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中国T2DM(胰岛β细胞功能衰退型糖尿病)的发病率由1979年的1.00%上升2019年的4.37%,补充胰岛素是控制和缓解病情的重要途径。胰岛素(由 α、β两条多肽链组成)的生产由提取动物胰岛素发展到了利用基因工程生产重组人胰岛素。

(1)构建重组质粒时(如图所示),为避免目的基因 任意连接和运载体的自身环化应选用_____酶切处理目的基因和运载体。构建完 成的表达载体除了目的基因、标记基因以外,还必须有_____等组件。

(2)利用大肠杆菌生产重组人胰岛素时,构建表达载体的目的基因应从_____文库中获取,重组大肠杆菌合成的人胰岛素原没有活性,需用_____酶将其加工成含α、β两条多肽链的胰岛素。

(3)利用奶牛设计乳腺生物反应器生产人胰岛素,为使人胰岛素基因在奶牛乳腺中特异表达,构建表 达载体时应将目的基因与_____的启动子等调控组件重组在一起,并选用_____为受体细胞。

(4)重组人胰岛素分子容易聚合而影响作用效果,可将胰岛素分子的氨基酸序列及结构进行局部调整 形成胰岛素类似物加以避免,请根据上述设想,补充完善其基本研发流程:预期蛋白质功能→设计预期蛋白质的空间结构→推测氨基酸序列→_____→构建表达载体,转基因获得胰岛素类似物。

高三生物综合题困难题

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