将醋酸菌突变体中与耐酸有关的ALDH基因导入优良醋酸菌中，选育出高发酵速率、 耐酸的醋酸菌，用于果醋生产。请分析回答下列问题：
（1）对含有ALDH基因的DNA与质粒用同种限制酶切割后，通过 酶连接形成重组质粒。
为获得耐酸的醋酸菌，用 法接种于含高浓度醋酸的培养基进行筛选。将筛选纯化的菌种用
的方法长期保存。
（2）下图表示温度、乙醇浓度对该醋酸菌产酸量的影响。
①醋酸菌能将乙醇转变为 ，再将其转变为醋酸。
②研究不同酒精浓度下的最高产酸量时，最好把温度控制为 ℃，如温度过高，醋酸菌代谢缓慢甚至死亡，原因是 。
③酒精发酵后通过出料口检测酒精浓度，将发酵液中酒精浓度调节到 左右才接种醋酸菌，较高的酒精浓度会使产酸量下降，不适宜接种，原因是 。
（3）为检测发酵过程中醋酸菌数量，将1mL发酵液稀释100倍后，分别取0．1mL稀释菌液均匀 涂布在4个平板上；经适当培养后，4个平板上的菌落数分别为24、139、140、141，据此可得出每毫升发酵液中的活菌数为 个/mL。
高三生物综合题中等难度题
将醋酸菌突变体中与耐酸有关的ALDH基因导入优良醋酸菌中，选育出高发酵速率、 耐酸的醋酸菌，用于果醋生产。请分析回答下列问题：
（1）对含有ALDH基因的DNA与质粒用同种限制酶切割后，通过 酶连接形成重组质粒。
为获得耐酸的醋酸菌，用 法接种于含高浓度醋酸的培养基进行筛选。将筛选纯化的菌种用
的方法长期保存。
（2）下图表示温度、乙醇浓度对该醋酸菌产酸量的影响。
①醋酸菌能将乙醇转变为 ，再将其转变为醋酸。
②研究不同酒精浓度下的最高产酸量时，最好把温度控制为 ℃，如温度过高，醋酸菌代谢缓慢甚至死亡，原因是 。
③酒精发酵后通过出料口检测酒精浓度，将发酵液中酒精浓度调节到 左右才接种醋酸菌，较高的酒精浓度会使产酸量下降，不适宜接种，原因是 。
（3）为检测发酵过程中醋酸菌数量，将1mL发酵液稀释100倍后，分别取0．1mL稀释菌液均匀 涂布在4个平板上；经适当培养后，4个平板上的菌落数分别为24、139、140、141，据此可得出每毫升发酵液中的活菌数为 个/mL。
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将醋酸菌突变体中与耐酸有关的ALDH基因导入优良醋酸菌中，选育出高发酵速率、耐酸的醋酸菌，用于果醋生产。请分析回答下列问题：
（1）对含有ALDH基因的DNA与质粒用同种限制酶切割后，通过 酶连接形成重组质粒。 为获得耐酸的醋酸菌，用 法接种于含高浓度醋酸的培养基进行筛选。将筛选 纯化的菌种用 的方法长期保存。
（2）下图表示温度尧乙醇浓度对该醋酸菌产酸量的影响。
② 醋酸菌能将乙醇转变为 ，再将其转变为醋酸。
②研究不同酒精浓度下的最高产酸量时，最好把温度控制为 ℃，如温度过高， 醋酸菌代谢缓慢甚至死亡，原因是 。
③酒精发酵后通过出料口检测酒精浓度，将发酵液中酒精浓度调节到 左右 才接种醋酸菌，较高的酒精浓度会使产酸量下降，不适宜接种，原因是 。
（3）为检测发酵过程中醋酸菌数量，将1mL发酵液稀释100倍后，分别取0.1mL稀释菌液均匀 涂布在4个平板上曰经适当培养后，4个平板上的菌落数分别为124、139、140、141，据此可得 出每毫升发酵液中的活菌数为 个/mL。
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下列有关育种的叙述，错误的是
A．无子西瓜的培育，利用了染色体变异原理
B．高产青霉菌的培育，利用了基因突变原理
C．诱变育种提高了突变率，多数表现出优良性状，利用了基因突变原理
D．将抗虫基因导入棉花体细胞中培育出了抗虫棉，利用了基因重组原理
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酵母菌是单细胞的微生物，是生产燃料酒精的菌种。为了提高酒精产量，需要具有耐高浓度蔗糖和耐酸特性的酵母菌作为理想的酒精发酵菌种。
根据所学知识回答下面的问题。
（1）酵母菌和醋酸菌相比在细胞结构上最大的差异是___。
（2）培养酵母菌的培养液所含的营养物质包括___。
（3）为了获得理想的酵母菌菌种，可以对野生菌种进行诱变处理。然后在___（ 多选）（A.固体 B.液体 C.选择 D.鉴别）培养基上进行培养，该培养基要比基本培养基额外添加___， 并调低pH值，在该培养基中挑选能在培养基上生长的菌落，即为所需菌种。
（4） 某研究小组对培养液中酵母菌的种群数量进行活菌计数，主要进行___和___操作， 若实验操作都正确规范，但通过菌落计数计算后发现，稀释倍数低的组计算结果往往比稀释倍数高的组计算结果略低， 可能的原因是___。
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(12分)
转基因育种是利用遗传转化方法将有价值的外源基因导入受体物种获得转化体，再将转化体植株经过常规育种程序加以选择和培育，最后选育出具有优良性状的新品种，对于作物育种具有重大的意义。图甲表示我国自主研发的转基因抗虫玉米的主要培育流程，图乙表示天然土壤农杆菌Ti质粒结构(部分基因及限制性内切酶作用位点如图所示)。请回答：
（1）若限制酶I的识别序列和切割位点是
，限制酶II的识别序列和切割位点是
，那么在①过程中，应用限制酶_________切割质粒，用限制酶_______切割抗虫基因。
（2）为了保证改造后的质粒进入玉米细胞后不会引起细胞的无限分裂和生长，必须用限制酶去除质粒上_________和___________(基因)。
（3）将构建的重组Ti质粒，导入土壤农杆菌，在选择培养基上进行培养，观察农杆菌在含__________的培养基中能够生长、在含___________的培养基中不能生长。
（4）④过程应用的生物技术主要是__________，从个体水平检测玉米具有抗虫性状的方法是_________。
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再次感染相同的抗原时，记忆细胞会立即分泌大量淋巴因子下列有关生物工程的叙述中，正确的是
A. 病毒疫苗、干扰素等蛋白质生物制品，可以通过动物细胞培养和发酵工程大规模生产
B. 基因工程中，要将目的基因导入细菌细胞，可用氯化钙处理，增大细胞膜的通透性
C. 将愈伤组织包裹上人造种皮，制成人工种子，可解决某些作物繁殖能力差的问题
D. 同种植物甲、乙两植株体细胞杂交获得的后代，与二者有性杂交后代的细胞中染色体数相同
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下列关于诱变育种的说法中错误的是
A．能够在较短的时间内获得更多的优良变异类型
B．一次诱变处理供实验的生物一定能获得所需的变异类型
C．青霉素产量很高的菌株的选育依据的原理是基因突变
D．诱变育种过程能创造新的基因而杂交育种过程则不能
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下列关于诱变育种的说法中不正确的是 （ ）
A．能够在较短的时间内获得更多的优良变异类型
B．一次诱变处理供实验的生物定能获得所需的变异类型
C．青霉素产量很高的菌株的选育依据的原理是基因突变
D．诱变育种过程能创造新的基因而杂交育种过程则不能
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下面是将乙肝病毒控制合成的病毒表面主蛋白的基因HBsAg导入巴斯德毕赤酵母菌生产乙肝疫苗的过程及有关资料，请分析回答下列问题。
资料1：巴斯德毕赤酵母菌可用培养基中甲醇作为其生活的唯一碳源，同时AOX1基因（醇氧化酶基因）受到诱导而表达，5'AOX1和3'AOXl（TT）是基因AOX1的启动子和终止子，此启动子也能使外源基因高效表达。
资料2：巴斯德毕赤酵母菌体内无天然质粒，下图为科学家改造的pPIC9K质粒，其与目的基因形成的重组质粒在特定部位酶切后形成的重组DNA片段可以整合到酵母菌染色体上，最终实现目的基因的表达。
（1）如果要将HBsAg基因和pPIC9K质粒重组，应该在HBsAg基因两侧的A和B位置接上_________限制酶识别序列（SnaB I、Avr II、SacI、Bgl II四种限制酶的识别序列均不相同），这样设计的优点是避免质粒和目的基因自身环化。
（2）酶切获取HBsA9基因后，需用______________将其连接到pPIC9K质粒上，形成重组质粒，根据步骤②可知步骤①将重组质粒先导入大肠杆菌的目的是______________。
（3）步骤3中应选用限制酶______________来切割从大肠杆菌分离的重组质粒从而获得图中所示的重组DNA片段，然后将其导入巴斯德毕赤酵母菌细胞。
（4）为了确认巴斯德毕赤酵母菌转化是否成功，在培养基中应该加入______________以便筛选。
（5）转化的酵母菌在培养基上培养一段时间后，需要向其中加入______________以维持其生活，同时诱导HBsA9基因表达。
（6）与大肠杆菌等细菌相比，用巴斯德毕赤酵母菌细胞作为基因工程的受体细胞，其优点是在蛋白质合成后，细胞可以对其进行_______并分泌到细胞外，便于提取。
（7）培育转化酵母细胞所利用的遗传学原理是______________。
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下面是将乙肝病毒控制合成病毒表面主蛋白的基因HBsAg导入巴斯德毕赤酵母菌生产乙肝疫苗的过程及有关资料，请分析回答下列问题。
资料1 巴斯德毕赤酵母菌是一种甲基营养型酵母菌，能将甲醇作为其唯一碳源，此时AOX1基因受到诱导而表达[5'AOX1和3'AOX1(TT)分别是基因AOX1的启动子和终止子]。
资料2 巴斯德毕赤酵母菌体内无天然质粒，所以科学家改造出了图1所示的pPIC9K质粒用作载体，其与目的基因形成的重组质粒经酶切后可以与酵母菌染色体发生同源重组，将目的基因整合于染色体中以实现表达。
(1)如果要将HBsAg基因和pPIC9K质粒重组，应该在HBsAg基因两侧的A和B位置接上______、______限制酶识别序列， 这样设计的优点是避免质粒和目的基因自身环化。
(2)酶切获取HBsAg基因后，需用________将其连接到pPIC9K质粒上，形成重组质粒，并将其导入大肠杆菌以获取_______ _。
(3)步骤3中应选用限制酶________来切割重组质粒获得重组DNA，然后将其导入巴斯德毕赤酵母菌细胞。
(4)为了确认巴斯德毕赤酵母菌转化是否成功，在培养基中应该加入卡拉霉素以便筛选，转化后的细胞中是否含有HBsAg基因，可以用_____ ___方法进行检测。
(5)转化的酵母菌在培养基上培养一段时间后，需要向其中加入____ ____以维持其生活，同时诱导HBsAg基因表达。
(6)与大肠杆菌等细菌相比，用巴斯德毕赤酵母菌细胞作为基因工程的受体细胞，其优点是在蛋白质合成后，细胞可以对其进行___ _____并分泌到细胞外，便于提取。
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