逆转录病毒载体是一种表达型质粒，研究者利用其上的“逆转录病毒序列”，将4个关键基因整合到小...

逆转录病毒载体是一种表达型质粒，研究者利用其上的“逆转录病毒序列”，将4个关键基因整合到小鼠的成纤维细胞的染色体上，获得与胚胎干细胞（ES 细胞）具有相似的发育能力的细胞诱导多能干细胞（iPS细胞）。

（1）逆转录病毒载体的化学本质是__________________。

（2）目的基因能够在受体细胞内表达，并且可以遗传给下一代，是因为基因表达载体上含有________。

（3）iPS细胞在_________细胞上培养，可维持其自我更新能力并抑制其分化。

（4）iPS细胞和ES细胞分化能力相似，都具有_________性。但与ES细胞不同，iPS细胞的获得不需使用_________，而使用人的体细胞即可，因此不会引发_________问题。

（5）iPS细胞临床应用价值巨大，但2017年1月，日本科学家宣布因安全性问题，暂停提供临床治疗的iPS细胞。请从载体角度分析，产生安全性问题的原因是___________________________。

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逆转录病毒载体是一种表达型质粒，结构如图所示。图上的“逆转录病毒序列 ”可以整合到动物细胞的染色体上，不断地表达其携带的目的基因，获得大量重组逆转录病毒。（E、F、H分别为限制酶 E、F、H的酶切位点）。

（1）逆转录的模板是_____,原料是_____。

（2）在构建重组质粒时，目的基因插入该质粒，此过程需要的酶是限制酶____和____0

（3）将重组质粒转人大肠杆菌前用某种离子处理大肠杆菌使之成为_______才能完成转化过程。为了筛选出含重组质粒的大肠杆菌，一般需要用添加_____的培养基进行培养。

（4）获取大量重组质粒后,可培育转基因小鼠，将重组质粒导入小鼠受精卵的方法是_______。若目的基因进人细胞后插入在一条染色体DNA上，那么获得转基因纯合子小鼠的方法是______________。

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逆转录病毒载体是一种表达型质粒，结构如图所示。图上的“逆转录病毒序 ”可以整合到动物细胞的染色体上，不断地表达其携带的目的基因，获得大量重 组逆转录病赛。（E、F、H分别为限制酶 E、F、H的酶切位点）。

(1) 逆转录的模板是_____,原料是_____。

(2) 在构建重组质粒时，目的基因插入该质粒，此过程需要的酶是限制酶____和____。

(3) 将重组质粒转人大肠杆菌前用某种离子处理大肠杆菌使之成为_______才能完成转化过程。为了筛选出含重组质粒的大肠杆菌，一般需要用添加_______的培养基进行培养。

(4) 获取大量重组质粒后,可培育转基因小鼠，将重组质粒转入导人小鼠原核期受精卵的方法是_______。若目的基因进人细胞后插入在一条染色体DNA上，那么获得转基因纯合子小鼠的方法是______________。

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逆转录病毒载体是一种表达型质粒，结构如图所示。图上的“逆转录病毒序 ”可以整合到动物细胞的染色体上，不 断地表达其携带的目的基因，获得大量重 组逆转录病赛。（E、F、H分别为限制酶 E、F、H的酶切位点）。

(1) 逆转录的模板是_____,原料是_____。

(2) 在构建重组质粒时，目的基因插入该质粒，此过程需要的酶是限制酶____和____0

(3) 将重组质粒转人大肠杆菌前用某种离子处理大肠杆菌使之成为_______才能完成转化过程。为了筛选出含重组质粒的大肠杆菌，一般需要用添加_______的培养基进行培养。

(4) 获取大量重组质粒后,可培育转基因小鼠，将重组质粒转入导人小鼠原核期受精卵的方法是_______。若目的基因进人细胞后插入在一条染色体DNA上，那么获得转基因纯合子小鼠的方法是______________。

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2012年诺贝尔生理学或医学奖授予在诱导多功能干细胞领域做出突出贡献的两位科学家。科学家把4个关键基因通过逆转录病毒载体转入小鼠的成纤维细胞，使其变成多功能干细胞(IPS)。下列关于小鼠正常的成纤维细胞与诱导干细胞的叙述，正确的是(　 )

A．成纤维细胞和IPS细胞中的mRNA完全相同

B．诱导多功能干细胞过程中发生染色体数目变异

C．IPS细胞具有细胞周期，可能会发生基因突变

D．成纤维细胞在形成过程中丢失了某些基因

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2012年诺贝尔生理学或医学奖授予两位在细胞核重编程领域有重大贡献的科学家。科学家把cMyc等4个关键基因通过逆转录病毒载体转入小鼠的成纤维细胞,使其变成诱导多能干细胞——iPS细胞,这意味着未成熟的细胞能够发展成所有类型的细胞。请分析回答:

(1)若想增强载体病毒颗粒的感染性,可利用　　 技术改造病毒外壳蛋白,直接对　　 进行操作。

(2)应用　　 技术得到重组细胞,激活重组细胞发育成早期胚胎,使用从　　 中获得的胚胎干细胞,在培养基中根据需要加入相应的小分子物质以促进其　　 得到各种组织器官,用于治疗某些疾病,这种技术称为　　 。

(3)iPS细胞的获得不使用胚胎细胞或卵细胞,也不诱导发育成个体,因此不会像生殖性克隆一样引发　　 问题。

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2012年诺贝尔生理学或医学奖授予两位在细胞核重编程领域有重大贡献的科学家。科学家把c–Myc等4个关键基因通过逆转录病毒载体转入小鼠的成纤维细胞，使其变成诱导多能干细胞——iPS细胞，这意味着未成熟的细胞能够发展成所有类型的细胞。

（1）基因工程中经常使用的工具酶是___________、常用的载体除了动植物病毒外还有________和______。

（2）若想增强载体病毒颗粒的感染性，可利用__________技术改造病毒外壳蛋白，直接对__________进行操作。

（3）应用__________技术得到重组细胞，激活重组细胞发育成早期胚胎，使用从__________中获得的胚胎干细胞，在培养中根据需要加入相应的小分子物质以促进其__________得到各种组织器官，用于治疗某些疾病，这种技术称为____________________。

（4）iPS细胞的获得不使用胚胎细胞或卵细胞，也不诱导发育成个体，因此不会像生殖性克隆一样引发__________问题。

（5）iPS细胞在体外已成功地被诱导分化为神经元细胞、神经胶质细胞、心血管细胞和原始生殖细胞等，究其本质原因是基因____________________的结果。

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2012年诺贝尔生理学或医学奖授予两位在细胞核重编程领域有重大贡献的科学家。科学家把c—Myc等4个关键基因通过逆转录病毒载体转入小鼠的成纤维细胞，使其变成诱导多能干细胞——iPS细胞，这意味着未成熟的细胞能够发展成所有类型的细胞。

（1）基因工程中经常使用的工具酶是_____________，常用的载体除了动植物病毒外还有_____________和_____________。

（2）若想增强载体病毒颗粒的感染性，可利用_____________技术改造病毒外壳蛋白，直接对_____________进行操作。

（3）应用_____________技术得到重组细胞，激活重组细胞发育成早期胚胎，使用从_____________中获得的胚胎干细胞，在培养中根据需要加入相应的小分子物质以促进其_____________得到各种组织器官，用于治疗某些疾病，这种技术称为_____________。

（4）iPS细胞的获得不使用胚胎细胞或卵细胞，也不诱导发育成个体，因此不会像生殖性克隆一样引发_____________问题。

（5）iPS细胞在体外已成功地被诱导分化为神经元细胞、神经胶质细胞、心血管细胞和原始生殖细胞等，究其本质原因是基因_________________________的结果。

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基因瞬时表达技术是研究基因功能的重要手段之一，该技术利用瞬时表达载体将外源基因导入宿主细胞中，但不整合到宿主细胞的染色体DNA上，使目的基因在短时间内获得高水平表达或者沉默。下列相关叙述错误的是（　　 ）

A.基因表达过程中有A与U配对

B.基因瞬时表达载体的构建过程中有磷酸二酯键的断裂和合成

C.基因瞬时表达技术中外源基因较难稳定遗传

D.基因表达过程中需要DNA聚合酶和RNA聚合酶参与

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科学家将4个“关键基因”通过逆转录病毒转入小鼠的成纤维细胞，使其变成多能干细胞，并可分化为心脏细胞和神经细胞。下列有关叙述不正确的是

A．研究中运用的逆转录病毒属于基因运载体

B．导入的4个“关键基因”可能与基因表达调控有关

C．鼠成纤维细胞转变为多能干细胞是基因突变的结果

D．本研究可避免从人体胚胎中提取干细胞引起的伦理问题

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