多聚半乳糖醛酸酶（PG）能降解果胶使细胞壁破损，成熟的番茄果实中，PG合成显著增加，能使果...

[生物--选修3：现代生物科技专题] 多聚半乳糖醛酸酶（PG）能降解果胶使细胞壁破损。成熟的番茄果实中，PG量合成显著增加，能使果实变红变软，但不利于保鲜。利用基因工程减少PG基因的表达，可延长果实保质期。科学家将PG基因反向接到Ti质粒上，导入番茄细胞中，得到转基因番茄，具体操作流程如图。据图回答下列问题：

（1）若已获取PG的mRNA，可通过_______获取PG基因；在该基因上游加结构A可确保基因的反向转录，结构A上应具有___________结合位点；重组质粒转移到大肠杆菌中的目的是______。

（2）用含目的基因的农杆菌感染番茄原生质体后，可用含有______的培养基进行筛选。由于导入的目的基因能转录出反义RNA，且能与_________互补结合，因此可抑制PG基因的正常表达。

（3）若________，则可确定转基因番茄培育成功。获得的转基因番茄产生的种子不一定保留目的基因，科研人员常用____________方法使子代保持转基因番茄的优良性状。

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【生物—生物技术实践】（本题共15分）

多聚半乳糖醛酸酶（PG）能降解果胶使细胞壁破损。番茄果实成熟中，PG合成显著增加，能使果实变红变软，但不利于保鲜。利用基因工程的方法减少PG基因的表达，可延长果实保质期。科学家将PG基因反向接到Ti质粒上，导入到番茄细胞中，得到转基因番茄。请据图22 回答：

（1）（每空2分）提取目的基因

①若已获取PG的mRNA，可通过获取PG基因。

②在该基因上游加结构A可确保基因的反向转录，结构A上应具有结合位点。得到的目的基因两侧需人工合成BamHI黏性末端。已知BamHI的识别序列如图23-甲所示，请在图23-乙相应位置上，画出目的基因两侧的黏性末端。

③重组质粒转化到大肠杆菌中的目的是。

（2）用含目的基因的农杆菌感染番茄原生质体后，可用含有________的培养基进行筛选，与此同时，为能更好地达到培养目的，还需在培养基中加入。培养24～48h后取样，在质量分数为25%的蔗糖溶液中，观察细胞现象来鉴别细胞壁是否再生。

（3）由于导入的目的基因能转录反义RNA，且能与________互补结合，抑制PG基因的正常表达。若转基因番茄的保质期比非转基因番茄，则可确定转基因番茄成功。

（4）获得的转基因番茄产生的种子不一定保留目的基因，科研人员常采用方法使子代保持转基因的优良性状。（2分）

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（10分）多聚半乳糖醛酸酶（PG）能降解果胶使细胞壁破损。番茄果实成熟中，PG合成显著增加，能使果实变红变软，但不利于保鲜。利用基因工程的方法减少PG基因的表达，可延长果实保质期。科学家将PG基因反向接到Ti质粒上，导入到番茄细胞中，得到转基因番茄。请根据下图回答：

（1）提取目的基因

①若已获取PG的mRNA，可通过获取PG基因。

②在该基因上游加结构A可确保基因的反向转录，结构A上应具有结合位点。得到的目的基因两侧需人工合成BamHI黏性末端。已知BamHI的识别序列如图甲所示，请在下图乙相应位置上，画出目的基因两侧的黏性末端。

③重组质粒转化到大肠杆菌中的目的是。

（2）用含目的基因的农杆菌感染番茄原生质体后，可用含有________的培养基进行筛选，与此同时，为能更好地达到培养目的，还需在培养基中加入。培养24～48h后取样，在质量分数为25%的蔗糖溶液中，观察细胞现象来鉴别细胞壁是否再生。

（3）由于导入的目的基因能转录反义RNA，且能与________互补结合，抑制PG基因的正常表达。若转基因番茄的保质期比非转基因番茄，则可确定转基因番茄成功。

（4）获得的转基因番茄产生的种子不一定保留目的基因，科研人员常采用 ________方法使子代保持转基因的优良性状。

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（10分）多聚半乳糖醛酸酶（PG）能降解果胶使细胞壁破损。成熟的番茄果实中，PG合成显著增加，能使果实变红变软，但不利于保鲜。利用基因工程减少PG基因的表达，可延长果实保质期。科学家将PG基因反向接到Ti质粒上，导入番茄细胞中，得到转基因番茄，具体操作流程如图。据图回答下列问题：

（1）若已获取PG的mRNA，可通过　　　　　　　　 获取PG基因。

（2）用含目的基因的农杆菌感染番茄原生质体后，可用含有　　　　　　　　　　　 的培养基进行筛选。

（3）将转入反向链接PG基因的番茄细胞培育成完整的植株，需要用　　　　　　　　　　 技术；其中，愈伤组织经____　　　　　　　　　　 形成完整植株。

（4）用含目的基因的农杆菌感染番茄原生质体后，培养24～48h后取样，在质量分数为25%的蔗糖溶液中，通过观察细胞是否发生__　　　　　　 现象来鉴别细胞壁是否再生。

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多聚半乳糖醛酸酶（PG）能降解果胶使细胞壁破损，成熟的番茄果实中，PG合成显著增加，能使果实变红变软，但不利于保鲜。利用基因工程减少PG基因的表达，可延长果实保质期。科学家将PG基因反向接到Ti质粒上，导入番茄细胞中，得到转基因番茄，具体操作流程如图。据图回答下列问题：

（1）提取目的基因①若已获取PG的mRNA，可通过_______获取PG基因。②在该基因上游加结构A可确保基因的反向转录，结构A上应具有　　　　　　　 结合位点。③重组质粒转移到大肠杆菌中的目的是______。

（2）用含目的基因的农杆菌感染番茄原生质体后，可用含有______的培养基进行筛选，培养24~48h后取样，在质量分数为25%的蔗糖溶液中，观察细胞________现象来鉴别细胞壁是否再生。

（3）由于导入的目的基因能转录出反义RNA，且能与_________互补结合，因此可抑制PG基因的正常表达。若转基因番茄的保质期比非转基因番茄________，则可确定转基因番茄培育成功。

（4）获得的转基因番茄产生的种子不一定保留目的基因，科研人员常采用　　　　　　　　 方法使子代保持转基因番茄的优良性状。

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多聚半乳糖醛酸酶（PG）能降解果胶使细胞壁破损。成熟的番茄果实中，PG合成显著增加，能使果实变红变软，但不利于保鲜。利用基因工程减少PG基因的表达，可延长果实保质期．科学家将PG基因反向接到Ti质粒上，导入番茄细胞中，得到转基因番茄，具体操作流程如图。据图回答下列问题：

（1）若已获取PG的mRNA，可通过____________获取PG基因。

（2）用含目的基因的农杆菌感染番茄原生质体后，可用含有__________________的培养基进行筛选，理由是__________________________________________．之后，还需将其置于质量分数为0．3g/ml的蔗糖溶液中，观察细胞___________现象来鉴别细胞壁是否再生。

（3）由于导入的目的基因能转录出反义RNA，且能与______________________互补结合，因此可抑制PG基因的正常表达．若_____________________________，则可确定转基因番茄培育成功。

（4）将转入反向链接PG基因的番茄细胞培育成完整的植株，需要用________技术；其中，愈伤组织经_____________________形成完整植株，此过程除营养物质外还必须向培养基中添加________________________________________。

（5）某地开展以转基因番茄种植为核心的生态农业建设，利用其秸秆发酵制酒，酒糟喂牛，牛粪和一些番茄的叶片等做沼气池的原料，沼气用于燃烧，沼渣肥田提高番茄产量，该生态系统主要利用的生态农业原理有_____________________

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多聚半乳糖醛酸酶（PG）能降解果胶使细胞壁破损。成熟的番茄果实中，PG合成显著增加，能使果实变红变软，但不利于保鲜。利用基因工程减少PG基因的表达,可延长果实保质期。科学家将PG基因反向接到Ti质粒上，导入番茄细胞中，得到转基因番茄，具体操作流程如下图。据图分析并回答下列问题：

（1）形成的PG反义质粒叫做_______________，它的构建过程是基因工程的核心，需要用到的工具酶有_____________。若已获取PG的mRNA，可通过________ 获取PG基因。

（2）重组质粒转移到大肠杆菌中的目的是　　　　　　　　　　　　　　　　　 ，要实现此目的，还可以用_________法。

（3）要获取番茄的原生质体，通常要用到　　　　　　　　　　　　 酶。用含目的基因的农杆菌感染番茄原生质体后，可用含有　　　　　　　　 的培养基进行筛选。将其置于质量分数约为0．3g/ml的蔗糖溶液中，观察细胞的　　　　　　　　 现象来鉴别细胞壁是否再生。

（4）由于导入的目的基因能转录出反义RNA，且能与　　　　 （“①天然的PG基因/②天然的PG基因转录的mRNA”填序号）互补结合，因此可抑制PG基因的正常表达。若观察到番茄果实的保质期__________，则可确定转基因番茄培育成功。

（5）将转入反向链接PG基因的番茄细胞培育成完整的植株，还需要用　　　　　　　　　 技术；其中，愈伤组织经__________形成完整植株。

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多聚半乳糖醛酸酶（PG）能降解果胶使细胞壁破损。成熟的番茄果实中，PG合成显著增加，能使果实变红变软，但不利于保鲜。利用基因工程减少PG基因的表达，可延长果实保质期。科学家将PG基因反向接到Ti质粒上，导入番茄细胞中，得到转基因番茄，具体操作流程如下图。据图回答下列问题：

（1）形成的PG反义质粒叫做_______________，它的构建过程是基因工程的核心，需要用到的工具酶有_______________。若已获取PG的mRNA，可通过__________获取PG基因。重组质粒转移到大肠杆菌中的目的是________，要实现此目的，还可以用______________法。

（2）要获取番茄的原生质体，通常要用到________________酶。用含目的基因的农杆菌感染番茄原生质体后，可用含有__________的培养基进行筛选。将其置于质量分数为25%的蔗糖溶液中，观察细胞________现象来鉴别细胞壁是否再生。

（3）由于导入的目的基因能转录出反义RNA，且能与__________互补结合，因此可抑制PG基因的正常表达。若观察到__________，则可确定转基因番茄培育成功。

（4）将转入反向链接PG基因的番茄细胞培育成完整的植株，需要用__________技术；其中，愈伤组织经__________形成完整植株。

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普通番茄细胞中含有多聚半乳糖醛酸酶基因，控制细胞产生多聚半乳糖醛酸酶，该酶能破坏细胞壁，使番茄软化，不耐贮藏。科学家将抗多聚半乳糖醛酸酶基因导入番茄细胞，培育出了抗软化、保鲜时间长的转基因番茄。如图为操作流程图，据图回答问题。

（1）实验中的目的基因是______。

（2）构建基因表达载体时必需的工具酶有______。

（3）图中涉及的生物技术有______。

（4）根据图中，转基因番茄细胞中的信息传递过程，分析转基因番茄抗软化的原因______。

（5）若将得到的二倍体转基因番茄植株自交，F1中抗软化与不抗软化的植株数量比为3：1，则可推测目的基因整合到了______。

A．一对同源染色体的一条上

B．一对同源染色体的两条上

C．两条非同源染色体上

D．一对同源染色体的非姐妹染色体上

（6）利用普通番茄细胞生产多聚半乳糖醛酸酶，以下符合该酶的分离提纯的流程是______

①层析法提纯多聚半乳糖醛酸酶 ②发酵液过滤 ③制成酶制剂  ④冷冻干燥

A．①②③④B．①②④③C．②①④③D．②③④①

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普通番茄细胞中含有多聚半乳糖醛酸酶基因，控制细胞产生多聚半乳糖醛酸酶，该酶能破坏细胞壁，使番茄软化，不耐贮藏。科学家将抗多聚半乳糖醛酸酶基因导入番茄细胞，培育出了抗软化、保鲜时间长的转基因番茄。如图为操作流程图，据图回答问题。

（1）实验中的目的基因是___________________________________，获取目的基因的方法有从基因文库中获取、________________及人工合成法。

（2）构建基因表达载体时必需的工具酶有__________________________。

（3）图中涉及的生物技术有_______________________________。

（4）根据图中，转基因番茄细胞中的信息传递过程，分析转基因番茄抗软化的原因____________。

（5）若将得到的二倍体转基因番茄植株自交，F1中抗软化与不抗软化的植株数量比为3：1，则可推测目的基因整合到了___________。

A．一对同源染色体的一条上　　　　　　 B．一对同源染色体的两条上

C．两条非同源染色体上　　　　　　　　　 D．一对同源染色体的非姐妹染色体上

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