菊天牛是菊花的主要害虫之一。科研人员将抗虫基因转入菊花，培育出抗虫菊花。下图是获得转基因菊花的技术流程。请据图回答：
（注：卡那霉素抗性
基因（kanR）作为标记基因，菊花叶片对卡那霉素高度敏感）
（1）质粒是基因工程中最常用的载体，此外还可用 
作为运载体。
（2）为了促进土壤农杆菌吸收重组质粒，可在低温下，用 处理，使其处于感受态。
（3）将愈伤组织转移到添加一定浓度植物激素、营养物质以及 的固体培养基中，在适宜条件下进行培养，初步筛选转基因菊花。
（4）将转基因菊花嫩茎及叶片与人工饲料以适当比例混合后饲喂菊天牛2 龄幼虫，实验结果如下表所示。
请据表回答：
①对照组应饲喂等量的 。
②据表分析， 差异显著，说明转基因菊花对菊天牛2龄幼虫有较强的毒杀作用。
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菊天牛是菊花的主要害虫之一。科研人员将抗虫基因转入菊花，培育出抗虫菊花。下图是获得转基因菊花的技术流程。请据图回答：
（注：卡那霉素抗性基因（kanR）作为标记基因，菊花叶片对卡那霉素高度敏感）
（1）质粒是基因工程中最常用的载体，其化学本质是________，此外还可用______作为载体。
（2）下图限制酶M和N切割产生的黏性末端是__________，连接它们所需要的基本工具是___________________。
（3）为了促进土壤农杆菌吸收重组质粒，可用_______处理，使其处于感受态。
（4）将愈伤组织转移到添加__________、营养物质以及___________和琼脂的固体培养基中，在适宜条件下进行培养，筛选转基因菊花。
（5）将转基因菊花嫩茎及叶片与人工饲料以适当比例混合后饲喂菊天牛2 龄幼虫，实验结果如下表所示。请据表回答：
| 组别 | 死亡率（%） | |
| 实验组 | 转基因植株1 | 60.00 |
| 转基因植株2 | 53.33 | |
| 对照组 | 13.33 |
①对照组应饲喂等量的_________________________________________________。
②据表分析，_____________________________差异显著，说明转基因菊花对菊天牛2龄幼虫有较强的毒杀作用。
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菊天牛是菊花的主要害虫之一。科研人员将抗虫基因转入菊花，培育出抗虫菊花。下图是获得转基因菊花的技术流程。请据图回答：
（注：卡那霉素抗性基因（kanR）作为标记基因，菊花叶片对卡那霉素高度敏感）
（1）质粒是基因工程中最常用的载体，此外还可用 作为运载体。
（2）为了促进土壤农杆菌吸收重组质粒，可在低温下，用 处理，使其处于感受态。
（3）将愈伤组织转移到添加一定浓度植物激素、营养物质以及 的固体培养基中，在适宜条件下进行培养，初步筛选转基因菊花。
（4）将转基因菊花嫩茎及叶片与人工饲料以适当比例混合后饲喂菊天牛2 龄幼虫，实验结果如下表所示。
请据表回答：
①对照组应饲喂等量的 。
②据表分析， 差异显著，说明转基因菊花对菊天牛2龄幼虫有较强的毒杀作用。
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科研人员利用精子作为载体，将人胰岛素基因（hINS）转入绵羊体内（图中BLG是羊的乳腺蛋白基因），以获得动物乳腺生物反应器，使羊的乳汁中含有人胰岛素。其技术流程如下：
请回答下列相关问题：
（1）构建的BLG-hINS重组质粒中目的基因的首端是________________，将重组质粒导入精子中的方法是_________________。
（2）给供体母羊注射促性腺激素，目的是使其________。在体外受精前，要对精子进行_______处理。在胚胎移植过程中，受体选择好后要用激素进行_________处理，其目的是_________，以保证移植的胚胎能够继续正常发育。
（3）为获得转基因母羊，在进行移植前，还需取滋养层细胞进行___________。将早期胚胎移植至代孕母羊体内时，不宜选择_________（填“原肠胚”、“桑椹胚”或“囊胚”）时期的胚胎。
（4）欲增加图中早期胚胎的数量，可通过胚胎工程中的___________技术来实现，在对囊胚进行操作时应注意________________________。
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我们日常吃的大米中铁含量极低，科研人员通过基因工程等技术，培育出了铁含量比普通大米高60%的转基因水稻，改良了稻米的营养品质。下图为培育转基因水稻流程示意图，请回答下列问题：
(l)铁结合蛋白基因来自菜豆，且基因的脱氧核苷酸序列已知，可以用________法获得此目的基因。
(2)构建重组Ti质粒时，通常要用________分别切割________和________。
(3)将含有重组Ti质粒的农杆菌与水稻愈伤组织共同培养时，通过培养基2的筛选培养，可以获得________ 。
(4)为研究外源基因的遗传方式，将T。代植株上收获的种子种植成T1，代株系，检测各单株的潮霉素抗性。在检测的多数T1代株系内，抗潮霉素植株与潮霉素敏感植株的比例为3：1，此结果说明外源基因的遗传符合________定律。有少数T1代株系的所有植株都表现为对潮霉素敏感，但其体内能检测到铁结合蛋白基因，造成这一结果最可能的原因是________。
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我们日常吃的大米中铁含量极低，科研人员通过基因工程等技术，培育出了铁含量比普通大米高60%的转基因水稻，改良了稻米的营养品质。下图为培育转基因水稻过程示意图，请分析回答。
（1）为了在短时间内获得大量铁结合蛋白基因，可以采用__________技术。与细胞内DNA复制时的解旋过程相比，该技术的DNA解链过程有何不同？__________________（写出一点即可）
（2）构建重组Ti质粒时，通常先要用________分别切割含目的基因的DNA片段和质粒，以使目的基因能插入农杆菌Ti质粒的______中。将重组Ti质粒导入农杆菌时，可以用________处理农杆菌，使重组Ti质粒易于导入。然后用该农杆菌感染植物细胞，通过DNA重组将目的基因插入植物细胞的______上．
（3）将含有重组Ti质粒的农杆菌与水稻愈伤组织共同培养时，通过培养基2的筛选培养，可以获得________；检测培育转基因水稻的目的是否达到，需要检测转基因稻米________。
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人血清白蛋白（HSA）具有重要的医用价值。科研人员通过生物工程技术获得转HSA基因母牛，以便通过乳腺生物反应器生产HSA，其主要技术流程如图所示：
回答下列问题：
（1）如图所示，将牛胎儿成纤维细胞核移入去核卵母细胞中，该技术称为____________技术；供核的牛胎儿成纤维细胞通常选用传代10代以内的细胞，其原因是_______________________。
（2）胚胎移植时，为使代孕母牛能处于适合的生理状态，需要用激素对其进行______________处理。
（3）SRY-PCR法性别鉴定的基本程序是：提取牛胎儿成纤维细胞的DNA，经PCR反应体系进行扩增，然后对扩增产物进行检测是否含SRY基因（Y染色体上特有的性别决定基因）片段。
①PCR反应体系中除含缓冲液、模板DNA、dNTP（包含dATP、dCTP、dGTP、dTTP）、引物以外，还应含有____________；其中，dNTP的作用是既能提供合成DNA的原料，又能____________，引物应选用如图2中的___________（填下图中标号）。
②若扩增产物含大量SRY基因片段，则该种牛胎儿成纤维细胞_______（填“能”或“不能”）用作技术流程中转化过程的受体细胞。
（4）早期胚胎发育的过程大致为：受精卵→ ________→囊胚→原肠胚，囊胚中的___________细胞将发育成胎膜和胎盘。
（5）从细胞水平鉴定早期胚胎性别的方法是分析细胞的_________组成。
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人血清白蛋白（HSA）具有重要的医用价值。科研人员通过生物工程技术获得转HSA基因奶牛，并通过乳腺生物反应器生产HSA，其主要技术流程如下图所示：
回答下列问题：
（1）如上图所示，供核的牛胎儿成纤维细胞通常选用传代10代以内的细胞，其原因是 _______________________________________________________________。
（2）SRY-PCR法性别鉴定的基本程序是：提取牛胎儿成纤维细胞的DNA，经PCR反应体系扩增SRY基因（Y染色体上特有的性别决定基因）片段，然后对扩增产物进行检测。
要大量获得SRY基因，PCR扩增时需要加入两种引物：__________________（选填“引物I”、“引物II”、“引物III”、“引物IV”），原因是DNA聚合酶只能从核苷酸链的______________（2分，选填“5’端”或“3’端”）开始延伸DNA链，用两种引物才能确保______________。除引物外，PCR反应体系中还包含缓冲液、模板DNA、____________和 ____________等成分。通过SRY-PCR法进行性别鉴定，可获得更多的转HSA基因________牛，以便其通过乳腺生物反应器生产人血清白蛋白。
（3）在胚胎移植操作中，应对供体和受体母牛进行_____________处理，目的是使供体和受体处于相同的生理状态，使胚胎在移植前后所处的生理环境保持一致。由此可见，胚胎移植的实质是_____________________________________________。
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科研人员利用胚胎干细胞对干扰素基因缺失小鼠进行基因治疗， 其技术流程如图。 请回答：
⑴ 过程①获得重组胚胎之前需要通过______技术获得重组细胞， 接受细胞核的卵母细胞应处于时期， 并用微型吸管吸出______。
⑵ 步骤②中， 重组胚胎培养到囊胚期时， 可从其______分离出 ES 细胞， ES 细胞在形态上表现为细胞核______ 、明显， 在功能上具有______。
⑶ 步骤③中， 需要构建含干扰素基因的______， 构建之前可以利用______技术对目的基因进行扩增。
⑷ 步骤③中将基因导入 ES 细胞的方法通常是______法， 为了检测 ES 细胞的 DNA 上是否插入了干扰素基因， 可采用______技术。 在正常的小鼠体内， 干扰素是在______(填一种细胞器)上合成的。
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科研人员利用基因工程技术获得了耐储存的转基因番茄，其原理如下图所示：
请回答下列问题。
（1）培育该转基因番茄过程中，目的基因是___________，核心步骤是___________。若要迅速获得大量目的基因，常用的技术是____________。
（2）重组质粒导入番茄细胞时，可以先让番茄细胞经过脱分化得到愈伤组织，再把愈伤组织浸入到含有重组质粒的___________菌液中，通过该菌的___________作用使目的基因进入番茄细胞。这种方法往往需要将目的基因结合到___________上，并最终将目 的基因插入到番茄细胞的___________上。
（3）据图分析，乙烯合成酶的反义基因与乙烯合成酶基因的异同是___________。
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2009年10月，我国自主研发的转基因抗虫水稻“华恢1号”获得农业部颁发的安全证书。下图表示该抗虫水稻主要培育流程，据图回答：
（1）④过程应用的主要生物技术是________。
（2）杀虫基因（crylA）是人们根据几种Bt毒蛋白的分子结构，设计并人工合成的，这属于________工程技术范畴。
（3）组建理想的载体需要对天然的质粒进行改造。下图是天然土壤农杆菌Ti质粒结构示意图（示部分基因及部分限制性内切酶作用位点），据图分析：
①人工改造时，要使抗虫基因表达，还应插入____________。
②人工改造时用限制酶Ⅱ处理，其目的是：第一，去除质粒上的________（基因），保证T-DNA进入水稻细胞后不会引起细胞的无限分裂和生长；第二，使质粒带有单一限制酶作用位点，有利于________________。第三，使质粒大小合适，可以提高转化效率等。
③若用限制酶Ⅰ分别切割改造过的理想质粒和带有抗虫基因的DNA分子，并构成重组Ti质粒。分别以含四环素和卡那霉素的培养基培养已成功导入抗虫基因的水稻胚细胞，观察到的细胞生长的现象是________。
（4）若限制酶Ⅱ切割DNA分子后形成的粘性末端为
，则该酶识别的核苷酸序列是________。
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