EPO是促红细胞生成素(Erythropoietin)的英文简称,是一种激素样物质,可促进体内新红细胞生成。人类已可通过基因工程合成EPO基因,并采用中国仓鼠卵巢(CHO)细胞表达系统来获取产物。其过程如下:
请回答下列问题:
(1)从人体组织中提取EPO的mRNA,通过逆转录得到____________,再通过PCR技术获得大量EPO基因。
(2)供体母鼠通常情况下每次排卵8~12枚,为使其超数排卵,需注射_____________激素 以排出更多的卵子,培养到_____________时期与获能的精子相遇时,精子首先发生___________反应,穿越放射冠和透明带,完成体外受精。
(3)①过程构成了基因表达载体,内部包括不可缺少的组成部分,其中___________能驱动基因的转录。 (4)采用________技术,将重组表达载体导入小鼠受精卵中,将受精卵移入发育培养液中继续培养。培养液成分除一些无机盐和有机盐类外,还需添加维生素、激素、氨基酸、核苷酸等营养成分,以及_______等物质。
(5)当胚胎发育至__________时期,向受体移植,为获得更多个转基因胚胎,要将__________均等切割,否则会影响分割后胚胎的恢复和进一步发育。此外,移植前需对已成功转入目的基因的胚胎进行_________。
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EPO是促红细胞生成素(Erythropoietin)的英文简称,是一种激素样物质,可促进体内新红细胞生成。人类已可通过基因工程合成EPO基因,并采用中国仓鼠卵巢(CHO)细胞表达系统来获取产物。其过程如下:
请回答下列问题:
(1)从人体组织中提取EPO的mRNA,通过逆转录得到 ,再通过PCR技术获得大量EPO基因。
(2)供体母鼠通常情况下每次排卵8~12枚,为使其超数排卵,需注射 激素以排出更多的卵子,培养到 时期与获能的精子相遇时,精子首先发生 反应,穿越放射冠和透明带,完成体外受精。
(3)①过程构成了基因表达载体,内部包括不可缺少的组成部分,其中 能驱动基因的转录。
(4)采用 技术,将重组表达载体导入小鼠受精卵中,将受精卵移入发育培养液中继续培养。培养液成分除一些无机盐和有机盐类外,还需添加 、激素、氨基酸、核苷酸等营养成分,以及血清(血浆)等物质。
(5)当胚胎发育至 时期,向受体移植,为获得更多个转基因胚胎,要将 均等切割,否则会影响分割后胚胎的恢复和进一步发育。此外,移植前需对已成功转入目的基因的胚胎进行 。
(6)若想检验转基因仓鼠是否成功表达EPO,可以采用 技术对血液来进行检测。
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EPO是促红细胞生成素(Erythropoietin)的英文简称,是一种激素样物质,可促进体内新红细胞生成。人类已可通过基因工程合成EPO基因,并采用中国仓鼠卵巢(CHO)细胞表达系统来获取产物。其过程如下:
请回答下列问题:
(1)从人体组织中提取EPO的mRNA,通过逆转录得到____________,再通过PCR技术获得大量EPO基因。
(2)供体母鼠通常情况下每次排卵8~12枚,为使其超数排卵,需注射_____________激素 以排出更多的卵子,培养到_____________时期与获能的精子相遇时,精子首先发生___________反应,穿越放射冠和透明带,完成体外受精。
(3)①过程构成了基因表达载体,内部包括不可缺少的组成部分,其中___________能驱动基因的转录。 (4)采用________技术,将重组表达载体导入小鼠受精卵中,将受精卵移入发育培养液中继续培养。培养液成分除一些无机盐和有机盐类外,还需添加维生素、激素、氨基酸、核苷酸等营养成分,以及_______等物质。
(5)当胚胎发育至__________时期,向受体移植,为获得更多个转基因胚胎,要将__________均等切割,否则会影响分割后胚胎的恢复和进一步发育。此外,移植前需对已成功转入目的基因的胚胎进行_________。
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EPO是促红细胞生成素(Erythropoietin)的英文简称,是一种激素样物质,可促进体内新红细胞生成。人类已可通过基因工程合成EPO基因,并采用中国仓鼠卵巢(CHO)细胞表达系统来获取产物。其过程如下:
请回答下列问题:
(1)从人体组织中提取EPO的mRNA,通过逆转录得到 ,再通过PCR技术获得大量EPO基因。
(2)供体母鼠通常情况下每次排卵8~12枚,为使其超数排卵,需注射 激素以排出更多的卵子,培养到 时期与获能的精子相遇时,精子首先发生 反应,穿越放射冠和透明带,完成体外受精。
(3)①过程构成了基因表达载体,内部包括不可缺少的组成部分,其中 能驱动基因的转录。
(4)采用 技术,将重组表达载体导入小鼠受精卵中,将受精卵移入发育培养液中继续培养。培养液成分除一些无机盐和有机盐类外,还需添加 、激素、氨基酸、核苷酸等营养成分,以及血清(血浆)等物质。
(5)当胚胎发育至 时期,向受体移植,为获得更多个转基因胚胎,要将 进行均等切割,否则会影响分割后胚胎的恢复和进一步发育。此外,移植前需对已成功转入目的基因的胚胎进行 。
(6)若想检验转基因仓鼠是否成功表达EPO,可以采用 技术对血液来进行检测。
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红细胞生成素(EPO)是体内促进红细胞生成的种糖蛋白,可用于治疗肾衰性贫血等疾病。由于天然EPO来源极为有限,目前临床使用的红细胞生成素主要来自于基因工程技术生产的重组人红细胞生成素( rhEPO),其简要生产流程如下图。请回答:
(1)图中①技术利用的是__________原理,利用该技术扩增目的基因的前提,是要有一段已知目的基因的核苷酸序列,以便__________。图中②所指的物质是__________。
(2)培养重组CHO细胞时,要在培养液中添加一定量的__________,以防培养过程的污染;还需定期更换培养液,目的是__________。
(3)检测 rhEPO的体外活性需用抗 rhEPO的单克隆抗体。分泌该单克隆抗体的杂交瘤细胞,可由 rhEPO免疫过的小鼠B淋巴细胞与小鼠骨髓瘤细胞融合而成。细胞融合实验完成后,融合体系除杂交瘤细胞外,可能还含有未融合的细胞和其他种类的融合细胞,体系中出现多种细胞类型的原因__________。是未融合的B淋巴细胞经多次传代培养后都不能存活,原因是__________。
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红细胞生成素(EPO)是体内促进红细胞生成的一种糖蛋白,可用于治疗肾衰性贫血等疾病。由于天然EPO来源极为有限,目前临床使用的红细胞生成素主要来自于基因工程技术生产的重组人红细
胞生成素(rhEPO)期间要生产流程如右图
(1)EPO在人体细胞内合成的场所是____________。
(2)图中①所指的是____________技术,用该技术扩增与生物体内扩增所需酶的差异是______________________。
(3)图中的②与人体红细胞中提取的②是否相同? (填是或否)原因是____________。
(4)将含人EPO基因的表达载体导入受体细胞的方法是___________。用DNA分子杂交技术检测表达载体导入是否成功,基于的原理是_ ___。
(5)用凝胶色谱法初步分离纯化rhEPO,主要基于各种蛋白质_____________的差异。
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红细胞生成素(EPO)是体内促进红细胞生成的一种糖蛋白,可用于治疗肾衰性贫血等疾病。由于天然EPO来源极为有限,目前临床上使用的红细胞生成素主要来自于基因工程技术生产的重组人红细胞生成素(rhEPO),其简要生产流程如右图。
请回答:
(1)图中①所指的是________技术。
(2)图中②所指的物质是________,③所指的物质是________。
(3)培养重组CHO细胞时,为便于清除代谢产物,防止细胞产物积累对细胞自身造成危害,应定期更换________。
(4)检测rhEPO的体外活性需用抗rhEPO的单克隆抗体。分泌该单克隆抗体的________细胞,可由rhEPO免疫过的小鼠B淋巴细胞与小鼠骨髓瘤细胞融合而成。
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红细胞生成素(EPO)是体内促进红细胞生成的一种糖蛋白,可用于治逆子疗肾衰性贪血等疾病。由于天然EPO来源极为有限,目前临订、床上使用的红细胞生成素主要来自于基因工程技术生产的重组人红细胸生成素(rhEPO),其简要生产流程如右图。
请回答:
(1)图中①所指的是________技术。
(2)图中②所指的物质是________,③所指的物质是________。
(3)培养重组CHO细胞时,为便于清除代谢产物,防止细胞产物积累对细胞自身造成危害,应定其更换________。
(4)检测rhEPO的体个活性需要抗rhEPO的单克隆抗体。分泌该单克隆抗体的________细胞,可由rhEPO免疫过的小鼠B淋巴细胞与小鼠骨髓癌细胞融合而成。
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当细胞缺氧时,缺氧诱导因子(HIF-la)与芳香烃受体核转位蛋白(ARNT)结合,调节基因的表达生成促红细胞生成素(EPO),EPO是一种糖蛋白质激素,可作用于骨髓造血组织,促进红细胞生成,改善缺氧。当氧气充足时,HIF-la羟基化后被蛋白酶降解,调节过程如图所示。下列说法正确的是( )
A.缺氧时,HIF-la结合到DNA上,催化EPO基因转录
B.氧气充足时,HIF-la被解体以减少EPO的合成,这属于负反馈调节
C.与EPO合成和分泌有关的具膜细胞器有内质网、高尔基体、线粒体
D.EPO作用的靶细胞是红细胞,红细胞数量增加可以改善缺氧情况
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促红细胞生成素(EPO)是一种糖蛋白类激素,主要由肾脏合成,被国际奥委会确定为兴奋剂。EPO可以促进造血干细胞分化为红细胞,但会抑制自身EPO的产生。请回答下列相关问题:
(1)EPO合成过程中肽链和糖基的结合发生于细胞的_____________内。红细胞形成过程中细胞的形态会由圆球形变成中央微凹的圆饼状,这样可以通过增加细胞的_____________来提高细胞与外界的物质运输效率。
(2)剧烈运动时,肌肉细胞进行无氧呼吸产生的乳酸并没有引起血浆PH大幅下降,这是_____________物质的作用结果。诱导肾脏加快产生EPO的刺激可能是低浓度O2或高浓度乳酸,请简要设计一个实验思路探究高浓度乳酸可诱导肾脏加快产生EPQ:__________________________。
(3)运动员违禁使用EPO时,EPO进人体内后的靶细胞为_____________,长期使用超生理所需剂量EPO的运动员在停用后更容易出现贫血症状,分析可能的原因是__________________________。
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促红细胞生成素(EPO)是一种糖蛋白类激素,主要由肾脏合成,被国际奥委会确定为兴奋剂。EPO可以促进造血干细胞分化为红细胞,但会抑制自身EPO的产生。请回答下列相关问题:
(1)EPO合成过程中肽链和糖基的结合发生于细胞的_____________内。红细胞形成过程中细胞的形态会由圆球形变成中央微凹的圆饼状,这样可以通过增加细胞的_____________来提高细胞与外界的物质运输效率。
(2)剧烈运动时,肌肉细胞进行无氧呼吸产生的乳酸并没有引起血浆PH大幅下降,这是_____________物质的作用结果。诱导肾脏加快产生EPO的刺激可能是低浓度O2或高浓度乳酸,请简要设计一个实验思路探究高浓度乳酸可诱导肾脏加快产生EPQ:__________________________。
(3)运动员违禁使用EPO时,EPO进人体内后的靶细胞为_____________,长期使用超生理所需剂量EPO的运动员在停用后更容易出现贫血症状,分析可能的原因是__________________________。
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