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乙肝表面抗原是乙肝病毒的蛋白质外壳，该蛋白质由乙肝病毒的乙肝表面抗原基因控制合成。利用乙肝表面抗原可以制成乙肝疫苗。科学家将乙肝表面抗原基因(SSI)导人双子叶植物马铃薯细胞中，成功获得了乙肝表面抗原，为乙肝疫苗的制备提供了新的途径。回答下列问题：
(l)在获得SSI基因后，若需要增加其数量，可以采用___ 技术进行扩增，该技术的前提是有____以便合成引物；该操作过程中需要将反应体系加热至90～95℃，其作用是____。
(2)将SSI基因导人马铃薯细胞之前，需要构建基因表达载体，该结构上启动子的作用是 _________。构建基因表达载体时，一般是将SSI基因插入到农杆菌的___上。
(3)通过筛选可以获得成功导人SSI基因的马铃薯细胞，然后利用____技术对该细胞进行培养可以获得转基因马铃薯植株；可以通过抗原一抗体杂交技术进行检测，若出现____，则说明该植株已产生乙肝表面抗原。
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乙型肝炎病毒简称乙肝病毒，是一种DNA病毒。中国的乙肝病毒感染率约60%-70%；乙肝表面抗原携带率约占总人口的7.18%。科学家利用基因工程的方法将乙肝病毒的表面抗原H基因转入某植物叶肉细胞中，从而获得了能产生乙肝疫苗的植株。
（1）通过基因工程技术实现的基因交流通常在___________（填“种间”或“种内”）进行，这是一种基于___________（填“细胞水平”或“分子水平”或“个体水平”）的技术。
（2）质粒能作为基因工程中的基因转移载体，是因为它具有___________的特点（答两点）。
（3）DNA分子经限制酶切割可以产生黏性末端或平末端，___________（填酶的名称）只能将双链DNA片段互补的黏性末端之间连接起来，而不能连接平末端。将H基因导入叶肉细胞最常用的方法是________，该方法可以使目的基因插入到细胞中___________的DNA上。
（4）用该转基因植物叶片饲喂家兔，如果在家兔血清中检测到___________，说明转基因植物疫苗可以口服。
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应用基因工程方法，可将酵母菌制成“工程菌”，用于生产乙肝疫苗，在制造该“工程菌”时，应向酵母菌导入下列中的 （ ）
A．乙肝病毒的表面抗原 B．抗乙肝病毒抗体的基因
C．抗乙肝病毒的抗体 D．乙肝病毒表面抗原的基因
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已知新冠病毒为RNA病毒，该病毒表面蛋白A为主要抗原，由病毒的A基因控制合成。现利用单克隆抗体的制备技术来生产预防和诊断新冠病毒的疫苗和抗体。回答下列问题：
（1）新冠病毒合成蛋白A的场所是____。基因工程技术构建的A基因表达载体中启动子能被受体细胞中的____所识别，进而催化A基因的转录。
（2）将制备的A蛋白重复注射到小鼠皮下细胞，目的是获得更多的____细胞。然后将该种细胞与体外培养的小鼠骨髓瘤细胞按一定比例加入试管中，再加入 ___诱导细胞融合。细胞融合后，融合体系中除了含有未融合的细胞和杂交瘤细胞外，还可能含有___。
（3）经细胞融合获得的杂种细胞，还需进行____，才能得到所需的杂交瘤细胞。在将杂交瘤细胞进行扩大培养之前，还需要进行 ___。
（4）在杂交瘤细胞体外培养过程中，通常采用培养皿或松盖培养瓶，将其置于含95%空气与5%二氧化碳的混合气体培养箱中进行培养，从氧气和二氧化碳的作用角度分析，这样做的目的是___。
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将乙肝病毒表面抗原基因导入草莓细胞中，由此可获得用来预防乙肝的一种新型疫苗，为预防乙肝开辟了一条新途径。请回答下列问题：
（1）获得乙肝病毒表面抗原基因后，常利用______技术进行扩增。构建的基因表达载体要有________，以便筛选出含有目的基因的受体细胞。把基因转人农杆菌内时常用________处理农杆菌。
（2）使用农杆菌将乙肝病毒表面抗原基因导入草莓细胞中后，还需要采用__________技术培育成植株。培育过程中器官发生和形态建成，主要通过平衡的_________进行调控。从变异角度看，转基因育种的原理是_______________。
（3）在分子水平上，可采用____________的方法来检测转基因草莓果实提取液中有无相应的抗原。
（4）假定抗虫基因插入宿主染色体的部位是随机的。且整合到染色体上的抗虫基因均正常表达。对这些转基因草莓进一步研究发现，其中一些植株体细胞中含两个抗虫基因。让这些转基因草莓植株自交，发现大约有1/16的子代果实中未提取到相应的抗原，可能的原因是______________________________。
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将乙肝病毒表面抗原基因导入草莓细胞中,由此可获得用来预防乙肝的一种新型疫苗,为预防乙肝开辟了一条新途径。请问答下列问题:
（1）获得乙肝病毒表面抗原基因后,常利用__________技术进行扩增。把基因转入农杆菌内时常用__________处理农杆菌,使之成为感受态细胞。
（2）使用农杆菌将乙肝病毒表面抗原基因导入草莓细胞中,农杆菌中的Ti质粒上的T—DNA可将乙肝病毒表面抗原基因转移至草莓细胞中的__________上。目的基因进入草莓细胞内并在草莓细胞内维持稳定和表达,这个过程称为__________。
（3）在基因工程操作过程中,需要用__________酶和__________酶构建基因表达载体,基因表达载体要有__________,以便筛选出含有目的基因的受体细胞。
（4）在分子水平上,可采用__________的方法来检测转基因草莓果实提取液中有无相应的抗原。
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下面是将乙肝病毒控制合成病毒表面主蛋白的基因HBsAg导入巴斯徳毕赤酵母菌生产乙肝疫苗的过程及有关资枓：
资料1：巴斯德毕赤酵母菌可用培养基中甲醇作为其生活的唯一碳源，此时AOX1基因受到诱导而表达（5′AOX1和3′AOXl（TT）分别是基因AOX1的启动子和终止子）。
资料2：巴斯德毕赤酵母菌体内无天然质粒，所以改造出了图1所示的pPIC9K质粒用作载体，其与目的基因形成的重组质粒经酶切后可以与酵母菌染色体发生同源重组，将目的基因整合于染色体中已实现表达。
资料3:限制酶酶切位点
（1）如果要将HBsAg基因和pPIC9K质粒重组，应在图2中HBsAg基因两侧的A和B位置接上_______限制酶识别序列，这样可避免质粒和目的基因自身环化。
（2）用DNA连接酶将切割后的HBsAg基因和pPIC9K质粒连接成重组质粒，导入大肠杆菌体内，目的是_________________________________。
（3）为确认巴斯德毕赤酵母茵转化是否成功，在培养基中应该加入卡拉霉素以便筛选，转化后的细胞中是否含有HBsAg基因，可以用___________方法进行检测。
（4）转化的酵母菌在培养基上培养一段时间后，需要向其中加入___________以维持其生活，同时诱导HBsAg基因表达。
（5）与大肠杆菌等细菌相比，用巴斯德毕赤酵母菌细胞作为基因工程的受体细胞，其优点是在蛋白质合成后，细胞可以对其进行___________并分泌到细胞外，便于提取。
（6）下图为HBsAg某DNA片段一条链的碱基排列顺序。其中图1的碱基排列顺序已经解读，其顺序是:GGTTATGCGT，请解读图2显示的碱基排列顺序：______________________。
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将乙肝病毒表面抗原基因导入草莓细胞中，由此可获得用来预防乙肝的一种新型疫苗，为预防乙肝开辟了一条新途径。请问答下列问题：
（1）获得乙肝病毒表面抗原基因后，常利用_________________技术进行扩增。把基因转入农杆菌内时常用_________________处理农杆菌，使之成为感受态细胞。
（2）使用农杆菌将乙肝病毒表面抗原基因导入草莓细胞中，农杆菌中的Ti质粒上的T—DNA可将乙肝病毒表面抗原基因转移至草莓细胞中的_________________上。目的基因进入草莓细胞内并在草莓细胞内维持稳定和表达，这个过程称为_________________。
（3）在基因工程操作过程中，需要用_________________酶和_________________酶构建基因表达载体，基因表达载体要有_________________，以便筛选出含有目的基因的受体细胞。
（4）在分子水平上，可采用_______________的方法来检测转基因草莓果实提取液中有无相应的抗原。
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下面是将乙肝病毒控制合成的病毒表面主蛋白的基因HBsAg导入巴斯德毕赤酵母菌生产乙肝疫苗的过程及有关资料，请分析回答下列问题。
资料1：巴斯德毕赤酵母菌可用培养基中甲醇作为其生活的唯一碳源，同时AOX1基因（醇氧化酶基因）受到诱导而表达，5'AOX1和3'AOXl（TT）是基因AOX1的启动子和终止子，此启动子也能使外源基因高效表达。
资料2：巴斯德毕赤酵母菌体内无天然质粒，下图为科学家改造的pPIC9K质粒，其与目的基因形成的重组质粒在特定部位酶切后形成的重组DNA片段可以整合到酵母菌染色体上，最终实现目的基因的表达。
（1）如果要将HBsAg基因和pPIC9K质粒重组，应该在HBsAg基因两侧的A和B位置接上_________限制酶识别序列（SnaB I、Avr II、SacI、Bgl II四种限制酶的识别序列均不相同），这样设计的优点是避免质粒和目的基因自身环化。
（2）酶切获取HBsA9基因后，需用______________将其连接到pPIC9K质粒上，形成重组质粒，根据步骤②可知步骤①将重组质粒先导入大肠杆菌的目的是______________。
（3）步骤3中应选用限制酶______________来切割从大肠杆菌分离的重组质粒从而获得图中所示的重组DNA片段，然后将其导入巴斯德毕赤酵母菌细胞。
（4）为了确认巴斯德毕赤酵母菌转化是否成功，在培养基中应该加入______________以便筛选。
（5）转化的酵母菌在培养基上培养一段时间后，需要向其中加入______________以维持其生活，同时诱导HBsA9基因表达。
（6）与大肠杆菌等细菌相比，用巴斯德毕赤酵母菌细胞作为基因工程的受体细胞，其优点是在蛋白质合成后，细胞可以对其进行_______并分泌到细胞外，便于提取。
（7）培育转化酵母细胞所利用的遗传学原理是______________。
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下面是将乙肝病毒控制合成病毒表面主蛋白的基因HBsAg导入巴斯德毕赤酵母菌生产乙肝疫苗的过程及有关资料，请分析回答下列问题。
资料1 巴斯德毕赤酵母菌是一种甲基营养型酵母菌，能将甲醇作为其唯一碳源，此时AOX1基因受到诱导而表达[5'AOX1和3'AOX1(TT)分别是基因AOX1的启动子和终止子]。
资料2 巴斯德毕赤酵母菌体内无天然质粒，所以科学家改造出了图1所示的pPIC9K质粒用作载体，其与目的基因形成的重组质粒经酶切后可以与酵母菌染色体发生同源重组，将目的基因整合于染色体中以实现表达。
(1)如果要将HBsAg基因和pPIC9K质粒重组，应该在HBsAg基因两侧的A和B位置接上______、______限制酶识别序列， 这样设计的优点是避免质粒和目的基因自身环化。
(2)酶切获取HBsAg基因后，需用________将其连接到pPIC9K质粒上，形成重组质粒，并将其导入大肠杆菌以获取_______ _。
(3)步骤3中应选用限制酶________来切割重组质粒获得重组DNA，然后将其导入巴斯德毕赤酵母菌细胞。
(4)为了确认巴斯德毕赤酵母菌转化是否成功，在培养基中应该加入卡拉霉素以便筛选，转化后的细胞中是否含有HBsAg基因，可以用_____ ___方法进行检测。
(5)转化的酵母菌在培养基上培养一段时间后，需要向其中加入____ ____以维持其生活，同时诱导HBsAg基因表达。
(6)与大肠杆菌等细菌相比，用巴斯德毕赤酵母菌细胞作为基因工程的受体细胞，其优点是在蛋白质合成后，细胞可以对其进行___ _____并分泌到细胞外，便于提取。
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