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回答下列（一）、（二）小题
（一）研究小组从土壤中筛选以多环芳烃（PAHs）为碳源和能源的细菌，用以降解工业废水和生活污水中的PAHs。请回答：
（1）为了从土壤中筛选PAHs降解菌，需配制以____________为唯一碳源的培养基，培养基经________[A. 121℃（500g/cm2 压力），15min B. 90℃（500g/cm2压力），15min C. 121℃（lkg/cm2压力），15minD. 90℃（500g/cm2压力），30min]髙压蒸汽灭菌，待冷却至60℃后倒平板。
（2）倒平板时应使锥形瓶的瓶口通过火焰，目的是____________。在倒平板的过程中，如果培养基溅在皿盖与皿底之间的部位，则这个平板不能用来培养PAHs降解菌，原因是________________________。
（3）制备土壤稀释液，用____________方法接种于固体培养基表面，培养时，需将培养皿____________并放在37℃恒温培养箱中培养24h。
（4）用划线法纯化PAHs降解菌的过程中，在第二次及其后的划线操作时，须从上一次划线的末端开始划线，原因是____________________________________。
（二）下图为某大学农学部奶牛繁育基地成功培育出的一头携带转入赖氨酸基因的克隆牛的大致过程，请据图回答问题：
（1）图中获得赖氨酸基因常用的酶是____________________，若我们己知赖氨酸基因的碱基序列，一般釆用____________法获取该目的基因。
（2）黑白花奶牛乳腺组织常用____________分散成单细胞，然后作为核供体。将得到的体细胞的细胞核移植到去核的未受精的卵细胞中才能发育成新个体，其原因是____________（A.卵细胞大，便于操作B.卵细胞含有的营养物质多 C.卵细胞的细胞质可使体细胞核全能性得到表达 D.重组细胞才具有全能性）。
（3）从④到⑤的过程可获得较多的遗传同质早期胚胎，常采用的方法是进行____________。
（4）克隆牛的诞生过程中涉及到的现代生物技术主要有：____________、____________。
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原油中含有大量有害的、致癌的多环芳烃．土壤中有些细菌可以利用原油中的多环芳烃为碳源，在培养基中形成分解圈．为筛选出能高效降解原油的菌株并投入除污，某小组同学设计了相关实验．下列有关实验的叙述，不正确的是（ ）
A．应配制来源于被原油污染土壤的土壤稀释液备用
B．配制以多环芳烃为唯一碳源的选择性培养基
C．将土壤稀释液灭菌后接种到选择性培养基上
D．在选择性培养基上能形成分解圈的即为所需菌种
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（8分）萘、蒽等多环芳烃化合物，具有致癌、致畸、致突变作用。研究人员从污泥中筛选到一株可降解萘、蒽的细菌，命名为BDP01。研究人员在以萘、蒽为碳源的培养基中研究菌株的生长量(以分光光度计于600nm处测定的光吸收值(OD600)表示)，图1和图2分别表示不同培养温度、不同pH对BDP01生长量的影响结果。
(1)在配制培养基时，应选择萘或蒽作为唯一碳源的________培养基，pH需调至______；所需保持干燥的试管、培养皿、吸管等玻璃仪器，事先放入______________中进行灭菌。
(2)从污泥中分离菌株，接种最好采用__________________法，分离菌株的同时还可以计数。接种菌株的培养基，需要放置_________________中，温度选择在____________之间的范围。
(3)用液体培养基测定菌株数量时需振荡培养，使菌株与培养液充分接触，提高________的利用率；检测菌株数量时，除了采用统计菌落数的活菌计数法外，还可采用____________法。
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多环芳香烃（PAHs）是一类高毒性有机污染物，由于具有致癌性和致突变性而受到关注。实验小组从土壤中分离出能降解PAHs的细菌，并对其进行培养和计数。请回答下列问题:
（1）实验小组从富含PAHs的土壤中取样后，放置在以PAHs为唯一碳源的培养基上培养，其目的是________________________________。
（2）将PAHs降解菌的菌液稀释105倍后取0.1mL分别涂布在3个平板中，经培养，3个平板上的菌落数分别是79个、57个和41个，则样液中的活菌数是_________个/mL。也可以在显微镜下采用__________直接计数的方法统计样液中PAHs降解菌的数量。
（3）若采用平板划线法分离样液中的PAHs降解菌，操作时，接种环通过____________灭菌。在涂布平板时，滴加到培养基表面的菌液不宜过多，其原因是____________________________________。示意图A和B中，图____________表示的是用稀释涂布平板法接种培养后得到的结果。
（4）若某一实验组平板上菌落的平均数为201个，而空白对照组的1个平板上出现了3个菌落，该结果说明这次实验可能出现了____________________________。
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原油含有大量致癌的“多环芳烃”，分子结构十分稳定，有些细菌可以利用原油中的多环芳烃为碳源，在培养基中形成分解圈。某小组以如何筛选出能降解原油的菌株并投入除污为课题设计了有关实验。有关说法正确的是
A.用于筛选目的菌株的培养基其主要特点是以原油（多环芳烃）为唯一碳源
B.培养基配制完成之后需进行消毒处理
C.在选择培养基上形成的菌落，即为能分解多环芳烃的目的菌种
D.筛选出目的菌种，可用平板划线法在培养基上进行接种和计数
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科研人员从被石油污染的土壤中分离获得能降解石油成分“多环芳烃菲”的菌株Q，步骤如下图所示，下列相关的叙述中，错误的是
A.步骤①—③中，培养液中需加入多环芳烃菲作为唯一碳源
B.步骤①—③中，将锥形瓶放在摇床上充分振荡，使菌株与培养液充分接触
C.步骤④是利用平板划线法纯化菌株Q，图中所示接种环最少灼烧2次
D.步骤④中每一区域可重复画几次，但1区和5区不能出现交叉
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科研工作者从塑料瓶回收点附近的土壤中发现了能降解塑料的细菌，研究发现这种细菌含有能够分解塑料的酶，该细菌通过分解塑料获得碳源和能量。图27是从土壤中筛选该细菌的过程。
回答下列问题：
（1）本实验利用的培养基需用________法进行灭菌，无菌技术处理除了防止实验室培养物被其他外来微生物污染外，还可______________和______________。
（2）图中的细菌培养基最好选用_______（填“牛肉膏蛋白胨培养基”“麦芽汁琼脂培养基”或“马铃薯琼脂培养基”）；图中的选择培养基应以_______为唯一碳源，其原理是____________________________________________________。
（3）为了高效利用这种酶，可利用固定化细胞技术，与固定化酶相比，固定化细胞的优势是_____________________。可用包埋法制备固定化该细菌细胞，操作过程中的海藻酸钠作用是____________________________。
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某生物兴趣小组按下图所示过程从土壤中筛选能降解纤维素的细菌。回答下列问题:
（1）步骤②是___________。为了筛选目的菌，步骤③的培养基中加入的唯一碳源为___________，这种培养基属于___________（填“鉴别”或“选择”）培养基。
（2）上述接种等操作都应在酒精灯火焰附近进行的原因是___________。一般在灼烧接种环之后，要等其冷却后再进行划线，原因是______________________。
（3）将接种后的培养基和作为对照的______________同时放入恒温培养箱中培养，为了对初步筛选出来的菌种作进一步的鉴定，可在培养基中加入_________________。选取鉴定出的具有较大透明圈的菌种可接种到___________培养基上临时保藏。
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（2015•成都模拟）某研究小组欲研究被石油污染过的土壤中细菌的数量，并从中筛选出能分解石油的细菌．下列操作错误的是（ ）
A.称取和稀释被污染的土壤时应在火焰旁
B.用以石油为唯一碳源的培养基进行筛选
C.分离菌种时可采用稀释涂布平板法接种
D.对细菌进行计数时宜采用平板划线法接种
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某研究小组欲研究被石油污染过的土壤中细菌的数量，并从中筛选出能分解石油的细菌。下列操作错误的是
A．称取和稀释被污染的土壤时应在火焰旁
B．用以石油为唯一碳源的培养基进行筛选
C．分离菌种时可采用稀释涂布平板法接种
D．对细菌进行计数时宜采用平板划线法接种