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植物基因工程中,往往用光诱导型启动子(PrbcS)使目的基因表达,其结合T基因后能使目的基因更高水平表达。下图中①和②都为基因表达载体构建过程中的中间载体,请分析重组载体的部分构建过程并回答下列问题:

注:Ampr/Kmr分别为氨苄青霉素/卡那霉素抗性基因。origin为复制原点,其余为限制酶酶切位点。

(1)对双子叶植物进行基因工程改造最常用的方法是____________,还需结合__________技术才能获得新性状的植株。

(2)中间载体通常用______________法导入微生物中扩增,含有中间载体②­PrbcS­*T的微生物________(“能”或“不能”)在含有卡那霉素的培养基中生长,________(“能”或“不能”)在含有氨苄青霉素的培养基中生长。

(3)经酶切后凝胶电泳,测得2B片段为0.4kb,经图示信息分析,Prbcs­*T的长度约为____________________。据图分析,中间载体②­2B形成中间载体②­PrbcS­*T,需要使用限制酶_________________切割。

(4)在T基因前“点突变引入NcoⅠ”酶切位点的方法是:设计包含_________识别序列的引物,然后用PCR技术扩增。

高二生物非选择题困难题

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