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基因工程自20世纪70年代兴起后，发展迅猛，成果显著。
Ⅰ利用大肠杆菌生产人胰岛素时，构建的表达载体含有人胰岛素基因及其启动子等，其中启动子的作用是______。在用表达载体转化大肠杆菌时，常用________处理大肠杆菌，以利于表达载体进入；为了检测胰岛素基因是否转录出了mRNA，可用标记的胰岛素基因片段作探针与mRNA杂交，该杂交技术称为__________。为了检测胰岛素基因转录的mRNA是否翻译成蛋白质，常用______________________技术。
Ⅱ近10年来，PCR技术（多聚酶链式反应）成为分子生物学实验室的一种常规手段，下图为PCR原理示意图，据图回答问题。
（1）基因工程中，利用PCR技术来________________，PCR技术依据的原理是DNA的半保留复制，生物体内也能完成DNA的复制，但有所不同，图中A过程称为____________，在生物体内需要____________才能完成。图中B 过程的完成需要_________等条件（3分）。
（2）若DNA样品的长度为100个碱基对，且A占15%，则完成三次循环，共需要提供的胞嘧啶脱氧核苷酸___________个。
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基因工程自20世纪70年代兴起后，发展迅猛，成果显著。
Ⅰ利用大肠杆菌生产人胰岛素时，构建的表达载体含有人胰岛素基因及其启动子等，其中启动子的作用是_______________________________。在用表达载体转化大肠杆菌时，常用________处理大肠杆菌，以利于表达载体进入；为了检测胰岛素基因是否转录出了mRNA，可用标记的胰岛素基因片段作探针与mRNA杂交，该杂交技术称为__________。为了检测胰岛素基因转录的mRNA是否翻译成蛋白质，常用______________________技术。
Ⅱ近10年来，PCR技术（多聚酶链式反应）成为分子生物学实验室的一种常规手段，下图为PCR原理示意图，据图回答问题。
（1）基因工程中，利用PCR技术来________________，PCR技术依据的原理是DNA的半保留复制，生物体内也能完成DNA的复制，但有所不同，图中A过程称为____________，在生物体内需要______________才能完成。图中B 过程的完成需要_______________________________________等条件。
（2）若DNA样品的长度为100个碱基对，且A占15%，则完成三次循环，共需要提供的胞嘧啶脱氧核苷酸___________个。
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(10分)回答有关基因工程的问题：
(1)构建基因工程表达载体时，用不同类型的限制酶切割DNA后，可能产生________末端，
也可能产生______末端。
(2)利用大肠杆菌生产人胰岛素时，构建的表达载体含有人胰岛素基因、启动子、________、
和________。其中启动子的作用是________识别和结合的部位，驱动基因转录。
（3）在用表达载体转化大肠杆菌时，常用________处理大肠杆菌，以利于表达载体进入；（4）为了检测胰岛素基因是否导入受体细胞，检测方法是采用技术。为了检测胰岛素基因转录的mRNA是否翻译成胰岛素，常用________技术。
(5)如果要将某目的基因通过农杆菌转化法导入植物细胞，先要将目的基因插入农杆菌Ti质粒的 中，然后用该农杆菌感染植物细胞，通过DNA重组将目的基因插入植物细胞的________ 上。
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请根据人们利用转基因生产多种药物的技术，回答下列回题：
(1)利用大肠杆菌生产人胰岛素时，构建基因表达载体中，含有人的胰岛素基因及启动子、___________、 ___________、复制原点等，其中启动子是___________识别和结合的部位，在转化大肠杆菌时，常用_____处理以使大肠杆菌成为__________细胞，以利于表达载体进入。为了检测胰岛素基因是否转录，可用标记的________作探针与mRNA杂交，该杂交技术称为___________技术。常用____________技术检测胰岛素基因转录的mRNA是否翻译。
(2)利用烟草生产人的干扰素时，可以采用农杆菌转化法、__________法或_________法将目的基因导入受体细胞。当采用农杆菌转化法时，所选用的载体一般是________。转化成功后，还需利用_________技术将之培养成完整植株，该项技术的理论基础是_____________，关键步骤是____________________。
(3)利用转基因羊生产人凝血因子时，常用________技术将目的基因导入羊的____________，而后经过一段时间的体外培养再利用_________技术移入母体。若欲同时获得多头基因相同的转基因羊，可以采用___________技术。
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利用含抗四环素基因的质粒将大肠杆菌改造成工程菌，生产鼠的β－珠蛋白，相关操作不合理的是（ ）
A. 利用反转录技术获得β－珠蛋白基因
B. 用含抗四环素基因的质粒构建基因表达载体
C. 用Ca2+处理有四环素抗性的大肠杆菌使其变成感受态
D. 用含有四环素的培养基筛选导入重组质粒的工程菌
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利用含抗四环素基因的质粒将大肠杆菌改造成工程菌，生产鼠的β－珠蛋白，相关操作不合理的是（ ）
A．利用反转录技术获得β－珠蛋白基因
B．用含抗四环素基因的质粒构建基因表达载体中学
C．用Ca2+处理有四环素抗性的大肠杆菌使其变成感受态
D．用含有四环素的培养基筛选导入重组质粒的工程菌
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下图是利用基因工程技术生产人胰岛素的操作过程示意图，有关的叙述中错误的是（ ）
A．基因工程的核心是基因表达载体的构建
B．可以利用人的皮肤细胞来完成①过程
C．过程②必需的酶是逆转录酶
D．在利用AB获得C的过程中，必须用同一种限制性内切酶切割A和B，使它们产生相同的黏性末端
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下图是利用基因工程技术生产人胰岛素的操作过程示意图，有关的叙述中错误的是（）
A．基因工程的核心是基因表达载体的构建
B．可以利用人的皮肤细胞来完成①过程
C．过程②必需的酶是逆转录酶
D．在利用AB获得C的过程中，可以用同一种限制性核酸内切酶切割A和B，使它们产生形同的黏性末端
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（11分）下图是利用基因工程技术生产人胰岛素的操作过程示意图，请据图作答。
（1）构建基因工程表达载体时，用不同类型的限制酶切割DNA后，可能产生粘性末端，也可能产生_____末端。过程②必需的酶是 酶，过程③必需的酶是 酶。
（2）在利用AB获得C的过程中，必须用 切割A和B，使它们产生相同的粘性末端，再加入 ，才可形成C。利用大肠杆菌生产人胰岛素时，构建的表达载体含有人胰岛素基因及其启动子等，其中启动子的作用是__ ___。
（3）为使过程⑧更易进行，可用 （药剂）处理D。
（4
）为了检测胰岛素基因是否转录出了mRNA，可用标记的胰岛素基因片段作探针与mRNA杂交，该杂交技术称为___ ___。为了检测胰岛素基因请转录的mRNA是否翻译成_____，常用抗原-抗体杂交技术。
（5）如果要将某目的基因通过农杆菌传话法导入植物细胞，先要将目的基因插入农杆菌Ti质粒的_____中，然后通过农杆菌转化作用将目的基因插入植物细胞的______上。
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（11分）下图是利用基因工程技术生产人胰岛素的操作过程示意图，请据图作答。
（1）构建基因工程表达载体时，用不同类型的限制酶切割DNA后，可能产生粘性末端，也可能产生_____末端。过程②必需的酶是________ 酶，过程③必需的酶是________酶。
（2）在利用AB获得C的过程中，必须用切割A和B，使它们产生相同的粘性末端，再加入 ，才可形成C。利用大肠杆菌生产人胰岛素时，构建的表达载体含有人胰岛素基因及其启动子等，其中启动子的作用是_____________。
（3）为使过程⑧更易进行，可用________（药剂）处理D。
（4）为了检测胰岛素基因是否转录出了mRNA，可用标记的胰岛素基因片段作探针与mRNA杂交，该杂交技术称为______________。为了检测胰岛素基因请转录的mRNA是否翻译成_____，常用抗原-抗体杂交技术。
（5）如果要将某目的基因通过农杆菌传话法导入植物细胞，先要将目的基因插入农杆菌Ti质粒的_____中，然后通过农杆菌转化作用将目的基因插入植物细胞的______上。
）为了检测胰岛素基因是否转录出了mRNA，可用标记的胰岛素基因片段作探针与mRNA杂交，该杂交技术称为___