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（14分）铁皮石斛是我国名贵中药，生物碱是其有效成分之一，应用组织培养技术培养铁皮石斛拟原球茎（简称PLBs，类似愈伤组织）生产生物碱的实验流程如下：
在固体培养基上，PLBs的重量、生物碱含量随增殖培养时间的变化如图所示，请回答下列问题：
（1）选用新生营养芽为外植体的原因是 ，诱导外植体形成PLBs的过程称_______。（每空1分）
（2）与黑暗条件下相比，PLBs在光照条件下生长的优势体现在________ ，_________，__________ 。
（3）脱落酸（ABA）能提高生物碱含量，但会抑制PLBs的生长。若采用液体培养，推测添加适量的ABA可提高生物碱产量。同学们拟开展探究实验验证该推测，在设计实验方案是探讨了以下问题：
①ABA的浓度梯度设置和添加方式：设4个ABA处理组，1个空白对照组，3次重复。因ABA受热易分解，故一定浓度的无菌ABA母液应在各组液体培养基 后按比例加入。
②实验进程和取样：实验50天完成，每10天取样，将样品（PLBs）称重（g/瓶）后再测定生物碱含量。如初始（第0天）数据已知，实验过程中还需测定的样品数为 。
③依所测定数据确定适宜的ABA浓度和培养时间：当某3个样品（重复样）的 时，其对应的ABA浓度为适宜浓度，对应的培养时间是适宜培养时间。
【答案】（1）细胞分化程度低，容易诱导形成PLBs 细胞的脱分化
（2）生长起始较快，快速生长时间较长，PLBs产量较高
（3）①灭菌、冷却 ②75 ③PLBs重量和生物碱含量乘积的平均值最大
【解析】
（1）根据流程图可知，选用新生营养芽为外植体可获得PLBs，说明新生营养芽细胞分化程度低，容易诱导形成PLBs；诱导外植体形成PLBs的过程称脱分化。
（2）分析曲线图可知，与黑暗条件下相比，PLBs在光照条件下生长的优势体现在生长起始较快、快速生长时间较长、PLBs产量较高等方面。
（3）①由于ABA受热易分解，故一定浓度的无菌ABA母液应在各组液体培养基灭菌、冷却后按比例加入。
②根据题意，实验50天完成，每10天取样，共取样5次；实验组和空白对照组一共有5组，每组每次均需要取样；为保证数据准确，每组在每次取样时要重复3次并取其平均数；所以如初始（第0天）数据已知，则实验过程中还需测定的样品数为5x5x3=75。
③依所测定数据确定适宜的ABA浓度和培养时间：当某3个样品（重复样）的PLBs重量和生物碱含量乘积的平均值最大时，其对应的ABA浓度为适宜浓度，对应的培养时间是适宜培养时间。
考点：本题考查植物组织培养及其实验分析，意在考查考生能理解所学知识的要点，把握知识间的内在联系，能运用所学知识与观点，通过比较、分析与综合等方法对某些生物学问题进行解释、推理，做出合理判断或得出正确结论的能力。
【题型】综合题
【适用】一般
【标题】2014-2015学年海南省文昌中学高二第二学期期末考试生物试卷（带解析）
【关键字标签】
【结束】
（10分）回答下列有关泡菜制作的习题：
（1）为了缩短制作泡菜时间，有人会在冷却后的盐水中加入少量陈泡菜液，加入陈泡菜液的目的是 。
（2）泡菜制作过程中，乳酸发酵过程即为乳酸菌进行 的过程。该过程发生在乳酸菌的 中。
（3）泡菜制作过程中影响亚硝酸盐含量的因素有 和 等。对亚硝酸盐的定量测定可以用_____法，因为亚硝酸盐与 的反应产物能与N1萘基乙二胺盐酸盐结合形成______色化合物。
（4）从开始制作到泡菜质量最佳这段时间内，泡菜液逐渐变酸，这段时间内泡菜坛中乳酸菌和其他杂菌的消长规律是 ，原因是 。
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铁皮石斛是一种名贵中药材，有生津养胃、降血糖和增强免疫力等作用，有效成分为石斛多糖、石斛碱等，温州雁荡山素有“中国铁皮石斛之乡”的美誉。请回答：
（1）用优良品种自然生长的茎快速繁殖铁皮石斛时，给茎消毒时无需使用的是________ (A.乙醇B.无菌水 C.甘露醇 D.次氯酸钠)。在细胞分裂素相对较多和生长素相对较少的培养基中培养茎的切段，待长出较多的__________，将其进行__________(处理）后再转入__________培养基中继续培养，直至长成幼苗。这种通过组织培养技术快速繁殖植物的方法，也称为__________。
（2）研究发现，铁皮石斛的生长发育与其体内的内生菌密切相关。为进一步研究内生菌作用, 需要大量内生菌进行相关实验。分离内生菌时最好采用_________ (A.G6玻璃砂漏斗过滤法 B.血细胞计数法 C.划线分离法 D.涂布分离法），再将纯化的内生菌转移到液体培养基中进行_____________。
（3）研究发现，200mg/L浓度的卡那毒素能有效抑制铁皮石斛细胞的增殖与分化。科学家欲利用卡那霉素，采用农杆菌转化法对现有铁皮石斛品种进行基因改良。在基因工程操作中,导入受体细胞的_________分子应同时带有目的基因和________基因，这样才能利用含有卡那霉素的培养基将成功导入目的基因的受体细胞筛选出来。
（4）鉴定铁皮石斛的品质，可通过苯酚-浓硫酸法测定石斛多糖的含量。其原理是：石斛多糖水解成单糖并脱水生成糖醛衍生物后，与苯酚缩合生产橙黄色化合物，在490mm处测定光密度值，以不同浓度的葡萄糖溶液为标准溶液建立标准曲线，便可知道样品的石斛多糖含量。这种方法类似于泡菜汁中_____________含量的测定，称之为_____________法。
（5）为高效提取石斛多糖，可在提取液中加入___________，以提高铁皮石斛的出汁率。
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科研人员将铁皮石斛的带芽茎段经植物组织培养得到原球茎，并探究6—BA与2，4—D诱导原球茎增殖的最适浓度组合，实验结果如下图。下列叙述正确的是
A. 6-BA和2，4-D对原球茎的增殖起调节作用
B. 实验结果表明2，4—D对原球茎增殖作用具有两重性
C. 实验结果表明6-BA和2，4-D协同使用的效果优于单独使用
D. 0.5mg•L-16-BA与0.8mg•L-12，4-D是促进原球茎增殖的最适浓度组合
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人参是一种名贵中药材，其有效成分主要是人参皂苷。利用细胞培养技术生产人参皂苷的大致流程(如下图)：
请据图回答下面的问题。
(1)配制诱导愈伤组织的固体培养基，分装后要进行________；接种前，要对人参根进行________。
(2)用于离体培养的根切块，叫做________。培养几天后发现少数培养基被污染，若是有颜色的绒毛状菌落，属于________污染；若是有光泽的黏液状菌落，属于________污染。
(3)用少量________酶处理愈伤组织，获取单细胞或小细胞团，在液体培养基中进行悬浮培养，可有效提高人参皂苷合成量。
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人参是一种名贵中药材，其有效成分主要是人参皂苷。利用细胞培养技术生产人参皂苷的大致流程如下：
（1）配制诱导愈伤组织的固体培养基，分装后要进行___________。接种前，要对人参根进行___________。
（2）用于离体培养的根切块，叫做___________。从人参切块转变为愈伤组织的过程称为______________。用少量___________酶处理愈伤组织，获取单细胞或小细胞团，在液体培养基中进行悬浮培养，可有效提高人参皂苷合成量。
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回答下列（一）（二）小题
（一）生物碱是玛卡（十字花科的一种植物）的有效成分之一。黑色玛卡被公认为效果最好的玛卡，产量极少，应用组织培养技术繁殖其幼苗的流程如下：
请回答：
（1）选用黑色玛卡营养芽进行组织培养时，需先将材料在___________的乙醇中浸泡10分钟，再用5%次氯酸钠溶液浸泡以达到___________的目的。
（2）将原球茎置于__________（A．LB培养基 B．MS培养基+NAA/6-BA=1：10 C．MS培养基+NAA/6-BA=10：1 D．MS培养基+NAA/6-BA=1：1)上可长成丛状苗。经过炼苗的幼苗移栽到实验室外前需要洗苗，目的是洗掉根部的琼脂，以免琼脂发霉引起烂根，洗苗时用________（自来水、无菌水）。
（3）由于玛卡在生长过程中需要吸收土壤中大量的有机养分，因而每耕种过一季的土地，必须休耕6到7年，否则难以生长出好的玛卡来，这属于农业生产上的 _____________技术。
（4）生物碱属于玛卡的_____________代谢产物，除了从植株中提取，也可以通过将含有原球茎的试管放在摇床上，通过________________培养分散成单细胞，然后培养特定细胞系实现工业化生产。
（二）浙江省部分村镇的农民率先建起了以沼气池为中心的生态工程。如图是某同学绘制的一个庭院生态工程示意图，分析并回答下列问题：
（1）农业主要包括_______________________，是人类食物生产系统的两大支柱。庭院生态工程____________（属于、不属于）农业生态工程。
（2）该生态系统中的生产者是________，构建这种以沼气池为中心的生态模式时所依据的最主要的生态学原理是________________________________。
（3）生态农业是一个在生态上能自我维持的农业生产系统，其特点是在保持和改善系统内的生态平衡、不对其周围环境造成大的影响的情况下，求得最大生产力和可持续发展。下列关于生态农业的叙述不正确的是________。
A．生态农业中食物链的各营养级之间的能量传递效率大大提高了
B．生态农业比传统农业的自我调节能力强
C．生态农业设计时需要考虑社会效益、经济效益和生态效益
D．生态农业属于人工生态系统，对病虫害一般采用生物防治的方法
（4）为检测该庭院生态系统不同区域以尿素为氮源的微生物数量，需要配制尿素固体培养基，尿素溶液需用______________过滤。有脲酶的细菌菌落周围会出现着色的环带，因为脲酶分解尿素产生氨气，使培养基中的__________指示剂变红。
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根据现代生物技术原理，为解决如下四个问题：①快速培养名贵花卉 ②筛选抗癌药物 ③提高农作物抗病能力 ④发挥雌性优良个体的繁殖潜力。依次可以应用的技术手段是
| 技术 | 组织培养 | 基因工程 | 胚胎工程 | 细胞培养 |
| A | ① | ② | ③ | ④ |
| B | ② | ① | ④ | ③ |
| C | ① | ③ | ④ | ② |
| D | ④ | ② | ③ | ① |
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根据现代生物技术原理，为解决如下四个问题：①快速培养名贵花卉 ②筛选抗癌药物 ③提高农作物的抗病能力 ④发挥雌性优良个体的繁殖潜力。依次可以应用的技术手段是（ ）
| 技术 | 组织培养 | 基因工程 | 胚胎工程 | 细胞培养 |
| A | ① | ② | ③ | ④ |
| B | ② | ① | ④ | ③ |
| C | ① | ③ | ④ | ② |
| D | ④ | ② | ③ | ① |
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某兴趣小组拟用植物组织培养技术繁殖一种名贵花卉，获得大量植株。下列有关叙述，错误的是
A. 消毒的原则是既杀死材料表面的微生物，又减少消毒剂对细胞的伤害
B. 其技术路线为：取材→消毒→愈伤组织培养→出芽→生根→移栽
C. 出芽是细胞再分化的结果，受基因选择性表达的调控
D. 为促进愈伤组织生根时，培养基应含6-BA等细胞分裂素类调节剂
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某兴趣小组拟用组织培养繁殖一种名贵花卉，其技术路线为“取材→消毒→愈伤组织培养→出芽→生根→移栽”。下列有关叙述，错误的是 （ ）
A．消毒的原则是在用消毒剂杀死材料表面微生物的同时，避免对植物细胞产生伤害
B．在愈伤组织培养中加入细胞融合的诱导剂，可获得染色体加倍的细胞
C．出芽是细胞再分化的的结果，受基因选择性表达的调控
D．生根时，培养基通常应含α-萘乙酸(NAA)等生长素类调节剂