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传统发酵技术和微生物分离、纯化过程中，无菌操作是微生物接种技术的关键。某实验小组欲从污水污染的污泥中筛选出脲酶细菌(脲酶可将尿素分解为氨）。回答下列问题：
（1）配制培养基时各种成分在溶化后分装前一般需要先_______。平板冷却凝固后一般要_______放置，这样操作的目的是___________。
（2）在菌株筛选过程中，应将污泥样品稀释液接种于______________固体培养基上，并加入_________指示剂加以鉴别。平板划线法时在第二次及其后的划线操作时，总是从____________开始划线，原因是_______________。
（3）如何设计实验判断培养基是否被污染？__________________________。
（4）对于频繁使用的菌种，可以采用_____________的方法进行保藏，但该方法具有_______________________________缺点。
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无菌操作是微生物接种技术的关键；传统发酵技术和微生物分离、纯化、应用过程及植物组织培养和动物细胞培养过程中，均要无菌操作。回答下列相关问题：
（1）消毒和灭菌是两个不同的概念，灭菌是指彻底杀灭微生物使其永远丧失生长繁殖的能力。消毒仅指杀死一部分对人体有害的病原菌而对被消毒的物体基本无害。下列哪些事物适用于消毒处理__________ 。
①皮肤 ②饮用水 ③牛奶 ④注射器 ⑤培养皿 ⑥接种环 ⑦培养基 ⑧果汁 ⑨酱油 ⑩手术刀
A．①②③⑧⑨ B．④⑤⑥⑦⑩ C．①②③④⑤⑥⑧ D．以上全部
（2）配制培养基时各种成分在溶化后分装前必须进行调整_____________， 接种前要进行_____________， 在整个微生物的分离和培养中，一定要注意在无菌条件下进行。
（3）在微生物的实验室培养中，获得纯净培养物的关键是防止外来杂菌的入侵。下图是利用_______法进行大肠杆菌接种，把聚集的菌种逐步稀释分散到培养基的表面。为达到这一目的，操作上应注意：每次划线前要___________；冷却后从上一区划线末端开始划；首尾区_____________。
（4）有位同学在家制作泡菜时，为避免杂菌污染而向泡菜坛中加入了青霉素，结果发酵失败，原因可能是______________________。
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无菌操作是微生物接种技术的关键；传统发酵技术和微生物分离、纯化、应用过程及植物组织培养和动物细胞培养过程中，均要无菌操作。回答下列相关问题：
(1)消毒和灭菌是两个不同的概念，灭菌是指彻底杀灭微生物使其永远丧失生长繁殖的能力。消毒仅指杀死一部分对人体有害的病原菌而对被消毒的物体基本无害。下列哪些事物适用于消毒处理 。
①皮肤 ②饮用水 ③牛奶 ④注射器 ⑤培养皿 ⑥接种环 ⑦培养基⑧果汁 ⑨酱油 ⑩手术刀
A.①②③⑧⑨ B.④⑤⑥⑦⑩
C.①②③④⑤⑥⑧ D.以上全部
(2)配制培养基时各种成分在溶化后分装前必须进行 ，接种前要进行 ，在整个微生物的分离和培养中，一定要注意在无菌条件下进行。
(3)下图是利用 法进行大肠杆菌接种，把聚集的菌种逐步稀释分散到培养基的表面。为达到这一目的，操作上应注意：
①每次划线前要 ；
②冷却后从上一区划线末端开始划；
③首尾区 。
(4)利用培养基不仅可以分离培养大肠杆菌，也可以进行植物组织培养。与大肠杆菌培养明显不同的是，用于组织培养的培养基中还需要加入 。
(5)有位同学在家制作泡菜时，为避免杂菌污染而向泡菜坛中加入了青霉素，结果发酵失败，原因可能是 。
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下图为分离和纯化分解甲醛细菌的实验过程，其中LB培养基能使菌种成倍扩增。以下说法正确的是（ ）
活性污泥→10ml→10ml→接种→挑取不同菌落分别接种→取样测定甲醛浓度
①制取菌悬液②LB培养基，震荡培养③无机液体培养基，甲醛，恒温培养④无机固体培养基，甲醛，恒温培养⑤无机固体培养基，甲醛，震荡培养
A. 需要对活性污泥作灭菌处理
B. ②中LB培养基应以甲醛为唯一碳源
C. 目的菌种异化作用类型为厌氧型
D. 经⑤处理后，应选择瓶中甲醛浓度最低的一组进一步纯化培养
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微生物培养过程中，要十分重视无菌操作，现代生物学实验中的许多方面也要进行无菌操作，防止杂菌污染。下列无菌操作错误的是（ ）
A.尿素溶液通过细菌过滤器除菌
B.菌种和培养基使用前均需灭菌处理
C.接种前、后都要过火灼烧斜面菌种试管管口
D.高压蒸汽灭菌既能杀死微生物的营养体，也能杀死芽孢等休眠体
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某同学欲从被污染的土壤中采用富集培养的方法筛选出能高效降解原油的细菌，经过的一般步骤是采集菌样→富集培养→纯种分离→性能测定，实验过程如图所示，请分析回答：
（1）下面两组图是采用纯化微生物培养的两种接种方法接种后培养的效果图解，请分析接种的具体方法。
图A所示的接种方法是____________，图B所示的接种方法是_____________。
（2）在筛选过程中，应将__________接种于以___________为唯一碳源的培养基上，从功能上讲，该培养基属于___________培养基。
（3）现有1L土壤浸出液，用无菌吸管吸取1mL液样至盛有9mL无菌水的试管中，依次稀释l03倍．各取0.1mL已稀释103倍的水样分别接种到图A的三个培养基上培养，记录的菌落数分别为55、56、57，则1L原土壤浸出样液中菌体数为_________。
（4）为筛选出高效菌株，可比较单菌落周围透明带区域的大小．一般透明带区域越大说明该菌株降解原油的能力__________。
（5）配制培养基时各种成分在溶化后分装前必须进行_________，接种前要进行 ____________，在整个微生物的分离和培养中，一定要注意在___________条件下进行。
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家庭制作果酒、果醋和腐乳三种传统发酵食品的共同点是（ ）
A. 所有菌种均为异养原核生物
B. 接种时都不需要进行严格无菌操作
C. 菌种在整个发酵过程中始终生长旺盛
D. 制作过程中利用的都是微生物胞内酶
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Ⅰ．为了分离和纯化高效分解石油的细菌，科研人员利用被石油污染过的土壤进行了如图A 所示的实验。
（1）同学甲进行步骤④的操作，其中一个平板经培养后的菌落分布如图B所示。该同学的接种方法是_________，出现图B结果可能的失误操作是____________。纯化菌株时，还可釆用平板划线法。划线的某个平板培养后，第一划线区域的划线上都不间断地长满了菌，第二划线区域的第一条线上无菌落，其它划线上有菌落。造成划线无菌落可能的操作失误有____________。
（2）同学乙也按照同学甲的接种方法进行了步骤④的操作：将lmL样品稀释100倍，在3 个平板上分别接入0．lmL稀释液；培养后，3个平板上的菌落数分别为56、58和57。据此可得出每升样品中的活菌数为____________个。
Ⅱ．贵州知名品牌“老干妈”系列产品一直沿用传统工艺精心酿造，其中风味豆豉深受大众喜爱，远销国内外。风味豆豉的主要工艺流程是：黄豆→洗净浸泡→煮熟→加适量盐→发酵→加入配料→装坛密封→成品。请回答下列问题：
（3）制作豆豉前期发酵的目的是让霉菌产生相应的酶，如蛋白质转变为小分子肽和氨基酸，脂肪转变为______________，使豆豉营养更加丰富，有利于健康。发酵过程中需采用人工培养纯净菌种，接种前随机选取若干灭菌后的平板，先培养一段时间目的是_______________________________________。
（4）豆豉制成成品后，需测定其亚硝酸盐含量，原理是在盐酸酸化条件下，亚硝酸盐与_____________发生重氮化反应后，与N-1-萘基乙二胺盐酸盐结合形成_____________色染料。
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下图为分离和纯化分解甲醛细菌的实验过程，其中LB培养基能使菌种成倍扩增。相关叙述正确的是（ ）
A.需要对活性污泥作灭菌处理
B.②中LB培养基应以甲醛为唯一碳源
C.④中出现的菌落是同一种微生物
D.经⑤处理后，应选择瓶中甲醛浓度最低的一组进一步纯化培养
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利用稀释涂布平板法纯化的大肠杆菌，经培养后发现培养基上出现了多种菌落，不可能的原因是 （ ）
A. 培养基制备过程中被杂菌污染
B. 接种过程中，无菌操作不符合要求
C. 系列稀释时，无菌操作不符合要求
D. 由大肠杆菌的种类不同造成的
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