干扰素是一类几乎能抵抗所有病毒的糖蛋白,可利用基因工程技术进行制备。请回答:
(1)利用mRNA的反转录产物可构建____________文库,进而获得干扰素目的基因,该文库不同于基因组文库的特点的____________________(答出两点)。
(2)将干扰素目的基因导入大肠杆菌实现转化时,首先应用__________处理大肠杆菌,使之处于_____态。大肠杆菌刚表达出的干扰素一般没有活性,原因是_______________。
(3)利用基因工程生产的干扰素在体外往往不易保存,可通过___________工程对其进行改造以延长保存时间。
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干扰素是一类几乎能抵抗所有病毒的糖蛋白,可利用基因工程技术进行制备。请回答:
(1)利用mRNA的反转录产物可构建____________文库,进而获得干扰素目的基因,该文库不同于基因组文库的特点的____________________(答出两点)。
(2)将干扰素目的基因导入大肠杆菌实现转化时,首先应用__________处理大肠杆菌,使之处于_____态。大肠杆菌刚表达出的干扰素一般没有活性,原因是_______________。
(3)利用基因工程生产的干扰素在体外往往不易保存,可通过___________工程对其进行改造以延长保存时间。
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干扰素是动物或人体细胞受到病毒侵袭后产生的一种糖蛋白,干扰素几乎能抵抗所有病毒引起的感染。科学家利用人干扰素基因运用动物乳腺生物反应器技术生产干扰素。回答下列问题。
(1)基因工程中获取目的基因的常用方法有___________、___________。
(2)将获得的人干扰素基因进行PCR扩增,目前在PCR体系中使用Taq酶而不使用哺乳动物体内的DNA聚合酶的主要原因是______________________。
(3)利用动物乳腺生物反应器技术生产干扰素,必须将人的干扰素基因与___________的启动子等调控组件重组在一起导入哺乳动物受精卵中,进而培育出转基因动物。
(4)利用动物乳腺生物反应器生产干扰素需对受精卵形成的早期胚胎进行性别鉴定,该过程需选择性染色体组成为___________的胚胎进行培养。为检测人干扰素基因是否被导人受精卵中,并在动物体内正常表达,可采用的分子检测方法有___________、___________。
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干扰素几乎能抵抗所有病毒引起的感染,对新冠病毒的防治有重要作用。用基因工程获得的工程酵母菌可以生产人类干扰素,请回答关于基因工程的有关问题:
(1)人类干扰素基因能和酵母菌的质粒拼接成功的原因是_________________,从而实现重组。干扰素的本质是一种糖蛋白,该工程中使用酵母菌做受体细胞比大肠杆菌更好,原因是__________________。检测干扰素基因是否转录出相应的mRNA的方法是__________________,这是它能否发挥功能的第一步。
(2)要获得更多人类干扰素基因可用PCR扩增技术,在PCR扩增仪中不断被消耗的物质有__________________。PCR反应过程中,DNA加热解旋后冷却,引物与__________________结合,然后在DNA聚合酶作用下延伸子链。
(3)干扰素在体外保存相当困难,如果利用蛋白质工程获得的干扰素可以保存半年,蛋白质工程的目标是____________________________________。
(4)观察分析下图,该图表示的过程是(_____)
A.构建基因组文库B.构建cDNA文库
C.构建基因表达载体D.构建转基因工程菌
(5)三种限制酶的识别序列及切割位点如图所示:
MseⅠ | PstⅠ | EcoRⅠ |
若要用如图质粒和外源DNA构建重组质粒,首先需要使用图中限制酶___________,还需DNA聚合酶和DNA连接酶,对质粒进行改造,构建新的限制酶酶切位点。
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干扰素在人体中是由免疫细胞合成并分泌的一种糖蛋白,几乎能抵御所有病毒引起的感染。传统生产方法成本高,产量低,获得的干扰素在体外不易保存。用生物技术手段可以解决这些问题。请回答相关问题。
(1)利用基因工程生产干扰素,过程是:
①从健康人体外周静脉血分离能合成干扰素的免疫细胞,从中提取________,经反转录获取目的基因,此过程需要的原料是________。
②用限制酶处理载体和目的基因后,用________酶处理,形成重组载体,该载体的化学本质是________。
③若选择大肠杆菌作为受体细胞,常用的转化方法使用________处理,使其成为________,一定温度作用下完成转化。
④在培养液中培养一段时间后,离心后取________(上清液/菌体),经进一步处理获得产物,进行产物鉴定时可采用________技术。
(2)利用蛋白质工程对干扰素进行改造,基本途径是:
预期蛋白质功能→________→________→找到对应的脱氧核苷酸序列。
(3)利用细胞工程生产干扰素,思路是:
将相应免疫细胞和瘤细胞融合,筛选________细胞,经细胞培养可获得大量干扰素。
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干扰素在人体中是由免疫细胞合成并分泌的一种糖蛋白,几乎能抵御所有病毒引起的感染。传统生产方法成本高、产量低,获得的干扰素在体外不易保存。用生物技术手段可以缓解这些问题。请回答相关问题。
(1)利用基因工程生产干扰素,过程是:
①从健康人体的外周静脉血分离能合成干扰素的免疫细胞,从中提取________,经反转录获取目的基因。
②用限制酶处理载体和目的基因后,用DNA连接酶处理,形成基因表达载体,该载体的化学本质是________。
③若选择大肠杆菌作为受体细胞,常用的转化方法是用Ca2+ 处理,使其成为________,
在一定温度条件下完成转化。
④在培养液中培养一段时间后,离心后取________(答“上清液”或“菌体”),经进一步处理获得产物,进行产物鉴定时可采用________技术。
(2)利用蛋白质工程对干扰素进行改造,基本途径是:
预期蛋白质功能→________→________→找到对应的脱氧核苷酸序列。
(3)利用细胞工程生产干扰素,设计思路是:将相应免疫细胞和瘤细胞融合,筛选出______ ___,经细胞培养可获得大量干扰素。
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干扰素在人体中是由免疫细胞合成并分泌的一种糖蛋白,几乎能抵御所有病毒引起的感染。传统生产方法成本高、产量低,获得的干扰素在体外不易保存。用生物技术手段可以缓解这些问题。请回答相关问题。
(1)利用基因工程生产干扰素,过程是:
①从健康人体的外周静脉血分离能合成干扰素的免疫细胞,从中提取________,经反转录获取目的基因。
②用限制酶处理载体和目的基因后,用DNA连接酶处理,形成基因表达载体,该载体的化学本质是________。
③若选择大肠杆菌作为受体细胞,常用的转化方法是用Ca2+ 处理,使其成为________,在一定温度条件下完成转化。
④在培养液中培养一段时间后,离心后取________(答“上清液”或“菌体”),经进一步处理获得产物,进行产物鉴定时可采用________技术。
(2)利用蛋白质工程对干扰素进行改造,基本途径是:
预期蛋白质功能→________→________→找到对应的脱氧核苷酸序列。
(3)利用细胞工程生产干扰素,设计思路是:将相应免疫细胞和瘤细胞融合,筛选出______ ___,经细胞培养可获得大量干扰素。
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干扰素在人体中是由免疫细胞合成并分泌的一种糖蛋白,几乎能抵御所有病毒引起的感染。传统生产方法成本高,产量低,获得的干扰素在体外不易保存。用生物技术手段可以解决这些问题。请回答相关问题。
(1)利用基因工程来生产干扰素,思路是:将人的干扰素基因通过运载体导入牛的受精卵中,再通过胚胎移植技术将其培育成转基因牛,在该牛的乳汁中可获得大量的干扰素。
①获取目的基因时,可从健康人体外周静脉血分离出________细胞,从中提取相应的mRNA,经________过程可得到目的基因,此过程需要的原料是________。
②将重组DNA导入受精卵的最常用的方法是________法。
③该转基因牛的培育过程属于________繁殖。(无性或有性)
④若将目的基因转入胚胎干细胞中,胚胎干细胞在体外培养的条件下能发育成转基因动物吗?________。为什么?
(2)利用细胞工程生产干扰素,思路是:将相应免疫细胞和瘤细胞融合,筛选________细胞,经细胞培养可获得大量干扰素。
(3)干扰素的作用机理是:
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a-干扰素是由人的白细胞产生的一种蛋白质,是抗病毒的一类特效药,人类利用基因工程技术已经大批量生产干扰素。回答下列问题:
(1)利用逆转录的方法合成a-干扰素基因时,所用的mRNA应从白细胞中提取,原因是_______这种方法合成的基因要比细胞内-干扰素基因短的原因是___________。
(2)在体外可利用PCR技术扩增a-干扰素基因,扩增过程是:目的基因DNA受热变性后解链为单链,___________与单链相应互补序列结合,然后在DNA聚合酶作用下进行延伸,如此循环多次。该过程中,反应体系将温度调控到70-75℃时,反应体系内进行的反应是_____。
(3)将扩増的-干抗素基因与运载体拼接成重组DNA需要用到的工具酶是____________.将重组DNA导入大肠杆菌内需用到钙离子,原因是_____________________。
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a干扰素是由人的白细胞产生的一种蛋白质,是抗病毒的一类特效药,人类利用基因工程技术已经大批量生产a干扰素。请分析回答下列问题:
(1)利用逆转录的方法合成干扰素基因,不能从上皮细胞中提取mRNA,原因是______;这种方法合成的基因与细胞内的基因相比,一般没有______、启动子、终止子等结构。
(2)根据α干扰素基因的脱氧核苷酸序列设计并合成引物,利用______技术可得到大量的α干扰素基因。
(3)基因工程中利用的工具酶有______,最常用的载体是______。
(4)将重组DNA导入大肠杆菌细胞时,需用______处理细胞使其成为______细胞。
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干扰素是人体细胞产生的一种重要蛋白质,几乎能抵抗所有病引起的感染,人工干扰素是我国第一批基因工程药物,现有多种改良技术,请分析回答下列问题。
(1)若要获得干扰素的基因,可从人的______细胞中提取mRNA作为模板,在______催化下合成cDNA。
(2)将目的基因导入大肠杆菌,常用______处理细胞,使细胞成为感受态细胞,重组表达载体与感受态细胞混合后,感受态细胞吸收______分子,完成转化。
(3)科学家将某目的基因导入植物细胞常用的方法是______。若将目的基因插入Ti质粒上的______中,得到含目的基因的重组Ti质粒,导入某种植物的受体细胞中,经培养、筛选等得到了能稳定表达愈伤组织,则说明目的基因已经整合到该细胞的染色体上。
(4)天然的干扰素通常在体外保存很困难。假设将一个半胱氨酸改变为丝基酸就可使干扰素在-70℃条件下保存半年。请根据蛋白质工程的原理对干扰素进行改造,具体思路是________________________。
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