聚乙稀醇（PVA）是存在于化工污水中的一种难以降解的大分子有机物，某同学尝试从化工污水中筛...

聚乙稀醇（PVA）是存在于化工污水中的一种难以降解的大分子有机物，某同学尝试从化工污水中筛选出PVA降解菌，并对该菌种进行培养和计数。请回答下列问题：

（1）实验室一般用牛肉膏蛋白胨固体培养基来培养细菌，制备这种培养基的操作顺序是计算、测量→溶化→____________→倒平板（用下列字母和箭头排序）。

A.高压蒸汽灭菌　　 　　 B.调节pH　　　　 C.分装包扎　　

（2）该同学从化工污水中取样后，将样品置于以PVA作为唯一碳源的____________（填“固体”或“液体”）培养基上进行选择培养，这种选择培养的作用是__________________。

（3）经过初步培养后，该同学对获得的PVA降解鋪液进行梯度稀释，吸取105稀释倍数的降解菌液各0.1mL，分别涂布在三个平板上，一段时间后形成的菌落数依次为20、14、14，该同学以平均菌落数16 进行计数。

①以平均菌落数16进行计数，可求得原菌液中PVA降解菌浓度为______________个/mL。

②你认为该同学的计数方法是否正确？________________________ （填“正确”或“不正确”），说明理由____________________________________。

（4）某些食品工业（如酸奶等）的质量检测，应采用__________________统计细菌的数目。

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水污染是全球性的环境问题，微生物降解是水污染治理的有效手段之一。聚乙烯醇（PVA）是存在于化工污水中的一种难以降解的大分子有机物，PVA分解菌能产生PVA酶分解PVA，PVA与碘作用时能产生蓝绿色复合物，当PVA被分解时蓝绿色复合物消失，形成白色透明斑，请回答下列问题：

（1）要从土壤中筛选出能高效分解PVA的细菌，应采用以_____________作为唯一的碳源的选择培养基，实验中还应设置对照组。将菌液稀释相同的倍数，对照组培养基上生长的菌落数目应明显______（多于/少于）选择培养基上的数目，从而说明选择培养基具有筛选作用。

（2）要测定土壤稀释液中微生物的数目，可在显微镜下用__________计数板直接计数。若将100ml含有PVA分解菌的土壤样品溶液稀释104倍后，取0.1ml稀释液均匀涂布在选择培养基表面，测得菌落数的平均值为160个，空白对照组平板上未出现菌落，则100ml原菌液中有PVA分解菌_______个，该方法的测量值与实际值相比一般会_________（偏大/偏小/相等）。

（3）要鉴定分离出的细菌是否为PVA分解菌，培养PVA分解菌的培养基中除了加入必需的营养物质外还需要加入碘用于鉴别PVA分解菌。要比较不同菌株降解PVA能力的大小，用含相同PVA浓度的上述培养基来培养不同菌株，一定时间后，通过测定___________________来确定不同菌株降解PVA能力的大小。

（4）提取橘皮精油，常采用_________而不用水蒸汽蒸馏法，原因是___________________________。

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水污染是全球性的环境问题，微生物降解是水污染治理的有效手段之一。聚乙烯醇（PVA）是存在于化工污水中的一种难以降解的大分子有机物，PVA分解菌能产生PVA酶分解PVA，PVA与碘作用时能产生蓝绿色复合物，当PVA被分解时蓝绿色复合物消失，形成白色透明斑，请回答下列问题：

（1）上表是筛选出能高效分解PVA的细菌的培养基配方，从物理性质来看，该培养基为__________培养基，表中X物质最可能为_______________。实验中还应设置完全培养液对照组，将菌液稀释相同的倍数，选择培养基上生长的菌落数目应明显__________（填“多于”或“少于”）对照组培养基上的数目，从而说明选择培养基具有筛选作用。

（2）要测定土壤稀释液中微生物的数目，可在显微镜下用___________计数板直接计数。若将100mL含有PVA分解菌的土壤样品溶液稀释105倍后，取0.1mL稀释液均匀涂布在选择培养基表面，测得菌落数的平均值为160个，空白对照组平板上未出现菌落，则100mL原菌液中有PVA分解菌_______个，该方法的测量值与实际值相比一般会_______（填“偏大”、“偏小”或“相等”），原因是____________。

（3）要鉴定分离出的细菌是否为PVA分解菌，培养PVA分解菌的培养基中除了加入必需的营养物质外还需要加入_________________用于鉴别PVA分解菌。

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水污染是全球性的环境问题，微生物降解是水污染治理的有效手段之一。聚乙烯醇（PVA）是存在于化工污水中的一种难以降解的大分子有机物，PVA分解菌能产生PVA酶分解PVA，PVA与碘作用时能产生蓝绿色复合物，当PVA被分解时蓝绿色复合物消失，形成白色透明斑，请回答下列问题：

（1）下表是筛选出能高效分解PVA的细菌的培养基配方，表中X物质最可能为_______________。实验中还应设置完全培养液对照组，将菌液稀释相同的倍数，对照组培养基上生长的菌落数

目应明显__________（填“多于”或“少于”选择培养基上的数目，从而说明选择培养基具有筛选作用。）

（2）要测定土壤稀释液中微生物的数目，可在显微镜下用___________计数板直接计数。若将100mL含有PVA分解菌的土壤样品溶液稀释104倍后，取0.1mL稀释液均匀涂布在选择培养基表面，测得菌落数的平均值为160个，空白对照组平板上未出现菌落，则100mL原菌液中有PVA分解菌_______个，该方法的测量值与实际值相比一般会______________________（填“偏大”、“偏小”或“相等”）。

（3）要鉴定分离出的细菌是否为PVA分解菌，培养PVA分解菌的培养基中除了加入必需的营养物质外还需要加入_________________用于鉴别PVA分解菌。若用上述培养基比较不同菌株降解PVA能力的大小，请用简洁的语言写出设计思路：___________________________________。

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水污染是全球性的环境问题，微生物降解是水污染治理的有效手段之一。聚乙烯醇(PVA)是存在于化工污水中的一种难以降解的大分子有机物，PVA分解菌能产生PVA酶分解PVA，PVA与碘作用时能产生蓝绿色复合物，当PVA被分解时蓝绿色复合物消失，形成白色透明斑，请回答下列问题：

（1）下表是筛选出能高效分解PVA的细菌的培养基配方，表中X物质最可能为______。实验中还应设置完全培养液对照组，将菌液稀释相同的倍数，对照组培养基上生长的菌落数目应明显_______(多于/少于）选择培养基上的数目，从而说明选择培养基具有筛选作用。

（2）要测定土壤稀释液中微生物的数目，可在显微镜下用_______计数板直接计数。若将lOOmL含有PVA分解菌的土壤样品溶液稀释104倍后，取O.lmL稀释液均匀涂布在选择培养基表面，测得菌落数的平均值为140个，空白对照组平板上未出现菌落，则lOOmL原菌液中有PVA分解菌_______个，该方法的测量值与实际值相比一般会___________(偏大/偏小/相等）。

（3）要鉴定分离出的细菌是否为PVA分解菌，培养PVA分解菌的培养基中除了加入必需的营养物质外还需要加入___________用于鉴别PVA分解菌。若要比较不同菌株降解PVA能力的大小，先用含相同PVA浓度的上述培养基来培养不同菌株，一定时间后，通过测定________，来确定不同菌株降解PVA能力的大小。

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水污染是全球性的环境问题，微生物降解是水污染治理的有效手段之一。聚乙烯醇(PVA)是存在于化工污水中的一种难以降解的大分子有机物，PVA分解菌能产生PVA酶分解PVA，PVA与碘作用时能产生蓝绿色复合物，当PVA被分解时蓝绿色复合物消失，形成白色透明斑，请回答下列问题：

（1）下表是筛选出能高效分解PVA的细菌的培养基配方，表中X物质最可能为______。实验中还应设置完全培养液对照组，将菌液稀释相同的倍数，对照组培养基上生长的菌落数目应明显_______(多于/少于）选择培养基上的数目，从而说明选择培养基具有筛选作用。

（2）要测定土壤稀释液中微生物的数目，可在显微镜下用_______计数板直接计数。若将lOOmL含有PVA分解菌的土壤样品溶液稀释104倍后，取O.lmL稀释液均匀涂布在选择培养基表面，测得菌落数的平均值为140个，空白对照组平板上未出现菌落，则lOOmL原菌液中有PVA分解菌_______个，该方法的测量值与实际值相比一般会___________(偏大/偏小/相等）。

（3）要鉴定分离出的细菌是否为PVA分解菌，培养PVA分解菌的培养基中除了加入必需的营养物质外还需要加入___________用于鉴别PVA分解菌。若要比较不同菌株降解PVA能力的大小，先用含相同PVA浓度的上述培养基来培养不同菌株，一定时间后，通过测定________，来确定不同菌株降解PVA能力的大小。

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聚乙烯醇（PVA）是存在与化工、染料的污水中的一种难以降解的大分子有机物，PVA 分解菌能产生PVA酶分解PVA，PVA与碘作用时能产生蓝绿色复合物，当PVA被分解时蓝绿色复合物消失，形成白色透明斑，请回答下列问题：

（1）微生物培养基的营养成分除了碳源和氮源外，还要添加______________，实验室筛选PVA分解菌时应加入_____________作为唯一的碳源，该培养基从物理性质上划分属于_____________培养基。

（2）培养PVA分解菌的培养基中除了加入必须的营养物质外还需要加入_____________用于鉴别PVA分解菌，在该培养基上PVA分解菌形成的菌落呈现____________色。

（3）将微生物接种到培养基并用于计数的常用方法是____________，若将100mlPVA分解菌的菌落稀释106倍后，取1ml稀释液接种到选择培养基上，形成了270个菌落，则原菌液中每毫升有PVA分解菌_______个，该方法的测量值一般比实际值会偏____________，其原因是________________________。

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聚乙烯醇（PVA）是存在于化工污水中的一种难以降解的大分子有机物，PVA分解菌能产生PVA酶分解PVA，PVA与碘作用时能产生蓝绿色复合物，当PVA被分解时蓝绿色复合物消失，形成白色透明斑，请回答下列问题：

（1）下表是筛选能高效分解PVA的细菌的培养基配方，X物质最可能为__________。实验中还应设置完全培养液对照组，将菌液稀释相同的倍数，对照组培养基上生长的菌落数目应明显__________（填“多于”或“少于”）选择培养基上的数目，从而说明选择培养基具由筛选作用。

（2）若将100ml含有PVA分解菌的土壤样品溶液稀释104倍后，取0.1ml稀释液均匀涂布在选择培养基表面，测得菌落数的平均值为160个，空白对照组平板上未出现菌落，则100ml原菌液中有PVA分解菌__个，该方法的测量值与实际值相比一般会__________（填“偏大”“偏小”或“相等”）。

（3）要鉴定分离出的细菌是否为PVA分解菌，培养PVA分解菌的培养基中除了加入必需的营养物质外还需要加入__________，用于鉴别PVA分解菌。若用上述培养基比较不同菌株降解PVA能力的大小，请用简洁的语言写出设计思路：__________________________________________________。

（4）对于挑选出的PVA分解菌，应当接种在__________培养基上培养，长成菌落后，置于_______℃冰箱中做临时保藏。若要长期保藏，则需采用__________法。

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【湖南省长郡中学2017年高考模拟卷二理科综合生物试题】水污染是全球性的环境问题，微生物降解是水污染治理的有效手段之一。聚乙烯醇（PVA）是存在于化工污水中的一种难以降解的大分子有机物，PVA分解菌能产生PVA酶分解PVA，PVA与碘作用时能产生蓝绿色复合物，当PVA被分解时蓝绿色复合物消失，形成白色透明斑，请回答下列问题：

（1）下表是筛选出能高效分解PVA的细菌的培养基配方，表中X物质最可能为_______________。实验中还应设置完全培养液对照组，将菌液稀释相同的倍数，对照组培养基上生长的菌落数

目应明显__________（填“多于”或“少于”选择培养基上的数目，从而说明选择培养基具有筛选作用。）

（2）要测定土壤稀释液中微生物的数目，可在显微镜下用___________计数板直接计数。若将100mL含有PVA分解菌的土壤样品溶液稀释104倍后，取0.1mL稀释液均匀涂布在选择培养基表面，测得菌落数的平均值为160个，空白对照组平板上未出现菌落，则100mL原菌液中有PVA分解菌_______个，该方法的测量值与实际值相比一般会______________________（填“偏大”、“偏小”或“相等”）。

（3）要鉴定分离出的细菌是否为PVA分解菌，培养PVA分解菌的培养基中除了加入必需的营养物质外还需要加入_________________用于鉴别PVA分解菌。若用上述培养基比较不同菌株降解PVA能力的大小，请用简洁的语言写出设计思路：___________________________________。

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某化工厂的污水池中含有一种有害的、难以降解的有机化合物A，研究人员利用以下两种方法获得了能高效降解化合物A的细菌。

Ⅰ 方法一：研究人员利用有机化合物A、磷酸盐、镁盐以及微量元素配制的培养基成功筛选到能高效降解化合物A的细菌。实验的主要步骤如下图所示，请分析回答：

(1)培养基中加入化合物A的目的是__________________。

(2)“目的菌”生长所需的氮源和碳源是来自培养基中的_______________。实验需要振荡培养，由此推测“目的菌”的代谢类型是_________________。

(3)在上述实验操作过程中，获得纯净“目的菌”的关键是________________________。

(4)转为固体培养时，常采用_____________的方法接种，获得单菌落后继续筛选。

(5)若研究“目的菌”的群体生长规律，将单个菌落进行液体培养，可采用显微直接计数法进行计数。若以一个大方格(体积为0.4mm3)有25个中方格的计数板为例进行计算，设五个中方格中总菌数为B，菌液稀释倍数为C，那么原菌液的菌群密度为_________________个/mL。

Ⅱ 方法二：研究人员通过化学方法合成了高效降解化合物A的某种酶的基因，利用PCR扩增后，采用一定方法导入细菌细胞中，经筛选、培养获得高效降解化合物A的细菌。请分析回答：

(1)在利用PCR扩增该酶的基因时，在扩增缓冲液中添加4种脱氧核苷三磷酸作为原料而不是脱氧核苷酸，从而使反应体系不需要再加入ATP提供能量，请推测PCR反应合成DNA子链时能量来源于______________________。

(2)假如PCR反应所用的引物含有放射性、模板不具有放射性,且引物不被切除,则经过n次循环,具有放射性的脱氧核苷酸链占总链数的比值为 _____________。

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