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铁皮石斛是一种名贵中药材，有生津养胃、降血糖和增强免疫力等作用，有效成分为石斛多糖、石斛碱等，温州雁荡山素有“中国铁皮石斛之乡”的美誉。请回答：
（1）用优良品种自然生长的茎快速繁殖铁皮石斛时，给茎消毒时无需使用的是________ (A.乙醇B.无菌水 C.甘露醇 D.次氯酸钠)。在细胞分裂素相对较多和生长素相对较少的培养基中培养茎的切段，待长出较多的__________，将其进行__________(处理）后再转入__________培养基中继续培养，直至长成幼苗。这种通过组织培养技术快速繁殖植物的方法，也称为__________。
（2）研究发现，铁皮石斛的生长发育与其体内的内生菌密切相关。为进一步研究内生菌作用, 需要大量内生菌进行相关实验。分离内生菌时最好采用_________ (A.G6玻璃砂漏斗过滤法 B.血细胞计数法 C.划线分离法 D.涂布分离法），再将纯化的内生菌转移到液体培养基中进行_____________。
（3）研究发现，200mg/L浓度的卡那毒素能有效抑制铁皮石斛细胞的增殖与分化。科学家欲利用卡那霉素，采用农杆菌转化法对现有铁皮石斛品种进行基因改良。在基因工程操作中,导入受体细胞的_________分子应同时带有目的基因和________基因，这样才能利用含有卡那霉素的培养基将成功导入目的基因的受体细胞筛选出来。
（4）鉴定铁皮石斛的品质，可通过苯酚-浓硫酸法测定石斛多糖的含量。其原理是：石斛多糖水解成单糖并脱水生成糖醛衍生物后，与苯酚缩合生产橙黄色化合物，在490mm处测定光密度值，以不同浓度的葡萄糖溶液为标准溶液建立标准曲线，便可知道样品的石斛多糖含量。这种方法类似于泡菜汁中_____________含量的测定，称之为_____________法。
（5）为高效提取石斛多糖，可在提取液中加入___________，以提高铁皮石斛的出汁率。
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（14分）铁皮石斛是我国名贵中药，生物碱是其有效成分之一，应用组织培养技术培养铁皮石斛拟原球茎（简称PLBs，类似愈伤组织）生产生物碱的实验流程如下：
在固体培养基上，PLBs的重量、生物碱含量随增殖培养时间的变化如图所示，请回答下列问题：
（1）选用新生营养芽为外植体的原因是 ，诱导外植体形成PLBs的过程称_______。（每空1分）
（2）与黑暗条件下相比，PLBs在光照条件下生长的优势体现在________ ，_________，__________ 。
（3）脱落酸（ABA）能提高生物碱含量，但会抑制PLBs的生长。若采用液体培养，推测添加适量的ABA可提高生物碱产量。同学们拟开展探究实验验证该推测，在设计实验方案是探讨了以下问题：
①ABA的浓度梯度设置和添加方式：设4个ABA处理组，1个空白对照组，3次重复。因ABA受热易分解，故一定浓度的无菌ABA母液应在各组液体培养基 后按比例加入。
②实验进程和取样：实验50天完成，每10天取样，将样品（PLBs）称重（g/瓶）后再测定生物碱含量。如初始（第0天）数据已知，实验过程中还需测定的样品数为 。
③依所测定数据确定适宜的ABA浓度和培养时间：当某3个样品（重复样）的 时，其对应的ABA浓度为适宜浓度，对应的培养时间是适宜培养时间。
【答案】（1）细胞分化程度低，容易诱导形成PLBs 细胞的脱分化
（2）生长起始较快，快速生长时间较长，PLBs产量较高
（3）①灭菌、冷却 ②75 ③PLBs重量和生物碱含量乘积的平均值最大
【解析】
（1）根据流程图可知，选用新生营养芽为外植体可获得PLBs，说明新生营养芽细胞分化程度低，容易诱导形成PLBs；诱导外植体形成PLBs的过程称脱分化。
（2）分析曲线图可知，与黑暗条件下相比，PLBs在光照条件下生长的优势体现在生长起始较快、快速生长时间较长、PLBs产量较高等方面。
（3）①由于ABA受热易分解，故一定浓度的无菌ABA母液应在各组液体培养基灭菌、冷却后按比例加入。
②根据题意，实验50天完成，每10天取样，共取样5次；实验组和空白对照组一共有5组，每组每次均需要取样；为保证数据准确，每组在每次取样时要重复3次并取其平均数；所以如初始（第0天）数据已知，则实验过程中还需测定的样品数为5x5x3=75。
③依所测定数据确定适宜的ABA浓度和培养时间：当某3个样品（重复样）的PLBs重量和生物碱含量乘积的平均值最大时，其对应的ABA浓度为适宜浓度，对应的培养时间是适宜培养时间。
考点：本题考查植物组织培养及其实验分析，意在考查考生能理解所学知识的要点，把握知识间的内在联系，能运用所学知识与观点，通过比较、分析与综合等方法对某些生物学问题进行解释、推理，做出合理判断或得出正确结论的能力。
【题型】综合题
【适用】一般
【标题】2014-2015学年海南省文昌中学高二第二学期期末考试生物试卷（带解析）
【关键字标签】
【结束】（10分）回答下列有关泡菜制作的习题：
（1）为了缩短制作泡菜时间，有人会在冷却后的盐水中加入少量陈泡菜液，加入陈泡菜液的目的是 。
（2）泡菜制作过程中，乳酸发酵过程即为乳酸菌进行 的过程。该过程发生在乳酸菌的 中。
（3）泡菜制作过程中影响亚硝酸盐含量的因素有 和 等。对亚硝酸盐的定量测定可以用_____法，因为亚硝酸盐与 的反应产物能与N1萘基乙二胺盐酸盐结合形成______色化合物。
（4）从开始制作到泡菜质量最佳这段时间内，泡菜液逐渐变酸，这段时间内泡菜坛中乳酸菌和其他杂菌的消长规律是 ，原因是 。
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人参是一种名贵中药材，其有效成分主要是人参皂苷。下图是利用植物细胞工程生产人参皂苷的大致流程,有关叙述正确的是
A．该过程体现了细胞全能性 B．人参根切块可叫做外植体
C．人参根切块需要植物激素诱导产生愈伤组织 D．细胞分离是用了胰蛋白酶处理
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人参是一种名贵中药材，其有效成分主要是人参皂苷。利用细胞培养技术生产人参皂苷的大致流程(如下图)：
请据图回答下面的问题。
(1)配制诱导愈伤组织的固体培养基，分装后要进行________；接种前，要对人参根进行________。
(2)用于离体培养的根切块，叫做________。培养几天后发现少数培养基被污染，若是有颜色的绒毛状菌落，属于________污染；若是有光泽的黏液状菌落，属于________污染。
(3)用少量________酶处理愈伤组织，获取单细胞或小细胞团，在液体培养基中进行悬浮培养，可有效提高人参皂苷合成量。
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人参是一种名贵中药材，其有效成分主要是人参皂苷。下图是利用植物细胞工程生产人参皂苷的大致流程,有关叙述正确的是
A．该过程体现了细胞全能性
B．人参根切块可叫做外植体
C．人参根切块需要植物激素诱导产生愈伤组织
D．细胞分离是用了胰蛋白酶处理
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人参是一种名贵中药材，其有效成分主要是人参皂苷。利用细胞培养技术生产人参皂苷的大致流程如下：
（1）配制诱导愈伤组织的固体培养基，分装后要进行___________。接种前，要对人参根进行___________。
（2）用于离体培养的根切块，叫做___________。从人参切块转变为愈伤组织的过程称为______________。用少量___________酶处理愈伤组织，获取单细胞或小细胞团，在液体培养基中进行悬浮培养，可有效提高人参皂苷合成量。
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阿胶产于山东，已有两千多年应用历史，与人参、鹿茸一起被誉为“中药三宝”。阿胶的滋补作用主要体现为加快机体的新陈代谢，促进组织细胞再生和增强免疫力，下列说法正确的是（ ）
A．“中药三宝”具有滋补作用的原因是含有对人体有益的Zn、Fe、Ca等微量元素
B．驴皮细胞的脂肪含量较低，其主要储能物质是葡萄糖
C．食用驴皮熬成的阿胶能减少人体对糖类的摄入，因为阿胶中含有的多糖主要是纤维素
D．阿胶为人体提供的主要营养物质可能是必需氨基酸
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阿胶原产于山东，已有两千多年的应用历史，与人参、鹿茸一起被誉为“中药三宝”。阿胶的滋补作用主要体现为：加快机体的新陈代谢，促进组织细胞再生和增强免疫力，下列说法正确的是
A．“中药三宝”具有滋补作用的原因是含有对人体有益的Zn、Fe、Ca等微量元素
B．驴皮细胞的脂肪含量较低，其主要储能物质是葡萄糖
C．食用驴皮熬成的阿胶能减少人体对糖类的摄入，因为阿胶中含有的多糖主要是纤维素
D．阿胶为人体提供的主要营养物质可能是必需氨基酸
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用驴皮熬成的阿胶已有两千多年的应用历史，与人参、鹿茸一起被誉为“中药三宝”。其滋补作用体现为：加快新陈代谢，促进组织细胞再生和增强免疫力，下列说法正确的是
A. “中药三宝”具有滋补作用的原因是含有对人体有益的Zn、Fe、Ca等微量元素
B. 驴皮细胞的脂肪含量较低，其主要储能物质是葡萄糖
C. 食用阿胶能减少人体对糖类的摄入，因为阿胶中含有的多糖主要是纤维素
D. 用驴皮熬成的阿胶为人体提供的主要营养物质之一可能是必需氨基酸
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科研人员将铁皮石斛的带芽茎段经植物组织培养得到原球茎，并探究6—BA与2，4—D诱导原球茎增殖的最适浓度组合，实验结果如下图。下列叙述正确的是
A. 6-BA和2，4-D对原球茎的增殖起调节作用
B. 实验结果表明2，4—D对原球茎增殖作用具有两重性
C. 实验结果表明6-BA和2，4-D协同使用的效果优于单独使用
D. 0.5mg•L-16-BA与0.8mg•L-12，4-D是促进原球茎增殖的最适浓度组合
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