图1、图2中标注了相关限制酶的酶切位点，且限制酶的切点是唯一的，外源DNA插入会导致相应的基因失活，请回答下列问题。
（1）基因工程中最常用的载体是_______，而作为基因表达载体，除图1所示结构外，还需具有___________________________。
（2）根据图中所给信息，构建基因表达载体时，应选用的限制酶是__________________。若将基因表达载体导入大肠杆菌，一般用____________处理，使其处于_____________，以利于吸收周围环境中的DNA分子。
（3）为了筛选含目的基因的大肠杆菌，应在培养基中添加______________，培养一段时间后，平板上长出的菌落，用PCR技术鉴定时，所用的引物组成为图2中_____________。
高三生物非选择题中等难度题
图1、图2中标注了相关限制酶的酶切位点，且限制酶的切点是唯一的，外源DNA插入会导致相应的基因失活，请回答下列问题。
（1）基因工程中最常用的载体是_______，而作为基因表达载体，除图1所示结构外，还需具有___________________________。
（2）根据图中所给信息，构建基因表达载体时，应选用的限制酶是__________________。若将基因表达载体导入大肠杆菌，一般用____________处理，使其处于_____________，以利于吸收周围环境中的DNA分子。
（3）为了筛选含目的基因的大肠杆菌，应在培养基中添加______________，培养一段时间后，平板上长出的菌落，用PCR技术鉴定时，所用的引物组成为图2中_____________。
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下表中列出了几种限制酶识别序列及其切割位点。
下图是转基因抗病香蕉的培育过程，含目的基因的外源DNA和质粒上的箭头表示相关限制酶的酶切位点。请回答下列问题：
(1) 用图中的质粒和目的基因构建重组质粒，不能使用SmaI酶切割，原因__________________________________________。
(2) 构建含目的基因的重组质粒A时，选 用 BamhHI 和HindⅢ酶对_______和 _______进行切割，可以防止质粒和含目的基因的外源DNA片段自身环化。
(3) ①〜⑤中存在碱基互补配对的是____________。
(4) 香蕉组织细胞具有__________，因此，可以利用组织培养技术将导入目的(抗病)基因的香蕉组织细胞培育成植株。图中④、⑤依次表示组织培养过程中香蕉组织细胞的_________、____________。培养皿中的培养基除添加营养物质外，还需要添加_________和__________以诱导外植体完成④、⑤生理过程，培养成完整的植物体。在形成愈伤组织的过程中，细胞的新陈代谢类型是_____________。
(5) 如何检测图示过程最终是否取得成功？____________________________。
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下表中列出了几种限制酶识别序列及其切割位点。
下图是转基因抗病香蕉的培育过程，含目的基因的外源DNA和质粒上的箭头表示相关限制酶的酶切位点。请回答下列问题：
(1) 用图中的质粒和目的基因构建重组质粒，不能使用SmaI酶切割，原因是__________________________________________。
(2) 构建含目的基因的重组质粒A时，选 用 BamhHI 和HindⅢ酶对_______和 _______进行切割，可以防止质粒和含目的基因的外源DNA片段自身环化。
(3) ①〜⑤中存在碱基互补配对的是____________。
(4) 香蕉组织细胞具有__________，因此，可以利用组织培养技术将导入目的(抗病)基因的香蕉组织细胞培育成植株。图中④、⑤依次表示组织培养过程中香蕉组织细胞的_________、____________。培养皿中的培养基除添加营养物质外，还需要添加_________和__________以诱导外植体完成④、⑤生理过程，培养成完整的植物体。在形成愈伤组织的过程中，细胞的新陈代谢类型是_____________。
(5) 如何检测图示过程最终是否取得成功？____________________________。
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下表中列出了几种限制酶识别序列及其切割位点。
下图是转基因抗病香蕉的培育过程，含目的基因的外源DNA和质粒上的箭头表示相关限制酶的酶切位点。请回答下列问题：
(1) 用图中的质粒和目的基因构建重组质粒，不能使用SmaI酶切割，原因是__________________________________________。
(2) 构建含目的基因的重组质粒A时，选 用 BamhHI 和HindⅢ酶对_______和 _______进行切割，可以防止质粒和含目的基因的外源DNA片段自身环化。
(3) ①?⑤中存在碱基互补配对的是____________。
(4) 香蕉组织细胞具有__________，因此，可以利用组织培养技术将导入目的(抗病)基因的香蕉组织细胞培育成植株。图中④、⑤依次表示组织培养过程中香蕉组织细胞的_________、____________。培养皿中的培养基除添加营养物质外，还需要添加_________和__________以诱导外植体完成④、⑤生理过程，培养成完整的植物体。在形成愈伤组织的过程中，细胞的新陈代谢类型是_____________。
(5) 如何检测图示过程最终是否取得成功？____________________________。
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(10分)请回答下列有关基因工程的问题。
下表是基因工程中几种限制酶识别序列及其切割位点。图是转基因香蕉的培育过程，含目的基因的外源DNA和质粒上的箭头表示相关限制酶的酶切位点。
（1）从转基因香蕉培育图中反映了质粒作为运载体的特点是__________________，基因工程中还可以用_______________作为运载体。
（2）图中的质粒和目的基因构建重组质粒，不能使用SmaI酶切割，原因是_______________
（3）下图是用______________(限制）酶进行切割得到的目的基因。可以防止含目的基因的外源DNA片段切割后自身环化。
（4）人体细胞内含有抑制癌症发生的某基因，生物技术可对此类基因的变化进行检测。该基因含有800对碱基对(bp)，用BamHⅠ切割得到的400bp，200bp，200bp,．用EcoRⅠ再次切割得到100bp,300bp,150bp，50bp,200bp．而患者体内获取的这段基因，用BamHⅠ切割得到的区段变为400bp，400bp ，用EcoRⅠ再次切割得到100bp,300bp,150bp，250bp．在正常人体内BamHⅠ和EcoRⅠ识别序列分别有________个和_____个，患者体内发生了_________。
（5）下列有关基因工程的叙述错误的是（ ）（多选）
A．质粒上的目的基因必须整合到受体细胞的DNA上才能不被分解
B．以蛋白质的氨基酸序列为依据合成的目的基因与原基因的碱基序列相同
C．没有与目的基因重组的质粒也可以进入受体细胞
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(10分)请回答下列有关基因工程的问题。
下表是基因工程中几种限制酶识别序列及其切割位点。图是转基因香蕉的培育过程，含目的基因的外源DNA和质粒上的箭头表示相关限制酶的酶切位点。
⑴从转基因香蕉培育图中反映了质粒作为运载体的特点是____ _______，基因工程中还可以用____________作为运载体。
⑵图中的质粒和目的基因构建重组质粒，不能使用SmaI酶切割，原因是_________________
⑶下图是用_________________(限制）酶进行切割得到的目的基因。可以防止含目的基因的外源DNA片段切割后自身环化。
⑷人体细胞内含有抑制癌症发生的某基因，生物技术可对此类基因的变化进行检测。该基因含有800对碱基对(bp)，用BamHⅠ切割得到的400bp，200bp，200bp,.用EcoRⅠ再次切割得到100bp,300bp,150bp，50bp,200bp.而患者体内获取的这段基因，用BamHⅠ切割得到的区段变为400bp，400bp ，用EcoRⅠ再次切割得到100bp,300bp,150bp，250bp.在正常人体内BamHⅠ和EcoRⅠ识别序列分别有________个和_____个，患者体内发生了_________。
⑸下列有关基因工程的叙述错误的是（ ）（多选）
A.质粒上的目的基因必须整合到受体细胞的DNA上才能不被分解
B.以蛋白质的氨基酸序列为依据合成的目的基因与原基因的碱基序列相同
C.没有与目的基因重组的质粒也可以进入受体细胞
D.质粒上的抗生素抗性基因有利于质粒与外源基因连接
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(9分)回答下列有关生物工程的问题。
下表是基因工程中几种限制酶识别序列及其切割位点；图2是转基因香蕉的培育过程，含目的基因的外源DNA和质粒上的箭头表示相关限制酶的酶切位点。
1．图1是用限制酶_________________进行切割得到的目的基因，可以防止含目的基因的外源DNA片段切割后____。
2．从图2中反映质粒作为运载体的特点是___________________。基因工程中还可以用___________________作为运载体。
3．图2中构建重组质粒不能使用SmaI酶切割的原因是 ________________。
4．图2中④表示组织培养过程中的________，它对植物激素调节的要求是______________。
5．图2中的农杆菌是基因工程中的________________。判断该转基因工程是否成功的依据是_________。
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【生物――选修3：现代生物科技专题】(15分，除标明外其余每空2分)请回答下列相关生物工程问题：下表是基因工程中几种限制酶识别序列及其切割位点。图是转基因香蕉的培育过程，含目的基因的外源DNA和质粒上的箭头表示相关限制酶的酶切位点。
（1）香蕉组织细胞具有发育成完整个体的潜能，图中④、⑤依次表示组织培养过程中香
组织细胞的___________________（1分）。培养皿中的培养基除添加营养物质外，还需要添加_________________等植物激素。
（2）图中的质粒和目的基因构建重组质粒，不能使用SmaI酶切割，原因是_______。
（3）下图是用_________________(限制）酶进行切割得到的目的基因。可以防止含目的基因的外源DNA片段切割后自身环化。
（4） 从转基因香蕉培育图中反映了质粒作为运载体的特点是_______ ，基因工程中还可以用___________________作为运载体。
（5）人体细胞内含有抑制癌症发生的某基因，生物技术可对此类基因的变化进行检测。该基因含有800对碱基对(bp)，用BamHⅠ切割得到的400bp，200bp，200bp,.用EcoRⅠ再次切割得到100bp,300bp,150bp，50bp,200bp.而患者体内获取的这段基因，用BamHⅠ切割得到的区段变为400bp，400bp ，用EcoRⅠ再次切割得到100bp,300bp,150bp，250bp.在正常人体内BamHⅠ和EcoRⅠ识别序列分别有________个和_____个。
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研究发现，M限制酶在大肠杆菌PUC18质粒(含氨苄青霉素抗性基因)的IacZ基因上存在唯一的酶切位点，如果IacZ基因没有插入外源基因，便可表达出β-半乳糖苷酶，当培养基中含有IPTG和Ⅹ-gal时，β-半乳糖苷酶能将Ⅹ-gal水解成蓝色，大肠杆菌将形成蓝色菌落，反之，则形成白色菌落。回答下列问题：
(1)已获得的目的基因可利用___________技术进行扩增，与体內DNA复制相比较，该反应要在___________中才能进行，并且要严格控制___________条件。
(2)构建重组质粒的过程中，需要用到的酶有___________。大肠杆菌需事先用Ca2+进行处理，目的是______________________。
(3)在选择培养基上加入IPTG、X-gal和氨苄青霉素，其巾氨苄青霉素的作用是筛选出____________。与“氨苄青霉素”筛选相比，“蓝白斑”筛选的优点是___________。若要挑取已导入目的基因的大肠杆菌，应选取___________色菌落。
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（四）回答基因工程的相关问题：
如表是几种限制酶识别序列及其切割位点，图24、图25中标注了相关限制酶的酶切位点，请回答下列问题：
1.用图24、25中质粒和目的基因构建重组质粒，应选用BclI酶和_________酶切割，酶切后的质粒和目的基因片段，通过______________ 酶作用后获得重组质粒。
2.若用上述限制酶获得的目的基因长度为1.0 kb（1 kb = 1000对碱基），质粒长度为3.2 kb，则获得重组质粒的长度为______。
A. < 4.2 kb B. > 4.2 kb C. = 4.2 kb
3.重组质粒成功导入受体细胞的概率一般仅在10-7，为了筛选出导入了重组质粒的大肠杆菌，在导入完成后，将所有大肠杆菌分别在含有四环素和氨苄青霉素的培养基中培养，大肠杆菌在两种培养基的生长状况不可能的是______，可能性最大的是______。
A. 在含氨苄青霉素的培养基上能正常生长,在含四环素的培养基上不能正常生长
B. 在含四环素的培养基上能正常生长,在含氨苄青霉素的培养基上不能正常生长
C. 在含氨苄青霉素的培养基和含四环素的培养基上都能正常生长
D. 在含氨苄青霉素的培养基和含四环素的培养基上都不能正常生长
4.用Sau3A I限制酶______（填 能或不能）识别并切割BamHI酶的识别序列，若用Sau3A I限制酶完全切割图24质粒时，可获得__________种大小不同的DNA片段。
5.若想在山羊的乳汁中收获上述目的基因的表达产物，则需将重组质粒导入至山羊的________________细胞中，那么上述过程属于_______。
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