用基因工程技术从分离、提纯的圆褐固氮菌中获取固氮基因,然后进行PCR扩增。表1和表2分别表示用PCR扩增固氮基因的反应体系及反应条件。
表1
PCR反 应体系 | 缓冲液 | 脱氧核 苷酸 | 引物A | 引物B | DNA 聚合酶 | 模板 DNA |
50 μL | 50 μL | 0.5 μL | 50 μL | 0.5 μL | 0.5 U | 1~2 μL |
加去离子水补足至50 μL | ||||||
表2
(1)从表1和表2中可得出,PCR技术与DNA复制相比较,主要区别之一是________。此外,从反应条件看,所使用的DNA聚合酶应具有________的特点。每次循环都需要2种引物的主要原因是______________。
(2)在对固氮基因产物的生产研究中,需要从复杂的细胞混合物中提取、分离高纯度的蛋白质。下图表示蛋白质提取和分离实验涉及的相关原理。
①图甲表示相对分子质量不同的蛋白质通过凝胶色谱法分离的过程。试管中收集到的液体最先出现的是相对分子质量较大的蛋白质,原因_______________________________________________。
②图乙所示实验模拟电泳现象,U型管左侧的颜色逐渐变深,原因是_________________________。
高二生物综合题困难题
用基因工程技术从分离、提纯的圆褐固氮菌中获取固氮基因,然后进行PCR扩增。表1和表2分别表示用PCR扩增固氮基因的反应体系及反应条件。
表1
PCR反 应体系 | 缓冲液 | 脱氧核 苷酸 | 引物A | 引物B | DNA 聚合酶 | 模板 DNA |
50 μL | 50 μL | 0.5 μL | 50 μL | 0.5 μL | 0.5 U | 1~2 μL |
加去离子水补足至50 μL | ||||||
表2
(1)从表1和表2中可得出,PCR技术与DNA复制相比较,主要区别之一是________。此外,从反应条件看,所使用的DNA聚合酶应具有________的特点。每次循环都需要2种引物的主要原因是______________。
(2)在对固氮基因产物的生产研究中,需要从复杂的细胞混合物中提取、分离高纯度的蛋白质。下图表示蛋白质提取和分离实验涉及的相关原理。
①图甲表示相对分子质量不同的蛋白质通过凝胶色谱法分离的过程。试管中收集到的液体最先出现的是相对分子质量较大的蛋白质,原因_______________________________________________。
②图乙所示实验模拟电泳现象,U型管左侧的颜色逐渐变深,原因是_________________________。
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用基因工程技术从分离、提纯的圆褐固氮菌中获取固氮基因,然后进行PCR扩增。表1和表2分别表示用PCR扩增固氮基因的反应体系及反应条件。
表1
PCR反 应体系 | 缓冲液 | 脱氧核 苷酸 | 引物A | 引物B | DNA 聚合酶 | 模板 DNA |
50 μL | 50 μL | 0.5 μL | 50 μL | 0.5 μL | 0.5 U | 1~2 μL |
加去离子水补足至50 μL | ||||||
表2
(1)从表1和表2中可得出,PCR技术与DNA复制相比较,主要区别之一是________。此外,从反应条件看,所使用的DNA聚合酶应具有________的特点。每次循环都需要2种引物的主要原因是______________。
(2)在对固氮基因产物的生产研究中,需要从复杂的细胞混合物中提取、分离高纯度的蛋白质。下图表示蛋白质提取和分离实验涉及的相关原理。
①图甲表示相对分子质量不同的蛋白质通过凝胶色谱法分离的过程。试管中收集到的液体最先出现的是相对分子质量较大的蛋白质,原因_______________________________________________。
②图乙所示实验模拟电泳现象,U型管左侧的颜色逐渐变深,原因是_________________________。
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(10分)圆褐固氮菌是自生固氮菌,为经济有效地提高农作物产量,人们一直在努力研究、寻找固氮基因。对基因的研究常常因研究样品中DNA含量太低而难以进行,PCR技术有效地解决了这个问题。如今对基因的深入研究使人类跨入了蛋白组研究时代,从复杂的细胞混合物中提取、分离高纯度的蛋白质是该研究要做的基本工作之一。
(1)某同学在做微生物实验时,不小心把圆褐固氮菌样品和酵母菌样品混在一起,已知青霉素会影响固氮菌的生长繁殖,但不影响真菌的生长繁殖。请填空完成分离这两种菌的主要实验步骤:
①分别配置________的培养基和________的培养基,分别分成两份,依次标上A、a、B、b备用;
②分别向A、B培养基接种________;
③把接种后的培养基放在恒温箱中3d—4d;
④从A、B培养基上生长的________中挑取生长良好的菌株,分别接种到________中;
⑤________。
(2)用基因工程技术从经过分离、提纯的圆褐固氮菌中获取固氮基因,然后进行PCR扩增。下列表1和表2分别表示用PCR扩增固氮基因的反应体系及反应条件。
反应条件 | ||
温度 | 时间 | |
变 性 | 95℃ | 30s |
复 性 | 55℃ | 30s |
延 伸 | 72℃ | 1min |
30个循环后 | 适宜 | 5-10min |
保 温 | 4℃ | 2h |
PCR反应体系 | 50ul |
缓冲液 | 5ul |
脱氧核苷酸 | 1ul |
引物A | 0.5ul |
引物B | 0.5ul |
DNA聚合酶 | 0.5U |
模板DNA | 1-2ul |
加去离子水补足至50 ul |
①从上表中可得出,PCR技术与DNA复制相比较,主要区别之一是________。
此外,从反应条件看,所使用的DNA聚合酶应具有__________的特点。每次循环都需要2种引物的主要原因是_______________________________________。
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下图表示基因工程中目的基因的获取示意图,不正确的是( )
A.③表示PCR技术,用来扩增目的基因
B.从基因文库中要得到所需的目的基因可以根据目的基因的相关信息来获取
C.若获取的目的基因相同,则图中基因组文库小于cDNA文库
D.若基因比较小,核苷酸序列又已知,则可以直接通过人工合成的方法获取
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下列关于 PCR 技术的叙述,不正确的是( )
A.PCR 即聚合酶链式反应,利用其可获取大量目的基因
B.PCR 的原理是 DNA 双链复制,可以在仪器中自动完成
C.PCR 技术扩增目的基因时要知道目的基因的部分序列
D.PCR 技术扩增目的基因时必须用解旋酶解开双链 DNA
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下图表示基因工程中目的基因的获取示意图,不正确的是( )
A. ③表示PCR技术,用来扩增目的基因
B. 若获取的目的基因相同,则图中基因组文库小于cDNA文库
C. 要从基因文库中得到所需的目的基因可以根据目的基因的相关信息
D. 若基因比较小,核苷酸序列又已知,可以通过化学方法直接人工合成获取
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下列不属于基因工程中获取目的基因的方法的是
A. 利用DNA合成仪直接进行人工合成
B. 利用PCR技术扩增实现大量生产
C. 利用限制酶在受体细胞中获得
D. 从基因文库中获取
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下图表示基因工程中目的基因的获取示意图,不正确的是( )
A.③表示PCR技术,用来扩增目的基因
B.若获取的目的基因相同,则图中基因组文库小于cDNA文库
C.要从基因文库中得到所需的目的基因可以根据目的基因的相关信息
D.若基因比较小,核苷酸序列又已知,可以通过化学方法直接人工合成获取
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下列关于现代生物科学技术与应用的叙述中,错误的是( )
A.利用PCR扩增目的基因时,需利用TaqDNA聚合酶
B.通过植物组织培养获取细胞产物的过程中,需对培养基进行灭菌处理
C.在胚胎分割移植前,要对供受体进行同期发情处理
D.生态农业利用了废弃物中的能量,从而大大提高了能量的传递效率
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下列关于现代生物科学技术与应用的叙述中,正确的是
A. 利用PCR扩增目的基因时,需利用Taq DNA 聚合酶
B. 通过植物组织培养获取细胞产物的过程中,需对培养基进行灭菌处理
C. 在胚胎分割移植前,可用分割针取滋养层细胞鉴定性别
D. 生态农业实现了物质与能量的循环利用
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