(18分) pBR322质粒是基因工程中经常选用的工具,如图Ⅰ所示。
I.目的基因如果插入质粒的某抗性基因中,将使该基因失活。为了检查运载体是否导入原本无Ampr 和Tetr的大肠杆菌,将大肠杆菌在含氨苄青霉素的培养基上培养,得到如图Ⅱ的菌落。再将灭菌绒布按到培养基上,使绒布面沾上菌落,然后将绒布按到含四环素的培养基上培养,得到如图Ⅲ的结果(空圈表示与Ⅱ对照无菌落的位置)。
(1).pBR322质粒在基因工程中的作用是________。
(2).下图是pBR322质粒上被某种酶识别的一段特定序列。a处被切割后,产生的暴露出来的单链碱基序列是。如果要从生物细胞中分离目的基因,首先需要进行基因定位,然后再用上述酶切割。将目的基因与质粒连接起来的酶作用于图中的________处。
(3)与图Ⅲ空圈相对应的图Ⅱ中的菌落表现型是________,由此说明目的基因插入了________中。
II.下面是pBR322质粒的部分碱基序列,所编码蛋白质的氨基酸序列为“甲硫氨酸—精氨酸—谷氨酸—丙氨酸—天冬氨酸—缬氨酸…”(甲硫氨酸的密码子AUG也是起始密码子)。
则:①、②两单链作为转录模板链的是________ (填序号),该链转录产生的mRNA顺序是AUG ;如图中箭头所指碱基对G/C缺失,该基因相应片段编码的氨基酸序列为________
________( 4分)。
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(18分) pBR322质粒是基因工程中经常选用的工具,如图Ⅰ所示。
I.目的基因如果插入质粒的某抗性基因中,将使该基因失活。为了检查运载体是否导入原本无Ampr 和Tetr的大肠杆菌,将大肠杆菌在含氨苄青霉素的培养基上培养,得到如图Ⅱ的菌落。再将灭菌绒布按到培养基上,使绒布面沾上菌落,然后将绒布按到含四环素的培养基上培养,得到如图Ⅲ的结果(空圈表示与Ⅱ对照无菌落的位置)。
(1).pBR322质粒在基因工程中的作用是________。
(2).下图是pBR322质粒上被某种酶识别的一段特定序列。a处被切割后,产生的暴露出来的单链碱基序列是。如果要从生物细胞中分离目的基因,首先需要进行基因定位,然后再用上述酶切割。将目的基因与质粒连接起来的酶作用于图中的________处。
(3)与图Ⅲ空圈相对应的图Ⅱ中的菌落表现型是________,由此说明目的基因插入了________中。
II.下面是pBR322质粒的部分碱基序列,所编码蛋白质的氨基酸序列为“甲硫氨酸—精氨酸—谷氨酸—丙氨酸—天冬氨酸—缬氨酸…”(甲硫氨酸的密码子AUG也是起始密码子)。
则:①、②两单链作为转录模板链的是________ (填序号),该链转录产生的mRNA顺序是AUG ;如图中箭头所指碱基对G/C缺失,该基因相应片段编码的氨基酸序列为________
________( 4分)。
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下图a示基因工程中经常选用的载体—pBR322质粒,Ampr表示氨苄青霉素抗性基因,Tetr表示四环素抗性基因。目的基因如果插入某抗性基因中,将使该基因失活,而不再具有相应的抗性。为了检查载体是否导入原本没有Ampr和Tetr的大肠杆菌,将大肠杆菌培养在含氨苄青霉素的培养基上,得到如图b的结果(黑点表示菌落)。再将灭菌绒布按到图b的培养基上,使绒布面沾上菌落,然后将绒布平移按到含四环素的培养基上培养,得到如图c的结果(空圈表示与b对照无菌落的位置)。据此分析并回答:
(1)pBR322质粒的基本组成单位是________ 。该基因工程中,质粒上的Amrr、Tetr称为________基因。
(2)与图c空圈相对应的图b中的菌落表现型是________,由此说明目的基因插入了________中。
(3)将大肠杆菌培养在含氨苄青霉素、四环素培养基上的过程,属于基因工程基本操作中
的步骤。该基因工程中的受体细胞是________ 。
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(6分)下图a示基因工程中经常选用的载体-pBR322质粒,Ampr表示氨苄青霉素抗性基因,Tetr表示四环素抗性基因。目的基因如果插入某抗性基因中,将使该基因失活,而不再具有相应的抗性。为了检查载体是否导入原本没有Ampr和Tetr的大肠杆菌,将大肠杆菌培养在含氨苄青霉素的培养基上,得到如图b的结果(黑点表示菌落)。再将灭菌绒布按到图b的培养基上,使绒布面沾上菌落,然后将绒布平移按到含四环素的培养基上培养,得到如图c的结果(空圈表示与b对照无菌落的位置)。据此分析并回答:
(1)pBR322质粒的基本组成单位是________。在基因工程中,质粒上的Amrr、Tetr称为________基因。
(2)与图c空圈相对应的图b中的菌落表现型是________,由此说明________。
(3)将大肠杆菌培养在含氨苄青霉素、四环素培养基上的过程,属于基因工程基本操作中的________步骤,该基因工程中的受体细胞是。
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(8分)下图a示基因工程中经常选用的载体一pBR322质粒,Ampr表示氨苄青霉素抗性基因,Tetr表示四环素抗性基因。目的基因如果插入某抗性基因中,将使该基因失活,而不再具有相应的抗性。为了检查载体是否导入原本没有Ampr和Tetr的大肠杆菌,将大肠杆菌培养在含氨苄青霉素的培养基上,得到如图b的结果(黑点表示菌落)。再将灭菌绒布按到图b的培养基上,使绒布面沾上菌落,然后将绒布平移按到含四环素的培养基上培养,得到如图C的结果(空图表示与b对照无菌落的位置)。据此分析并回答:
(1)pBR322质粒的基本组成单位是________。该基因工程中,质粒上的Amrr、Tetr称为_____基因。
(2)与图c空圈相对应的图b中的菌落表现型是________,由此说明目的基因插入________中。
(3)将大肠杆菌培养在含氧苄青霉索、四环素培养基上的过程,属于基因工程基本操作中的步骤。该基工程中的受体细胞是________。
(4)若用pBR322质粒作为载体,通过基因工程生产食品,是否存在食品安全性问题?试说明理由。________,。
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下图是将人的生长激素基因导入细菌B细胞内制“工程菌”的示意图。图a是基因工程中经常选用的载体-pBR322质粒,Ampr表示氨苄青霉素抗性基因,Tetr表示四环素抗性基因.目的基因如果插入某抗性基因中,将使该基因失活,而不再具有相应的抗性.为了检查载体是否导入原本没有Ampr和Tetr的大肠杆菌,将大肠杆菌培养在含氨苄青霉素的培养基上,得到如图b的结果(黑点表示菌落).再将灭菌绒布按到图b的培养基上,使绒布面沾上菌落,然后将绒布平移按到含四环素的培养基上培养,得到如图c的结果(空圈表示与b对照无菌落的位置).据此分析并回答:
(1)pBR322质粒的基本组成单位是 。在基因工程中,质粒上的Amrr、Tetr称为 基因。
(2)与图c空圈相对应的图b中的菌落表现型是 ,由此说明 。
(3)将大肠杆菌培养在含氨苄青霉素、四环素培养基上的过程,属于基因工程基本操作中的 步骤,该基因工程中的受体细胞是 。
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我国基因工程药物的研制和生产发展迅猛,下图是利用基因工程方法生产重组人生长激素的示意图。图中质粒表示基因工程中经常选用的载体—pBR322质粒,Ampr表示青霉素抗性基因,Tetr表示四环素抗性基因。根据上图回答下列问题(限制酶PstⅠ、EcoRⅠ和HindⅢ切割形成的末端均不相同):
(1)过程②必需的酶是 ,过程④必需的酶是 。⑤过程中为提高成功率,常用 溶液处理大肠杆菌。
(2)如果用限制酶PstⅠ、EcoRⅠ和HindⅢ对质粒pBR322进行切割,用一种酶、两种酶和三种酶分别切割时,则形成的DNA片段共 种,其中含有完整四环素抗性基因的DNA片段的比例是 。
(3)如果只用限制酶PstI切割目的基因和质粒pBR322,完成过程④、⑤后,将三角瓶内的大肠杆菌(不含Ampr、Tetr抗性质粒)先接种到甲培养基上,形成菌落后用无菌牙签挑取甲上的单个菌落,分别接种到乙和丙两个培养基的相同位置上,一段时间后,菌落的生长状况如图所示。接种到甲培养基上的目的是筛选 的大肠杆菌,含有目的基因的大肠杆菌在乙、丙培养基上的存活状态分别是 , 。
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我国基因工程药物的研制和生产发展迅猛,下图是利用基因工程方法生产重组人生长激素的示意图。图中质粒表示基因工程中经常选用的载体—pBR322质粒,Ampr表示青霉素抗性基因,Tetr表示四环素抗性基因。根据下图回答下列问题(限制酶PstⅠ、EcoRⅠ和HindⅢ切割形成的末端均不相同):
(1)过程②必需的酶是________,过程④必需的酶是________。⑤过程中为提高成功率,常用________溶液处理大肠杆菌。
(2)如果用限制酶PstⅠ、EcoRⅠ和HindⅢ对质粒pBR322进行切割,用一种酶、两种酶和三种酶分别切割时,则形成的DNA片段共________种,其中含有完整四环素抗性基因的DNA片段的比例是________。
(3)如果只用限制酶PstI切割目的基因和质粒pBR322,完成过程④、⑤后,将三角瓶内的大肠杆菌(不含Ampr、Tetr抗性质粒)先接种到甲培养基上,形成菌落后用无菌牙签挑取甲上的单个菌落,分别接种到乙和丙两个培养基的相同位置上,一段时间后,菌落的生长状况如图所示。接种到甲培养基上的目的是筛选________的大肠杆菌,含有目的基因的大肠杆菌在乙、丙培养基上的存活状态分别是________,________。
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I.科学家将人的生长激素基因与pBR322质粒进行重组,得到的重组质粒导入牛的受精卵,使其发育为转基因牛,再通过细胞工程培育为转基因克隆牛。pBR322质粒含有两个抗生素抗性基因和5个限制酶切点(如图2)。将重组质粒导入大肠杆菌,并成功地在大肠杆菌中得以表达。请据图回答问题。
(1)图1中显示的人的生长激素基因是通过人工合成的,图中①过程需要的酶是__________。该过程所依据的碱基互补配对原则是___________________________(用字母和箭头表示)。
(2)图1中的mRNA是从人体的_______________细胞中获取。
(3)重组质粒形成与否需要鉴定和筛选,方法是将重组质粒的DNA分子导入大肠杆菌,通过含抗生素的培养基进行培养,观察大肠杆菌的生长、繁殖情况进行判断,如图3所示:
如果受体菌在培养基A上能生长、繁殖形成菌落,而不能在培养基B上生长、繁殖,则使用限制酶a的切点是图2中的___________________________________,即目的基因插入了___________________中。
II.SRY基因是Y染色体上的性别决定基因,SRY—PCR胚胎性别鉴定技术能准确鉴定早期胚胎性别,应用前景十分广阔。请回答相关问题:
用SRY—PCR法鉴定胚胎性别需要充足的材料并保证被测胚胎的活性,因此,首先从被测胚胎中取出几个细胞,提取_______________,然后用________________的一段脱氧核苷酸序列作引物,进行PCR扩增。鉴定扩增产物,制备具有SRY基因特异性的探针,出现阳性反应者,胚胎为__性。
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I.科学家将人的生长激素基因与pBR322质粒进行重组,得到的重组质粒导入牛的受精卵,使其发育为转基因牛,再通过细胞工程培育为转基因克隆牛。pBR322质粒含有两个抗生素抗性基因和5个限制酶切点(如图2)。将重组质粒导入大肠杆菌,并成功地在大肠杆菌中得以表达。请据图回答问题。
(1)图1中显示的人的生长激素基因是通过人工合成的,图中①过程需要的酶是__________。该过程所依据的碱基互补配对原则是___________________________(用字母和箭头表示)。
(2)图1中的mRNA是从人体的_______________细胞中获取。
(3)重组质粒形成与否需要鉴定和筛选,方法是将重组质粒的DNA分子导入大肠杆菌,通过含抗生素的培养基进行培养,观察大肠杆菌的生长、繁殖情况进行判断,如图3所示:
如果受体菌在培养基A上能生长、繁殖形成菌落,而不能在培养基B上生长、繁殖,则使用限制酶a的切点是图2中的___________________________________,即目的基因插入了___________________中。
II.SRY基因是Y染色体上的性别决定基因,SRY—PCR胚胎性别鉴定技术能准确鉴定早期胚胎性别,应用前景十分广阔。请回答相关问题:
用SRY—PCR法鉴定胚胎性别需要充足的材料并保证被测胚胎的活性,因此,首先从被测胚胎中取出几个细胞,提取_______________,然后用________________的一段脱氧核苷酸序列作引物,进行PCR扩增。鉴定扩增产物,制备具有SRY基因特异性的探针,出现阳性反应者,胚胎为__性。
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I.科学家将人的生长激素基因与pBR322质粒进行重组,得到的重组质粒导入牛的受精卵,使其发育为转基因牛,再通过细胞工程培育为转基因克隆牛。pBR322质粒含有两个抗生素抗性基因和5个限制酶切点(如图2)。将重组质粒导入大肠杆菌,并成功地在大肠杆菌中得以表达。请据图回答问题。
(1)图1中显示的人的生长激素基因是通过人工合成的,图中①过程需要的酶是__________。该过程所依据的碱基互补配对原则是___________________________(用字母和箭头表示)。
(2)图1中的mRNA是从人体的_______________细胞中获取。
(3)重组质粒形成与否需要鉴定和筛选,方法是将重组质粒的DNA分子导入大肠杆菌,通过含抗生素的培养基进行培养,观察大肠杆菌的生长、繁殖情况进行判断,如图3所示:
如果受体菌在培养基A上能生长、繁殖形成菌落,而不能在培养基B上生长、繁殖,则使用限制酶a的切点是图2中的___________________________________,即目的基因插入了___________________中。
II.SRY基因是Y染色体上的性别决定基因,SRY—PCR胚胎性别鉴定技术能准确鉴定早期胚胎性别,应用前景十分广阔。请回答相关问题:
用SRY—PCR法鉴定胚胎性别需要充足的材料并保证被测胚胎的活性,因此,首先从被测胚胎中取出几个细胞,提取_______________,然后用________________的一段脱氧核苷酸序列作引物,进行PCR扩增。鉴定扩增产物,制备具有SRY基因特异性的探针,出现阳性反应者,胚胎为__性。
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