菌落中挑取能够分泌脲酶的菌株

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