胰岛素是治疗糖尿病的特效药，以往主要从猪、牛等家畜的胰腺中提取，用这种方法生成的胰岛素产量低，价格昂贵。下图是用基因工程生成胰岛素的过程，回答下列问题：
(l)②过程所示的生物工程技术是____，该过程通常用去核的卵细胞，是因为____。
(2)③通常用的是囊胚期的内团细胞，因为它具有的特性是____，可以定向诱导分化为各种细胞、组织、器官，所以常用作外源基因的____。
(3)图示获得目的基因的方法是____，除此之外，还可以采取____。
(4)用基因工程生产胰岛素与从猪、牛等家畜中提取胰岛素相比，具有的优点有：____（答出两点即可）。
高三生物非选择题困难题
胰岛素是治疗糖尿病的特效药，以往主要从猪、牛等家畜的胰腺中提取，用这种方法生成的胰岛素产量低，价格昂贵。下图是用基因工程生成胰岛素的过程，回答下列问题：
(l)②过程所示的生物工程技术是____，该过程通常用去核的卵细胞，是因为____。
(2)③通常用的是囊胚期的内团细胞，因为它具有的特性是____，可以定向诱导分化为各种细胞、组织、器官，所以常用作外源基因的____。
(3)图示获得目的基因的方法是____，除此之外，还可以采取____。
(4)用基因工程生产胰岛素与从猪、牛等家畜中提取胰岛素相比，具有的优点有：____（答出两点即可）。
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（13分）（1）.用来治疗糖尿病的胰岛素，过去主要靠从动物体器官、组织中提取，但因受原料限制，无法推广。现在，可以用发酵工程的方法来生产胰岛素。若用大肠杆菌发酵来生产胰岛素，并结合基因工程，下图是利用基因工程技术生产人胰岛素的操作过程示意图，请据图作答。
①能否利用人的皮肤细胞来完成①过程？________，为什么？________
。
②过程②必需的酶是________酶，过程③必需的酶是________酶。
③若A中共有a个碱基对，其中鸟嘌呤有b个，则③④⑤过程连续进行4次，至少需要提供胸腺嘧啶________个。
④在利用AB获得C的过程中，必须用________切割A和B，使它们产生________，再加入 ________，才可形成C。
⑤为使过程⑧更易进行，可用________（试剂）处理D。以增大的通透性，让重组DNA进人大肠杆菌体内。
(2)从概念上分析，这种基因重组与孟德尔基因自由组合所产生的基因重组有何不同?
________
________(至少两个方面)。
（3）有人提出“吃基因补基因”，你是否赞成这种观点，试从新陈代谢的角度简要说明理由：________
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（14分）胰岛B细胞移植是一种有效治疗糖尿病的方法。利用小鼠再生胰腺提取物（RPE)可定向诱导人羊膜间充质干细胞（hAMSCs)分化成胰岛B细胞。请回答下列问题：
（1)取人羊膜组织刮除血块、上皮细胞，冲洗后剪碎，然后用 酶处理，最终制成hAMSCs悬液。将细胞悬液放人培养瓶中进行原代培养，当细胞贴壁生长到一定阶段时，出现 现象，此时细胞停止分裂增殖，这时需要将细胞进行相关处理，然后进行传代培养。
（2）取传至第3代的hAMSCs放入细胞培养板，同时加入RPE进行诱导分化培养。该代hAMSCs能保持细正常的 。诱导分化培养15天后，提取细胞的 ，用胰岛素基因探针进行分子杂交，可初步检测hAMSCs是否分化成胰岛B细胞。
（3）用人的杂交瘤细胞来生产人源单克隆抗体难以成功，因此单克隆抗体大都来自鼠源。但鼠源单抗在人体内使用时，会产生较强的免疫原性，为解决这一问题，发明了嵌合抗体。大致过程如下图所示：
嵌合抗体能降低鼠源抗体的免疫原性，从上图中可以推测，免疫原性的产生主要与抗体的 （选填“v区 "、“c区 "）有关。嵌合抗体的生产属于 工程范畴。
（4）科学家们用细胞融合实验证明，分化的细胞中存在“闲置不用 " 的结构基因。他们把大鼠肝肿瘤细胞和小鼠成纤维细胞融合成杂交瘤细胞，筛选出含有两套肝细胞染色体和一套成纤维细胞染色体的细胞。这些细胞既保持了合成大鼠肝细胞 3种特异蛋白的能力，也合成了小鼠肝细胞这3种蛋白，但是在正常的小鼠成纤维细胞中从不合成这些。由此可见，融合实验证明了小鼠成纤维细胞 。
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胰岛B细胞移植是一种有效治疗糖尿病的方法。利用小鼠再生胰腺提取物（RPE）可定向诱导人
羊膜间充质干细胞（hAMSCs）分化成胰岛B细胞。回答问题：
（1）取人羊膜组织刮除血块的上皮细胞，冲洗后剪碎，然后用 处理，最终制
成hAMSCs悬液，将细胞悬液放入培养瓶中进行原代培养，当细胞帖壁生长到一定阶段时，出现
现象，此时细胞停止分裂增殖，这时需要将细胞进行相关处理，然后进行传代培养。
取传至第3带的hAMSCs放入细胞培养板，同时加入RPE进行诱导分化培养。该代hAMSCs能
（2）保持细胞正常的 。诱导分化培养15天后，提取细胞 ，用胰岛素基因探针进行分子杂交，可初步检测hAMSCs是否分化成胰岛B细胞。
（3）hAMSCs细胞在RPE作用下，可以定向分化形成具有正常胰岛B细胞功能的细胞，其根本原因
是 。培养hAMSCs细胞的培养液中营养成分包括 （至少写两种）
人体器官移植面临的主要问题有供体器官短缺和免疫排斥，目前临床通过使用 抑制T
细胞的增殖来提高器官移植的成活率。
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（14分）干扰素是治疗癌症的重要药物，过去它必须从血中提取，每升人血只能提取0．5
g，所以价格昂贵。现在美国某基因公司用如下图的方式生产干扰素。试分析原理和优点。
（1）获取人干扰素基因的常用方法有从________或________中获取、PCR扩增、DNA合成仪合成，此基因在基因工程中称为________。
（2）此基因与质粒相结合要依靠，其作用部位都是磷酸二酯键，然后将重组DNA转移到酵母菌体内，受体细胞选择酵母菌而不是大肠杆菌的优势是________。
（3）科学家在培养转基因植物时，常用________中的________质粒做载体。质粒是基因工程最常用的载体，它具备的特点包括：①具有一个或多个________，使外源基因能插入其中；②携带外源基因的质粒进入细胞后，在细胞中 进行________或________，随________；③质粒上有标记基因，便于对重组DNA的鉴定和筛选。
（4）质粒与干扰素基因能够拼接形成重组DNA的原因是________。人的干扰素基因在酵母菌体内成功表达，说明了________。
（5）参与酵母菌中人干扰素合成加工分泌的细胞器包括：________。
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干扰素是治疗癌症的重要物质，人血液中每升只能提取0．05 mg干扰素，因而其价格昂贵，平民百姓用不起。但美国有一家公司用遗传工程方法合成了价格低廉、药性一样的干扰素，其具体做法是：
（1）从人的淋巴细胞中提取能指导干扰素合成的________，并使之与一种叫质粒的DNA结合，然后移植到酵母菌内，从而让酵母素来________________________。
（2）酵母菌能用________方式繁殖，速度很快，所以能在较短的时间内大量生产________。利用这种方法不仅产量高，并且成本较低。
（3）科学家陈炬在这方向也作出了突出贡献，他成功地把人的干扰素基因嫁接到了烟草的DNA分子上，其物质基础和结构基础是________________________________。
（4）烟草具有了抗病毒能力，这表明烟草体内产生了________，由此可见，烟草和人体合成蛋白质的方式是________，从进化的角度来考虑，证明了人和植物的起源________。
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干扰素是治疗癌症的重要物质，人血液中每升只能提取0.05mg干扰素，因而其价格昂贵，平民百姓用不起。但美国有一家公司用遗传工程方法合成了价格低廉、药性一样的干扰素，其具体做法是：
(1)从人的淋巴细胞中提取能指导干扰素合成的_______，并使之与一种叫质粒的DNA结合，然后移植到酵母菌内，从而让酵母素来_______________。
(2)酵母菌能用__________方式繁殖，速度很快，所以能在较短的时间内大量生产_______。利用这种方法不仅产量高，并且成本较低。
(3)科学家陈炬在这方向也作出了突出贡献，他成功地把人的干扰素基因嫁接到了烟草的DNA分子上，其物质基础____________和结构基础是___________________。
(4)烟草具有了抗病毒能力，这表明烟草体内产生了_________，由此可见，烟草和人体合成蛋白质的方式是_____________，从进化的角度来考虑，证明了人和植物的起源______________。
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糖尿病已经成为危害人类健康的严重疾病之一，注射胰岛素是目前治疗糖尿病最为有效的途径和手段，如何生产优质而不昂贵的人胰岛素，是当下医疗界和制药界急需攻克的科学难题。如图为利用基因工程技术生产人胰岛素的操作过程示意图，请回答：
（1）在基因表达载体中，________的作用是RNA聚合酶识别和结合的部位，并驱动基因转录出mRNA。
（2）图中细胞1是________细胞。过程②必需的酶是_______。过程③④⑤为_______技术扩增目的基因，此过程必需的酶是________。过程③断开的化学键名称为________，在体外进行PCR操作时，实现该过程的处理方法是___________。能否利用人的皮肤细胞来完成过程①，为什么_______________________________________________。
（3）图中B的基本组成单位有____种；为便于重组DNA的鉴定和选择，图中C的组成必须有__________；将体外重组DNA导入大肠杆菌体内，并使其在细胞内维持稳定和表达的过程称为转化。为使过程⑧更易进行，可用_______处理大肠杆菌，目的是使大肠杆菌细胞处于能够吸收周围环境中DNA分子的生理状态（或使大肠杆菌处于感受态细胞状态）。由于重组DNA分子成功导入受体细胞的频率低，所以在转化后通常需要进行________操作。
（4）若过程⑨发生了变异，则此变异为__________。过程⑩得到的人胰岛素需要体外加工才具有生物活性，原因是大肠杆菌_______________________________________。
（5）目的基因在受体细胞中是否能转录出mRNA，可用_________技术来检测。
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糖尿病已经成为危害人类健康的严重疾病之一，注射胰岛素是目前治疗糖尿病最为有效的途径和手段，如何生产优质而不昂贵的人胰岛素，是当下医疗界和制药界急需攻克的科学难题。如图为利用基因工程技术生产人胰岛素的操作过程示意图，请回答：
（1）在基因表达载体中，____的作用是RNA聚合酶识别和结合的部位，并驱动基因转录出mRNA。
（2）图中细胞1是____细胞。过程②必需的酶是____。过程③④⑤为____技术扩增目的基因，此过程必需的酶是________。过程③断开的化学键名称为____，在体外进行PCR操作时，实现该过程的处理方法是____。能否利用人的皮肤细胞来完成过程①为什么？___________________。
（3）图中B的基本组成单位有____种；为便于重组DNA的鉴定和选择，图中C的组成必须有____；将体外重组DNA导入大肠杆菌体内，并使其在细胞内维持稳定和表达的过程称为转化。为使过程⑧更易进行，可用____处理大肠杆菌，目的是使大肠杆菌细胞处于能够吸收周围环境中DNA分子的生理状态（或使大肠杆菌处于感受态细胞状态）。由于重组DNA分子成功导入受体细胞的频率低，所以在转化后通常需要进行____操作。
（4）若过程⑨发生了变异，则此变异为____。过程⑩得到的人胰岛素需要体外加工才具有生物活性，原因是大肠杆菌___________________。
（5）目的基因在受体细胞中是否能转录出mRNA，可用____技术来检测。
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糖尿病已经成为危害人类健康的严重疾病之一，注射胰岛素是目前治疗糖尿病最为有效的途径和手段，如何生产优质而不昂贵的人胰岛素，是当下医疗界和制药界急需攻克的科学难题。如图为利用基因工程技术生产人胰岛素的操作过程示意图，请回答：
（1）在基因表达载体中，____的作用是RNA聚合酶识别和结合的部位，并驱动基因转录出mRNA。
（2）图中细胞1是____细胞。过程②必需的酶是____。过程③④⑤为____技术扩增目的基因，此过程必需的酶是________。过程③断开的化学键名称为____，在体外进行PCR操作时，实现该过程的处理方法是____。能否利用人的皮肤细胞来完成过程①为什么？___________________。
（3）图中B的基本组成单位有____种；为便于重组DNA的鉴定和选择，图中C的组成必须有____；将体外重组DNA导入大肠杆菌体内，并使其在细胞内维持稳定和表达的过程称为转化。为使过程⑧更易进行，可用____处理大肠杆菌，目的是使大肠杆菌细胞处于能够吸收周围环境中DNA分子的生理状态（或使大肠杆菌处于感受态细胞状态）。由于重组DNA分子成功导入受体细胞的频率低，所以在转化后通常需要进行____操作。
（4）若过程⑨发生了变异，则此变异为____。过程⑩得到的人胰岛素需要体外加工才具有生物活性，原因是大肠杆菌___________________。
（5）目的基因在受体细胞中是否能转录出mRNA，可用____技术来检测。
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