科研人员以抗四环素基因为标记基因,通过基因工程的方法让大肠杆菌生产鼠的β-珠蛋白,治疗鼠的镰刀型细胞贫血症。下列相关实验设计中,不合理的是( )
A. 利用小鼠DNA分子通过PCR克隆出β-珠蛋白基因的编码序列
B. 用编码序列加启动子、抗四环素基因等元件来构建表达载体
C. 用Ca2+处理大肠杆菌后,将表达载体导入具有四环素抗性的大肠杆菌中
D. 用含有四环素的培养基筛选出已经导入β-珠蛋白编码序列的大肠杆菌
高三生物单选题中等难度题
科研人员以抗四环素基因为标记基因,通过基因工程的方法让大肠杆菌生产鼠的β-珠蛋白,治疗鼠的镰刀型细胞贫血症。下列相关实验设计中,不合理的是( )
A. 利用小鼠DNA分子通过PCR克隆出β-珠蛋白基因的编码序列
B. 用编码序列加启动子、抗四环素基因等元件来构建表达载体
C. 用Ca2+处理大肠杆菌后,将表达载体导入具有四环素抗性的大肠杆菌中
D. 用含有四环素的培养基筛选出已经导入β-珠蛋白编码序列的大肠杆菌
高三生物单选题中等难度题查看答案及解析
新南威尔士大学的研究人员破解了胎儿血红蛋白的“消失之谜”,掌握了重启它的“基因钥匙”,胎儿血红蛋白可以弥补成人血红蛋白的缺失,那些成人血红蛋白有缺陷的,比如镰刀状细胞贫血症患者,或许将迎来新的治疗希望。研究人员准备从胎儿血液中提取和分离血红蛋白,据图回答下列问题。
(1)实验前取新鲜的血液,要切记在采血容器中预先加入柠檬酸钠,加入柠檬酸钠的目的是__________。
(2)图1装置中C溶液是__________;用图1装置分离蛋白质的方法叫__________。
(3)在检测的样品中存在甲、乙、丙、丁、戊五种蛋白质分子,其分子大小、所带电荷的性质和数量情况如图2所示。
①将样品装入透析袋中透析12h,若分子乙保留在袋内,则分子__________也保留在袋内,其原因是__________。
②用图1装置分离样品中的蛋白质,则移动速度最慢的分子是__________;若将样品进行SDS一聚丙烯酰胺凝胶电泳其结果如图3所示,移动速度最慢的分子对应图中__________带(填“M”、“N”或“P”),判断理由是______________________________。
高三生物实验题中等难度题查看答案及解析
科研人员采用转基因体细胞克隆技术获得转基因绵羊,以便通过乳腺生物反应器生产人凝血因子IX医用蛋白,其技术路线如下图所示(成纤维细胞可增殖)。下列叙述错误的是
A. 过程②常用的方法是显微注射法
B. 代孕母羊要注射免疫抑制剂防止发生免疫排斥反应使移植胚胎死亡
C. 卵母细胞去核的目的是保证核遗传物质来自含目的基因的成纤维细胞
D. 整合有目的基因的成纤维细胞可进行传代培养从而获得大量的细胞群
高三生物选择题中等难度题查看答案及解析
鸡干抗素是一种具有高效和广谱抗病毒作用的细胞因子,广泛用于动物领域的抗病毒治疗。科研人员将鸡干扰素基因作为目的基因,构建基因表达载体,通过农杆菌介导法导入烟草,以获得抗病毒烟草。下图为科研人员制备能合成鸡干扰素的烟草愈伤组织细胞的流程,①-④表示相关的操作,两种限制酶的识别序列及切割位点如表所示。请回答下列问题:
(1)步骤①中,利用PCR技术扩增干扰素基因时,设计引物序列的主要依据是_____________。科研人员还在两种引物的一端分别加上了______________和_____________序列,以便于后续的剪切和连接。
(2)步骤②所构建的基因表达载体中末标注出的必需元件还有_______________________,步骤③中需先用__________________处理农杆菌以便将基因表达载体导入细胞。
(3)步骤④中,科研人员提取愈伤组织细胞的RNA后,先通过逆转录获得DNA,再通过PCR扩增制备探针,若最终未能检测出干扰素基因,其可能原因是_________________________。
(4)用烟草花叶病毒对获得的转基因烟草和普通烟草进行接种实验,接种后第19天对照组植株进入病情指数(植物受病毒侵染的严重程度)为100的平台期,而转基因植株在第______天才进入平台期,但此时的病情指数为79,说明转基因烟草植株对病毒的侵染表现出一定的抗性,但抗性较低,可能的原因有_______________________________。
高三生物非选择题中等难度题查看答案及解析
鸡干扰素是一种具有高效和广谱抗病毒作用的细胞因子,广泛用于动物领域的抗病毒治疗。科研人员将鸡干扰素基因作为目的基因,构建基因表达载体,通过农杆菌介导法导入烟草,以获得抗病毒烟草。下图为科研人员制备能合成鸡干扰素的烟草愈伤组织细胞的流程,①~④表示相关的操作,两种限制酶的识别序列及切割位点如表所示。请回答下列问题:
(1)步骤①中,利用PCR技术扩增干扰素基因时,设计引物序列的主要依据是_________。科研人员还在两种引物的一端分别加上了________和________序列,以便于后续的剪切和连接。为防止酶切产物自身环化,构建表达载体需用两种限制酶,选择的原则是:Ti质粒内,每种限制酶有________个切割位点,酶切后,目的基因形成的两个黏性末端序列_______(相同/不相同)
(2)步骤②所构建的基因表达载体中未标注出的必需元件还有________,步骤③中需先用________处理农杆菌以便将基因表达载体导入细胞。
(3)步骤④中,科研人员提取愈伤组织细胞的RNA后,先通过________获得DNA,再进行PCR扩增,若最终未能检测出干扰素基因,其可能原因是________________。
高三生物非选择题中等难度题查看答案及解析
鸡干扰素是一种具有高效和广谱抗病毒作用的细胞因子,广泛用于动物领域的抗病毒治疗。科研人员将鸡干扰素基因作为目的基因,构建基因表达载体,通过农杆菌介导法导入烟草,以获得抗病毒烟草。下图为科研人员制备能合成鸡干扰素的烟草愈伤组织细胞的流程,①~④表示相关的操作,两种限制酶的识别序列及切割位点如表所示。请回答下列问题:
(1)表格中的限制酶EcoRⅠ切割DNA分子后形成的黏性末端是_________________。
(2)步骤①是利用PCR技术扩增鸡干扰素基因,进行PCR的前提是___________。
(3)图中选用两种限制酶分别处理鸡干扰素基因和农杆菌Ti质粒,这样做的优点有_________。
(4)步骤②所构建的基因表达载体中启动子的作用是 ____________。
(5)步骤③中需先用____________处理农杆菌以便将基因表达载体导入细胞。
(6)步骤④中,科研人员提取愈伤组织细胞的RNA后,先通过逆转录获得DNA,再通过PCR扩增制备探针,若最终未能检测出干扰素基因,其可能原因是__________________。
高三生物综合题中等难度题查看答案及解析
鸡干扰素是一种具有高效和广谱抗病毒作用的细胞因子,广泛用于动物领域的抗病毒治疗。科研人员将鸡干扰素基因作为目的基因,构建基因表达载体,通过农杆菌介导法导入烟草,以获得抗病毒烟草。下图为科研人员制备能合成鸡干扰素的烟草愈伤组织细胞的流程,①~④表示相关的操作,两种限制酶的识别序列及切割位点如表所示。请回答下列问题:
(1)步骤①中,利用PCR技术扩增干扰素基因时,设计引物序列的主要依据是__________。科研人员还在两种引物的一端分别加上了__________和__________序列,以便于后续的剪切和连接,一个DNA分子三轮复制以后,含有两种引物的DNA分子有__________个。为防止酶切产物自身环化,构建表达载体需用两种限制酶,选择的原则是__________。
A. Ti质粒内,每种限制酶只有一个切割位点
B. 目的基因编码蛋白质的序列中,每种限制酶只有一个切割位点
C. 酶切后,目的基因形成的两个黏性末端序列不相同
D. 酶切后,Ti质粒形成的两个黏性末端序列相同
(2)步骤②所构建的基因表达载体中未标注出的必需元件还有__________,步骤③中需先用__________处理农杆菌以便将基因表达载体导入细胞。
(3)步骤④中,科研人员提取愈伤组织细胞的RNA后,先通过__________获得DNA,再进行PCR扩增,若最终未能检测出干扰素基因,其可能原因是__________。
高三生物综合题困难题查看答案及解析
鸡干扰素是一种具有高效和广谱抗病毒作用的细胞因子,广泛用于动物领域的抗病毒治疗。科研人员将鸡干扰素基因作为目的基因,构建基因表达载体,通过农杆菌介导法导入烟草,以获得抗病毒烟草。下图为科研人员制备能合成鸡干扰素的烟草愈伤组织细胞的流程,①~④表示相关的操作,两种限制酶的识别序列及切割位点如表所示。请回答下列问题:
(1)步骤①中,利用PCR技术扩增干扰素基因时,设计引物序列的主要依据是_________。科研人员还在两种引物的一端分别加上了________和________序列,以便于后续的剪切和连接。为防止酶切产物自身环化,构建表达载体需用两种限制酶,选择的原则是:Ti质粒内,每种限制酶有________个切割位点,酶切后,目的基因形成的两个黏性末端序列_______(相同/不相同)
(2)步骤②所构建的基因表达载体中未标注出的必需元件还有________,步骤③中需先用________处理农杆菌以便将基因表达载体导入细胞。
(3)步骤④中,科研人员提取愈伤组织细胞的RNA后,先通过________获得DNA,再进行PCR扩增,若最终未能检测出干扰素基因,其可能原因是________________。
高三生物非选择题中等难度题查看答案及解析
鸡干扰素是一种具有高效和广谱抗病毒作用的细胞因子,广泛用于动物领域的抗病毒治疗。科研人员将鸡干扰素基因作为目的基因,构建基因表达载体,通过农杆菌介导法导入烟草,以获得抗病毒烟草。下图为科研人员制备能合成鸡干扰素的烟草愈伤组织细胞的流程,①~④表示相关的操作,两种限制酶的识别序列及切割位点如表所示。请回答下列问题:
(1)步骤①中,利用PCR技术扩增干扰素基因时,设计引物序列的主要依据是____。科研人员还在两种引物的一端分别加上了__________和___________序列,以便于后续的剪切和连接。为防止酶切产物自身环化,构建表达载体需用两种限制酶,选择的原则是_________。
A.Ti质粒内,每种限制酶只有一个切割位点
B.目的基因编码蛋白质的序列中,每种限制酶只有一个切割位点
C.酶切后,目的基因形成的两个黏性末端序列不相同
D.酶切后,Ti质粒形成的两个黏性末端序列相同
(2)步骤②所构建的基因表达载体中未标注出的必需元件还有___________,步骤③中需先用______处理农杆菌以便将基因表达载体导入细胞。
(3)步骤④中,科研人员提取愈伤组织细胞的RNA后,先通过________获得DNA,再进行PCR扩增,若最终未能检测出干扰素基因,其可能原因是___________。
(4)用烟草花叶病毒对获得的转基因烟草和普通烟草进行接种实验,接种后第19天对照组植株进入病情指数(植物受病毒侵染的严重程度)为100的平台期,而转基因植株在第______天才进入平台期,但此时的病情指数为79。说明转基因烟草植株对病毒的侵染表现出一定的抗性,但抗性较低,可能的原因有__________。
高三生物非选择题困难题查看答案及解析
科研人员先分别PCR扩增尿酸酶基因和原核生物胞外蛋白信号肽基因(编码的肽链能引导新合成的蛋白质转移、分泌),再将它们拼接形成融合基因,并导入大肠杆菌生产尿酸酶。相关叙述正确的是
A.两个基因拼接时需考虑两者的拼接方向和次序
B.融合基因可共用一个启动子和终止子
C.在导入融合基因前,应先用NaCl处理大肠杆菌,使其变为感受态细胞
D.该技术成功的标志是无需裂解大肠杆菌,在其培养液中就能收获尿酸酶
高三生物多选题简单题查看答案及解析