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培育转基因奶牛生产人血清白蛋白的主要步骤如下：
（1）提取目的基因：人血清白蛋白基因可以从基因文库中提取，含有人所有基因的文库称为___________,获得人血清白蛋白基因后可利用__________技术进行扩增。
（2）构建基因表达栽体：构建人血清白蛋白基因表达栽体时，质粒和目的基因分别用__________处理后，其重组类型有三种，可根据重组DNA分子的___________________不同，筛选出含目的基因的重组质粒。
（3）把目的基因导入受体细胞：利用__________________技术将基因表达载体导入牛的____________并进行早期培养。
（4）早期胚胎培养和胚胎移植：早期胚胎培养到桑椹胚或囊胚时，可通过___________技术增加胚胎的数量，移植前需要取胚胎的______________细胞进行性别鉴定，移植后需要对受体母牛进行妊娠检査。
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人的血清白蛋白在临床上需求量很大，利用转基因奶牛乳腺生物反应器可生产人的血清白蛋白。回答问题：
（1）在培育转基因奶牛时，血清白蛋白基因应与多种调控组建重组在一起，其中_______应连接在目的基因首端。通过______________技术将其导人奶牛的受精卵中。
（2）导入目的基因的受精卵需培养到__________________阶段才可进行胚胎移植。暂不移入的早期胚胎可使用______________方法保存。
（3）进行胚胎移植前需要进行_________，目前最有效最准确的方法是_________，操作的基本程序是:从被检测的囊胚中取出滋养层细胞，提取DNA进行扩增，用位于Y染色体上的性别决定基因（即SRY基因）制成的探针进行检测，若未出现杂交链，则胚胎性别为____________，而基因工程中的______________步骤也会用到DNA探针。
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人的血清白蛋白在临床上需求量很大，利用转基因奶牛乳腺生物反应器可生产人的血清白蛋白。回答问题：
（1）在培育转基因奶牛时，血清白蛋白基因应与多种调控组建重组在一起，其中_______应连接在目的基因首端。通过______________技术将其导人奶牛的受精卵中。
（2）导入目的基因的受精卵需培养到__________________阶段才可进行胚胎移植。暂不移入的早期胚胎可使用______________方法保存。
（3）进行胚胎移植前需要进行_________，目前最有效最准确的方法是_________，操作的基本程序是:从被检测的囊胚中取出滋养层细胞，提取DNA进行扩增，用位于Y染色体上的性别决定基因（即SRY基因）制成的探针进行检测，若未出现杂交链，则胚胎性别为____________，而基因工程中的______________步骤也会用到DNA探针。
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人的血清白蛋白（HAS）在临床上需求量很大，目前通常将人的血清白蛋白基因转入奶牛细胞中，利用牛的乳腺细胞生产血清白蛋白，基本步骤如下：
Ⅰ.采集良种供体奶牛的卵母细胞和精子，通过体外受精，形成受精卵；
Ⅱ.将人血清白蛋白基因导入奶牛受精卵，形成重组细胞；
Ⅲ.电脉冲刺激重组细胞，促使其形成早期胚胎；
Ⅳ.将胚胎移植到受体母牛的子宫中，最终发育成转基因小牛。
请回答下列问题：
（1）步骤Ⅰ中，卵母细胞与精子结合过程中防止多精入卵的生理反应包括_____________ 。自然条件下，受精卵是在雌性动物的_________内完成的。
（2）步骤Ⅱ中，将人的血清白蛋白基因导入牛受精卵最为有效的方法是___________ 。导入基因前，需要将血清白蛋白基因与奶牛乳腺蛋白基因的启动子等调控组件重组在一起，这一步骤称为_____________________。
（3）步骤Ⅲ中，进行动物早期胚胎的体外培养时，培养液中除了含有各种无机盐和有机盐、维生素、氨基酸、核苷酸等营养成分外，还需要添加_______ 和动物血清。一般情况下，通常在合成培养基中加入一定量的抗生素，其目的是____________ 。
（4）步骤Ⅳ中，应选择性别为_______的奶牛胚胎进行移植。
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人的血清白蛋白（HAS）在临床上需求量很大，目前通常将人的血清白蛋白基因转入奶牛细胞中，利用牛的乳腺细胞生产血清白蛋白，基本步骤如下：
Ⅰ.采集良种供体奶牛的卵母细胞和精子，通过体外受精，形成受精卵；
Ⅱ.将人血清白蛋白基因导入奶牛受精卵，形成重组细胞；
Ⅲ.电脉冲刺激重组细胞，促使其形成早期胚胎；
Ⅳ.将胚胎移植到受体母牛的子宫中，最终发育成转基因小牛。
请回答下列问题：
（1）步骤Ⅰ中，卵母细胞与精子结合过程中防止多精入卵的生理反应包括_____________ 。自然条件下，受精卵是在雌性动物的_________内完成的。
（2）步骤Ⅱ中，将人的血清白蛋白基因导入牛受精卵最为有效的方法是___________ 。导入基因前，需要将血清白蛋白基因与奶牛乳腺蛋白基因的启动子等调控组件重组在一起，这一步骤称为___________。
（3）步骤Ⅲ中，进行动物早期胚胎的体外培养时，培养液中除了含有各种无机盐和有机盐、维生素、氨基酸、核苷酸等营养成分外，还需要添加_______ 和动物血清。一般情况下，通常在合成培养基中加入一定量的____________ ，防止杂菌污染。
（4）步骤Ⅳ中，应选择性别为_______的奶牛胚胎进行移植。
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人的血清白蛋白在临床上需求量很大，利用转基因奶牛乳腺生物反应器可生产人的血清白蛋白。回答问题：
（1）在培育转基因奶牛时，应将血清白蛋白基因与乳腺蛋白基因的______________等调控组件重组在一起，通过______________技术将其导人奶牛的受精卵中。
（2）导入目的基因的受精卵需培养到__________________阶段才可进行胚胎移植。暂不移入的早期胚胎可使用______________方法保存。
（3）进行胚胎移植前需要进行______________________，目前最有效最准确的方法是SRY — PCR法，操作的基本程序是:从被检测的囊胚中取出几个______________细胞，提取DNA进行扩增，用位于Y染色体上的性别决定基因（即SRY基因）制成的探针进行检测，若未出现杂交链，则胚胎性别为____________，而基因工程中的______________步骤也会用到DNA探针。
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（10分）血清白蛋白临床上需求量大，通常从人血液中提取。如果应用基因工程和克隆技术，将人的血清白蛋白基因转入奶牛受精卵细胞中，利用牛的乳汁生产血清白蛋白就成为可能。大致过程如下：
请回答下列问题：
（1）培育“乳腺反应器”动物的一个重要环节是获得人体血清白蛋白基因。获得人体血清白蛋白基因的常用方法是从人的细胞获得血清白蛋白基因转录生成的 ，然后在 酶的催化作用下合成血清白蛋白基因，再经过 技术获得大量血清白蛋白基因。
（2）重组表达载体构建是基因工程的核心，一个重组表达载体的组成，除了目的基因外，还必须有 、以及标记基因等部分。在此过程中除了使用工具酶外，还需使用的工具是________。
（3）若要获得遗传物质完全相同两个新个体，可对发育到桑椹期或囊胚期阶段的早期胚胎进行________处理，经过“最后一道工序”________植入到受体母牛体内。
（4）由于转基因表达产物存在于奶牛的乳汁中，检测其体内是否出现药用蛋白，在分子水平上的检测方法是从转基因生物乳汁中提取蛋白质，用________方法检测，若有________出现表明目的基因已形成蛋白质产品。
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（8分）人的血清白蛋白（HSA）在临床上需求量很大，通常从人血中提取。如果应用基因工程和克隆技术，将人的血清白蛋白基因转入奶牛细胞中，那么利用牛的乳汁生产血清白蛋白就成为可能。其大致过程如下：
I．采集良种供体奶牛的卵母细胞和精液，通过体外受精，形成受精卵；
II．将人血清白蛋白基因导入奶牛受精卵，形成重组细胞；
III．电脉冲刺激重组细胞促使其形成早期胚胎；
IV．将胚胎移植到受体母牛的子宫中，最终发育成转基因小牛。
请回答下列问题：
（1）一般情况下，良种奶牛所排出的能用于体外受精的卵母细胞往往数量不足，通
过 ________的方法可以获得更多卵母细胞。
（2）步骤I中，在体外受精前，需要对精子进行________________________处理。受精过程中防止多精入卵的生理反应包括________________反应和卵黄膜封闭作用。
（3）步骤II中，将目的基因导入受精卵最为有效的方法是________。导入前，需要
将血清白蛋白基因与奶牛乳腺蛋白基因的启动子等调控组件重组在一起，这一步骤属于基因工程操作“四步曲”中的________________________。
（4）实验步骤III中，进行动物早期胚胎的体外培养时，培养液中除了含有各种无机盐、有机盐类、维生素、氨基酸、核苷酸等营养成分外，还要添加激素和________。
（5）若需迅速得到大量转基因奶牛，可采用下列处理方法：
在步骤IV中将早期胚胎分离成若干个胚胎，让其分别发育成一头小牛。进行上述操作时，应选择发育至________阶段的胚胎进行操作，分割时必须注意要将早期胚胎中的________________________均等分割。
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人血清白蛋白（HSA)具有重要的医用价值，只能从血浆中制备。下图为培育转基因奶牛获得人血清白蛋白（HSA)的流程。回答下列问题：
（1）为了在短时间内获得大量HSA基因，可以采用___________技术。
（2）过程①常用__________法。在过程②进行之前，需对早期胚胎进行性别鉴定，可取胚胎细胞进行DNA分析，其采用的基因探针来自__________(填“常”或“性”)染色体。
（3）为了使HSA基因只在转基因奶牛乳腺细胞中表达，则构建基因表达载体时需要借助DNA连接酶在HSA基因前接上________________。
（4）检测牛奶中是否含有人血清白蛋白，可采用________技术。
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人血清蛋白在临床上需求量很大，通常从人血中提取，可利用转基因技术将人的血清白蛋白基因转入奶牛体内后，从转基因奶牛的乳汁中提取人血清白蛋白。回答下列问题：
（1）对获得的人血清白蛋白基因常用___________技术扩增其数量，该过程中用到的DNA聚合酶区别于其他酶的显著特点是____________________。
（2）基因工程的核心步骤是构建基因表达载体，其中____________位于基因的首端。将人血清白蛋白基因导入受精卵的常用方法是________________。
（3）体外受精前需要对奶牛的精子进行__________处理。通常用激素处理代孕母奶牛和供体母奶牛，使其生理条件达到同步，称为_____________处理。
（4）早期胚胎发育到_______阶段即可移植到代孕奶牛体内，移植后的胚胎能在受体子宫内存活的生理基础是_____________________。
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