天然大肠杆菌质粒一般含有lacZ基因而不含氨苄青霉素抗性基因;人工合成的大肠杆菌puc118质粒中含有lacZ基因外,还含有含氨苄青霉素抗性基因。若lacZ基因完整,便可表达出α-半乳糖苷酶,α-半乳糖苷酶能将培养基中含有的IPTG和X-gal水解成蓝色,形成蓝色菌落圈;若lacZ基因中插入了外源基因,带有puc118质粒的大肠杆菌便不能表达α-半乳糖苷酶,将形成白色菌落。此实验方法可以用于鉴别转基因实验是否获得成功。
(1)目的基因是_____________________________。
(2)过程③④需要________________________酶。
(3)图中的培养基中除含有大肠杆菌必需营养成分外,还应加入____________________等物质,用以筛选导入了重组质粒的受体大肠杆菌。
(4)检测受体大肠杆菌是否导入重组质粒。培养一段时间后出现三种类型:菌落处有蓝色、菌落处有白色、菌落不能生长。成功导入重组质粒的菌落圈的表现是______________。
有些菌落在该培养基中不能生长,原因是_____________________________________。
高二生物非选择题中等难度题
天然大肠杆菌质粒一般含有lacZ基因而不含氨苄青霉素抗性基因;人工合成的大肠杆菌puc118质粒中含有lacZ基因外,还含有含氨苄青霉素抗性基因。若lacZ基因完整,便可表达出α-半乳糖苷酶,α-半乳糖苷酶能将培养基中含有的IPTG和X-gal水解成蓝色,形成蓝色菌落圈;若lacZ基因中插入了外源基因,带有puc118质粒的大肠杆菌便不能表达α-半乳糖苷酶,将形成白色菌落。此实验方法可以用于鉴别转基因实验是否获得成功。
(1)目的基因是_____________________________。
(2)过程③④需要________________________酶。
(3)图中的培养基中除含有大肠杆菌必需营养成分外,还应加入____________________等物质,用以筛选导入了重组质粒的受体大肠杆菌。
(4)检测受体大肠杆菌是否导入重组质粒。培养一段时间后出现三种类型:菌落处有蓝色、菌落处有白色、菌落不能生长。成功导入重组质粒的菌落圈的表现是______________。
有些菌落在该培养基中不能生长,原因是_____________________________________。
高二生物非选择题中等难度题查看答案及解析
大肠杆菌pUC118质粒具有氨苄青霉素抗性基因,某限制酶唯一切点位于该质粒的lacZ 基因中。在特定的选择培养基中,若lacZ基因没有被破坏,则大肠杆菌菌落呈蓝色;若lacZ 基因被破坏,则菌落呈白色。如图表示转基因操作过程,下列说法正确的是
A. 作为受体大肠杆菌应不含氨苄青霉素抗性基因,以便于筛选
B. 若大肠杆菌的菌落为蓝色,则质粒未导入大肠杆菌
C. 选择培养基中除必需的营养物质外,还应加入适量氨苄青霉素
D. 应选择白色菌落的大肠杆菌进行扩大培养
高二生物多选题困难题查看答案及解析
大肠杆菌pUC118质粒具有氨苄青霉素抗性基因,某限制酶唯一切点位于该质粒的lacZ基因中。在特定的选择培养基中,若lacZ基因没有被破坏,则大肠杆菌菌落呈蓝色;若lacZ基因被破坏,则菌落呈白色。如图表示转基因操作过程,下列说法错误的是
A. 作为受体大肠杆菌应不含氨苄青霉素抗性基因,以便于筛选
B. 若大肠杆菌的菌落为蓝色,则质粒未导入大肠杆菌
C. 选择培养基中除必需的营养物质外,还应加入适量氨苄青霉素
D. 应选择白色菌落的大肠杆菌进行扩大培养
高二生物单选题中等难度题查看答案及解析
大肠杆菌pUC118质粒具有氨苄青霉素抗性基因,某限制酶唯一切点位于该质粒的lacZ基因中。在特定的选择培养基中,若lacZ基因没有被破坏,则大肠杆菌菌落呈蓝色;若lacZ基因被破坏,则菌落呈白色。如图表示转基因操作过程,下列说法错误的是
A. 作为受体大肠杆菌应不含氨苄青霉素抗性基因,以便于筛选
B. 若大肠杆菌的菌落为蓝色,则质粒未导入大肠杆菌
C. 选择培养基中除必需的营养物质外,还应加入适量氨苄青霉素
D. 应选择白色菌落的大肠杆菌进行扩大培养
高二生物单选题中等难度题查看答案及解析
大肠杆菌pUC118质粒具有氨苄青霉素抗性基因,某限制酶唯一切点位于该质粒的lacZ基因中。在特定的选择培养基中,若lacZ基因没有被破坏,则大肠杆菌菌落呈蓝色;若lacZ基因被破坏,则菌落呈白色。如图表示转基因操作过程,下列说法错误的是
A. 作为受体大肠杆菌应不含氨苄青霉素抗性基因,以便于筛选
B. 若大肠杆菌的菌落为蓝色,则质粒未导入大肠杆菌
C. 选择培养基中除必需的营养物质外,还应加入适量氨苄青霉素
D. 应选择白色菌落的大肠杆菌进行扩大培养
高二生物单选题中等难度题查看答案及解析
大肠杆菌pUC118质粒具有氨苄青霉素抗性基因,某限制性核酸内切酶唯一切点位于该质粒的lacZ基因中。在特定的选择培养基中,若lacZ基因没有被破坏,则大肠杆菌菌落呈蓝色;若lacZ基因被破坏,则菌落呈白色。关于图操作的说法错误的是( )
A. 作为受体大肠杆菌应不含氨苄青霉素抗性基因,以便于筛选
B. 若大肠杆菌的菌落为蓝色,则质粒未导入大肠杆菌
C. 培养基中除必需的营养物质外,还应加入适量氨苄青霉素
D. 应选择白色菌落的大肠杆菌进行扩大培养
高二生物单选题简单题查看答案及解析
大肠杆菌PUC19质粒如下图所示。LacZ基因是PUC19质粒上重要的标记基因,其表达产物能水解x-gal,进而使大肠杆菌菌落呈蓝色。用EcoRI构建重组质粒,导入受体菌(不含LacZ基因和氨苄青霉素抗性基因)并进行检测。下列叙述错误的是
A. 检测前用稀释涂布平板法接种受体菌
B. 培养基中应含有氨苄青霉素和X-gal
C. 挑取菌落的接种环在操作前后都应该灼烧灭菌
D. 应挑取培养基表面的蓝色菌落进行扩大培养
高二生物单选题困难题查看答案及解析
大肠杆菌PUC19质粒如下图所示。LacZ基因是PUC19质粒上重要的标记基因,其表达产物能水解x-gal,进而使大肠杆菌菌落呈蓝色。用EcoRI构建重组质粒,导入受体菌(不含LacZ基因和氨苄青霉素抗性基因)并进行检测。下列叙述错误的是
A. 检测前用稀释涂布平板法接种受体菌
B. 培养基中应含有氨苄青霉素和X-gal
C. 挑取菌落的接种环在操作前后都应该灼烧灭菌
D. 应挑取培养基表面的蓝色菌落进行扩大培养
高二生物单选题困难题查看答案及解析
质粒PUC19上有氨苄青霉素抗性基因和牙半乳糖苷酶基因(LacZ基因)。细胞中有β—半乳糖苷酶时能利用乳糖,产生的有机酸使指示剂变红,形成红色菌落;没有β—半乳糖苷酶时只能利用其他碳源,在培养基上形成白色菌落。下图为含目的基因的DNA片段,LacZ基因中有EcoRⅠ、SacⅠ和XbaⅠ三种限制酶的切点,回答下列问题:
(1)用EcoRⅠ切割目的基因和质粒PUC19后,将多个含有目的基因的DNA片段和切割后的质粒用DNA连接酶连接后,能形成___________种产物。为了防止质粒和目的基因的自身环化,应选择限制酶___________切割质粒和含目的基因的DNA片段。
(2)为了筛选成功导入重组DNA分子的受体菌,应首先将受体菌置于含有___________(抗生素)的培养基上进行初步筛选,然后将存活的受体菌转入含有___________和其它有机碳源的培养基上培养,菌落颜色为___________的即为成功导入重组DNA分子的细菌。
(3)大肠杆菌作为受体细胞,导入重组DNA分子前要用一定浓度的CaCl2溶液处理,其目的是_________。
高二生物综合题中等难度题查看答案及解析
如图1表示某质粒,该质粒含有抗氨苄青霉素抗性基因(amp')和LacZ基因,LacZ基因能合成β-半乳糖苷酶,该酶能将白色底物X-Gal转化为蓝色产物,图2表示含目的基因的DNA片段,实验小组利用该质粒为载体将目的基因导入大肠杆菌,并筛选成功导入重组质粒的受体细胞(ScaⅠ、ApaⅠ、EcoRⅠ表示限制酶切割位点)。请回答下列问题:
(1)构建基因表达载体的目的是_________。在构建基因表达载体时应选用的限制酶是__________。
(2)将重组质粒导入大肠杆菌时,应用__________处理大肠杆菌,制备感受态细胞,实验室选用微生物作为受体细胞的优点是_________。
(3)重组质粒导入大肠杆菌后,应将大肠杆菌置于以X-Gal为底物,并添加_______________的培养基上培养,挑选出__________(填“白色”或“蓝色”)菌落。
(4)检测目的基因是否成功导入受体细胞常用的方法是__________,该方法依据的原理是__________。
高二生物综合题中等难度题查看答案及解析