[生物——选修3:现代生物科技专题]
近几十年来,植物基因工程取得相当大的进展,科学家将药用蛋白转向植物生产,研究出了用转基因马铃薯生产人的血清白蛋白的方法。下图表示EcoR Ⅰ、BamH Ⅰ两种限制酶在质粒上的切割位点,两种酶识别和切割位点见下表。回答下列相关问题。
(1)该工程中适宜用来切割质粒的限制酶是______________,原因是________________________。
(2)获取血清白蛋白基因可以利用反转录法构建的______________文库中获取,若利用PCR技术扩增血清蛋白基因,设计引物序列的主要依据是______________,还需要在引物的一端加上_________序列,以便于后续的剪切和连接。
(3)将目的基因和质粒进行连接后,需先用____________处理农杆菌以便将基因表达载体导入马铃薯细胞,筛选含有目的基因的细胞需在培养基中添加________________________。
(4)从含有血清白蛋白基因的马铃薯细胞中提取血清白蛋白,需通过____________过程培养到愈伤组织,从其中提取。
高三生物综合题困难题
[生物——选修3:现代生物科技专题]
近几十年来,植物基因工程取得相当大的进展,科学家将药用蛋白转向植物生产,研究出了用转基因马铃薯生产人的血清白蛋白的方法。下图表示EcoR Ⅰ、BamH Ⅰ两种限制酶在质粒上的切割位点,两种酶识别和切割位点见下表。回答下列相关问题。
(1)该工程中适宜用来切割质粒的限制酶是______________,原因是________________________。
(2)获取血清白蛋白基因可以利用反转录法构建的______________文库中获取,若利用PCR技术扩增血清蛋白基因,设计引物序列的主要依据是______________,还需要在引物的一端加上_________序列,以便于后续的剪切和连接。
(3)将目的基因和质粒进行连接后,需先用____________处理农杆菌以便将基因表达载体导入马铃薯细胞,筛选含有目的基因的细胞需在培养基中添加________________________。
(4)从含有血清白蛋白基因的马铃薯细胞中提取血清白蛋白,需通过____________过程培养到愈伤组织,从其中提取。
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近几十年来,植物基因工程取得相当大的进展,科学家将药用蛋白转向植物生产,研究出了用转基因马铃薯生产人的血清白蛋白的方法。如图表示EcoRⅠ、BamHⅠ两种限制酶在质粒上的切割位点,两种酶识别和切割位点见表。回答下列相关问题。
限制酶 | 识别序列和切割位点 |
EcoRⅠ | |
BamHⅠ |
(1)该工程中适宜用来切割质粒的限制酶是_____,原因是_____。
(2)获取血清白蛋白基因可以利用反转录法构建的_____文库中获取,若利用PCR技术扩增血清蛋白基因,设计引物序列的主要依据是_____,还需要在引物的一端加上_____序列,以便于后续的剪切和连接。
(3)将目的基因和质粒进行连接后,需先用_____处理农杆菌以便将基因表达载体导入马铃薯细胞,筛选含有目的基因的细胞需在培养基中添加_____。
(4)从含有血清白蛋白基因的马铃薯细胞中提取血清白蛋白,需通过_____过程培养到愈伤组织,从其中提取。
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(8分)【生物一现代生物科技专题】
国家863计划项目“利用崂山奶山羊乳腺生物反应器制备药用蛋白”取得重大进展。目前,已经成功获得经纯化的抗凝血酶III蛋白,达到国际先进水平。下面是制作崂山奶山羊乳腺生物反应器的流程图:
(1)根据流程图分析,动物乳腺生物反应器主要利用了_____技术、胚胎工程技术和细胞培养技术。
(2)要实现①超数排卵,应在崂山奶山羊A发情周期的某一阶段用______处理,然后在恰当时期进行________收集卵子。通过②采集的精子不能直接使成熟的卵子受精,原因是____________________________________________________________
(3)过程④需将抗凝血酶III基因注入受精卵的雄原核内,在显微镜下判断是否完成受精作用的标志是________________________。
(4)要使人的抗凝血酶III基因在山羊乳腺细胞中特异性表达,完整的基因表达载体要包括目的基因、__________、标记基因等部分。在⑤之前要检测早期胚胎细胞是否已经导人抗凝血酶III基因,宜采用_________________技术
(5)若要一次获得多只完全相同的转基因崂山奶山羊D,⑤应采用_____________技术。
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【选修3:现代生物科技专题】
人乳铁蛋白是一种重要的药用保健蛋白。下图表示利用乳腺生物反应器生产人乳铁蛋白的过程,图中Tetr表示四环素抗性基因,Ampr表示氨苄青霉素抗性基因,五种限制酶的识别序列及切割位点如表所示,请回答以下问题:
限制酶 | BamHⅠ | Hae Ⅲ | BclⅠ | Sau3AⅠ | NotⅠ |
识别序列 及切割位点 |
(1)①过程常采用的方法是_____________________________。
(2)构建基因表达载体时,需要将人乳铁蛋白基因嵌入到启动子和__________________ 之间,这样人乳铁蛋白基因就能在乳腺细胞中表达。
(3)要将人乳铁蛋白基因插入质粒,若只允许使用一种限制酶,应选择的限制酶是___________。
(4)据图分析,筛选含有重组质粒的受体细胞首先需要在含________________ (填“四环素”或“氨苄青霉素”或“四环素或氨苄青霉素”)的培养基上进行,原因是_____________。
(5)若BamH I酶切的DNA末端与Bcl I酶切的DNA末端连接起来,连接部位的6个碱基对序列为__________________________,对于该部位,这两种酶_____________________(“都不能”或“只有一种能”)切开。
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[生物——选修3:现代生物科技专题]人组织纤溶酶原激活物(htPA)是一种重要的药用蛋白,可在转htPA基因奶牛的乳汁中获得。下图表示利用奶牛乳汁生产人组织纤溶酶原激活物的培育过程:
(1)htPA基因cDNA可通过克隆筛选获得,该cDNA比人染色体上的htPA基因短,原因是该cDNA没有 。构建表达载体时,必须将htPA基因cDNA与牛乳腺蛋白基因的 等调控组件重组在一起。
(2)通过①形成图中③的过程中,通常取培养 代以内的细胞,原因是 。
(3)图中“未受精的卵”是指 的卵母细胞,而不能用普通的体细胞作为受体细胞,原因是“未受精的卵” 。
(4)⑦与⑥的遗传性状不一样的原因是 。
(5)图示过程中涉及的科学技术有转基因技术、 、 、胚胎移植等。
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【生物-选修3:现代生物科技专题】
人组织纤溶酶原激活物(htPA)是一种重要的药用蛋白,可在转htPA基因奶牛的乳汁中获得。下图表示利用奶牛乳汁生产人组织纤溶酶原激活物的培育过程:
(1)htPA基因cDNA可通过克隆筛选获得,该cDNA比人染色体上的htPA基因短,原因是该cDNA没有____________________。构建表达载体时,必须将htPA基因cDNA与牛乳腺蛋白基因的_____________等调控组件重组在一起。
(2)通过①形成图中③的过程中,通常取培养_____代以内的细胞,原因是_________________。
(3)图中“未受精的卵”是指________的卵母细胞,而不能用普通的体细胞作为受体细胞,原因是“未受精的卵”_______________________________________。
(4)⑦与⑥的遗传性状不一样的原因是____________________________________ 。
(5)图示过程中涉及的科学技术有转基因技术及____________等动物细胞工程技术(至少写一个)。
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[生物——选修3:现代生物科技专题]甲、乙是染色体数目相同的两种二倍体药用植物,甲含有效成分A,乙含有效成分B。某研究小组拟培育同时含有A和B的新型药用植物。
回答下列问题:
(1)为了培养该新型药用植物,可取甲和乙的叶片,先用__________酶去除细胞壁,获得具有活力的________,再用化学诱导剂_________诱导二者融合。形成的融合细胞进一步培养形成_______组织,然后经过_______形成完整的杂种植株。这种培养技术称为________。
(2)假设甲和乙有性杂交的后代是不育的,而上述杂种植株是可育的,造成这种差异的原因是__________。
(3)这种杂种植株可通过制作人工种子的方法来大量繁殖。经植物组织培养得到的__________等材料用人工薄膜包装后可得到人工种子。
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【生物一选修3:现代生物科技专题】
2016年9月15日天宫二号在酒泉卫星发射中心发射成功,高等植物拟南芥就幸运地当选为“植物航天员”。多年来围绕拟南芥的相关研究很多,尤其是对于拟南芥转基因研究非常热门,当前拟南芥转基因所使用的方法主要是农杆菌介导的转化,在拟南芥搭载升空前植物学家预先用转基因技术给拟南芥的体细胞用绿色荧光蛋白(GFP)基因标记。
(1)该绿色荧光蛋白(GFP)基因取自某种植物的cDNA文库。若想短时间内得到大量的绿色荧光蛋白(GFP)基因,需用到_______________技术,其条件除了原料、能量、模板外还需要加入___________、______________。
(2)农杆菌转化法中Ti质粒的T-DNA(可转移的DNA)可整合到植物细胞的___________上,所以构建基因表达载体时,将目的基因插入到T-DNA序列中,该过程用到的工具酶有______________________。
(3)通常采用___________技术检测绿色荧光蛋白(GFP)基因是否插入到拟南芥基因组中,若将含有绿色荧光蛋白(GFP)基因的拟南芥细胞培育出完整植株,需要运用的主要生物技术是_______________,该技术的理论基础是______________________________。
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【生物——选修3:现代生物科技专题】人组织纤溶酶原激活物(htPA)是一种重要的药用蛋白,可在转htPA基因母羊的羊乳中获得。流程如下:
(1)检测目的基因是否已插入受体细胞DNA,可采用 技术。
(2)为获取更多的卵(母)细胞,要对供体母羊注射促性腺激素,使其 。图中早期胚胎可用人工方法从羊输卵管内获得,该过程称为 ;也可从羊体内取出卵子,通过 后进行早期胚胎培养获得。第5天可以看到胚胎发生收缩,细胞间隙扩大,接着胚胎内部出现裂隙,这是胚胎 期开始的标志。
(3)利用 和胚胎移植技术可获得多个转基因个体。图中早期胚胎通过胚胎移植技术移入代孕母羊子宫内继续发育,暂不移入的胚胎可使用 方法保存。
(4)胚胎干细胞(ES)可由 中分离培养获得的一类细胞。
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【生物——选修3:现代生物科技专题】人组织纤溶酶原激活物(htPA)是一种重要的药用蛋白,可通过转基因技术在羊乳中获得。流程如下:
(1)上述基因工程中,目的基因是_______________;在重组表达载体中有一段特殊的DNA片段,是RNA聚合酶识别和结合的部位,这段DNA被称为_____________。
(2)在操作中要对供体母羊注射______________进行超数排卵处理;应采用____________法使精子体外获能;对供体母羊和______________进行同期发情处理。该转基因母羊进入泌乳期后,可以通过分泌的乳汁来生产htPA,因而被称为________________。
(3)为了获得含有htPA的羊乳,在移植前取早期胚胎滋养层细胞进行_____________。
(4)人的基因能在羊体内表达说明________________。
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