［生物――选修３ 现代生物科技专题］（15分 每空1分）下面是一项“利用转基因番茄生产人胰...

【生物—选修3：现代生物科技专题】（15 分）阅读下面关于“利用转基因番茄生产人胰岛素的方法”的专利摘要，请回答：

本发明利用转基因番茄作为生物反应器生产人胰岛素。所用的人胰岛素基因是根据植物“偏爱”的密码子设计，通过人工合成若干DNA 片段，拼接而成。将该基因置于CaMV 35S 启动子和果实专一性启动子2A12 的驱动之下通过农杆菌介导的方法转入番茄中，在番茄的果实中表达人胰岛素。并且在胰岛素-COOH端加上KDEL 内质网滞留序列，避免胰岛素在植物细胞中的降解。

（1）根据上述专利摘要，本发明中所用的人胰岛素基因是采用__________的方法获得，获得的目的基因与人体细胞中胰岛素基因的碱基序列_____。（填“相同”或“不同”）

（2）本发明中，转基因操作时所用的载体是__________，载体上的T-DNA可以转移至受体细胞，并且整合到受体细胞染色体的DNA 上。构建的基因表达载体中应含有下列哪些结构__________。（多选，填编号）

①终止密码子 ②内含子滞留序列 ③CaMV 35S 启动子 ④果实专一性启动子2A12 ⑤标记基因 ⑥终止子 ⑦引物 ⑧复制原点 ⑨内质网滞留序列 ⑩目的基因

（3）通过农杆菌介导的方法将人胰岛素基因转入番茄中的具体操作是：用含有基因表达载体的农杆菌感染番茄植株的损伤部位，伤口处的番茄植株细胞会分泌大量的__________，吸引农杆菌移向这些细胞。通过农杆菌的________作用，就可以使目的基因进入番茄植株细胞，并将其插入到番茄植株细胞中染色体的DNA上。

（4）请从人体相关生理分析，吃这种转基因番茄能否治疗人类的Ⅰ型糖尿病？________（填“能”或“不能”）。原因是：___________。

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［生物――选修３　现代生物科技专题］（15分   每空1分）

下面是一项“利用转基因番茄生产人胰岛素的方法”的专利摘要，请回答：

本发明利用转基因番茄作为生物反应器生产人胰岛素。所用的人胰岛素基因是依据植物“偏爱”的密码子来设计所含的密码子，通过人工合成若干DNA片段，拼接而成，并且在胰岛素-COOH端加上KDEL内质网滞留序列，避免胰岛素在植物细胞中的降解。将该基因置于CaMV 35S启动子和果实专一性启动子2A12的驱动之下通过农杆菌介导的方法转入番茄中，在番茄的果实中表达人胰岛素。

（1）本专利是采用___________方法获得目的基因的。获得的人胰岛素基因与人体细胞中胰岛素基因的碱基序列不同，但两者所编码的蛋白质中氨基酸序列相同，原因密码子具有___________性，基因序列不同，蛋白质可以相同。要想在体外获得大量该目的基因的片段，可以采用____________技术。该技术中使用的关键酶是________________________ ；原料是____________________。

（2）根据上述摘要，转基因操作时所用的载体是____________，载体上的____________可以转移至受体细胞，并且整合到受体细胞染色体的DNA上。

构建的基因表达载体中含有_______  _______  ______  ______  ____（从下列选项中选择）。

①目的基因   ②CaMV 35S启动子 ③果实专一性启动子2A12    ④引物

⑤标记基因    ⑥内含子滞留序列      ⑦终止密码子                ⑧终止子

（3）如果要检测在受体细胞中是否存在目的基因可采用____________技术。该技术中使用的基因探针也可以用来检测___________________ 。还可以从________水平进行鉴定。

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【生物——选修3现代生物科技专题】请分析下面一项专利。

（1）此基因工程中，目的基因是　　　　　 。将人工合成的DNA片段拼接在一起，所必需的工具酶是　　　　　　　 。

（2）试分析在C端加上KDEL的内质网滞留序列的原因：　　　　　　　　　 。

（3）农杆菌介导的方法是将目的基因与农杆菌的　　　　 结合构建　　　　　　 ；目的基因能否在番茄中稳定遗传的关键是　　　　　　 ；检测受体细胞中是否存在目的基因可采用　　　　　　　　 技术。

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【生物——选修3现代生物科技专题】

请分析下面一项专利。

（1）此基因工程中，目的基因是　　　　　　　　　　　　 。将人工合成的DNA片段拼接在一起，所必需的工具酶是　　　　　　　　　　　　　 和　　　　　　　　　　　　　　 。

（2）试分析在C端加上KDEL的内质网滞留序列的原因：　　　　　　　　　　　　　　　　 。

（3）农杆菌介导的方法是将目的基因与农杆菌的　　　　　　 结合构建　　　　　　　　 ；目的基因能否在番茄中稳定遗传的关键是　　　　　　　　　　　　　　　　 ；检测受体细胞中是否存在目的基因可采用　　　　　　　　　　　 技术。

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阅读下面关于“利用转基因番茄生产人胰岛素的方法”的专利摘要，请回答:

本发明利用转基因番茄作为生物反应器生产人胰岛素，所用的人胰岛素基因是根据植物“偏爱”的密码子设计，通过人工合成若干DNA片段，拼接而成。将该基因置于CaMV35S启动子和果实专一性启动子2A12的驱动之下通过农杆菌介导的方法转入番茄中，在番茄的果实中表达人胰岛素。并且在胰岛素-COOH端加上KDEL内质网滞留序列，避免胰岛素在植物细胞中的降解。

（1）根据上述专利摘要，本发明中所用的人胰岛素基因是采用的　　　　　　 方法获得，获得的目的基因与人体细胞中胰岛素基因的碱基序列　　　　　　 （相同/不同）。

（2）本发明中，将目的基因导入受体细胞的方法是　　　　　　 ，载体上的T-DNA可以转移至受体细胞，并且整合到受体细胞染色体的DNA上。

（3）吃这种转基因番茄能否治疗人类的I型糖尿病?　　　　　　 （能/不能）。原因是:

（4）某公司始终秉承“绿色庄园、生态产业、健康生活”的发展理念，着力打造全产业链现代新概念农业庄园。雇佣农民种植农民转基因番茄，农民既有土地和房屋租赁收入，又有工资收入。公司的这一措施主要体现了生态工程的　　　　　　　　 原理。

（5）生物技术是一把双刃剑，可以造福人类，使用不当会给人类带来灾难，目前我国是种植转基因作物最多的国家，有关安全性的争议越来越多，转基因生物安全性问题主要涉及以下三个方面:　　　　　　　　　　　　　 、　　　　　　　　　　　 、　　　　　　　　　　　　 。

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下面是一项“利用转基因番茄生产人胰岛素的方法”的专利摘要，请回答：

本发明利用转基因番茄作为生物反应器生产人胰岛素。所用的人胰岛素基因是依据植物“偏爱”的密码子来设计所含的密码子，通过某方法合成若干DNA片段，拼接而成，重组DNA分子可通过农杆菌介导的方法转入番茄中，在番茄的果实中表达人胰岛素。　

（1）本专利是采用___________方法获得目的基因。获得的人胰岛素基因与人体细胞中胰岛素基因的碱基序列不同，但两者所编码的蛋白质中氨基酸序列相同，原因是________________。要想在体外获得大量该目的基因的片段，可以采用__________技术。该技术中使用的关键酶是_________；原料是四种脱氧核苷酸。

（2）根据上述摘要，转基因操作时所用的载体是___________，载体上的________可以转移至受体细胞，并且整合到受体细胞染色体的DNA上。

（3）如果要检测在受体细胞中是否存在目的基因可采用____________技术,再经　　　　　 方法培养成个体。

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下面是一项“利用转基因番茄生产人胰岛素的方法”的专利摘要，请回答：

本发明利用转基因番茄作为生物反应器生产人胰岛素。所用的人胰岛素基因是依据植物“偏爱”的密码子来设计所含的密码子，通过某方法合成若干DNA片段，拼接而成，重组DNA分子可通过农杆菌介导的方法转入番茄中，在番茄的果实中表达人胰岛素。

（1）本专利是采用___________方法获得目的基因。获得的人胰岛素基因与人体细胞中胰岛素基因的碱基序列不同，但两者所编码的蛋白质中氨基酸序列相同，原因是________________。要想在体外获得大量该目的基因的片段，可以采用__________技术。该技术中使用的关键酶是____________ ；原料是四种脱氧核苷酸。

（2）根据上述摘要，转基因操作时所用的载体是___________，载体上的________可以转移至受体细胞，并且整合到受体细胞染色体的DNA上。

（3）如果要检测在受体细胞中是否存在目的基因可采用____________技术,再经　　　　 方法培养成个体。

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下面是一项“利用转基因番茄生产人胰岛素的方法”的专利摘要，请回答：

本发明利用转基因番茄作为生物反应器生产人胰岛素。所用的人胰岛素基因是依据植物“偏爱”的密码子来设计所含的密码子，通过某方法合成若干DNA片段，拼接而成，重组DNA分子可通过农杆菌介导的方法转入番茄中，在番茄的果实中表达人胰岛素。　

（1）本专利是采用___________方法获得目的基因。获得的人胰岛素基因与人体细胞中胰岛素基因的碱基序列不同，但两者所编码的蛋白质中氨基酸序列相同，原因是________________。要想在体外获得大量该目的基因的片段，可以采用__________技术。该技术中使用的关键酶是____________ ；原料是四种脱氧核苷酸。

（2）根据上述摘要，转基因操作时所用的载体是___________，载体上的________可以转移至受体细胞，并且整合到受体细胞染色体的DNA上。

（3）如果要检测在受体细胞中是否存在目的基因可采用____________技术,再经　　　　　 方法培养成个体。

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下面是一项“利用转基因番茄生产人胰岛素的方法”的专利摘要，请回答：

本发明利用转基因番茄作为生物反应器生产人胰岛素。所用的人胰岛素基因是依据植物“偏爱”的密码子来设计所含的密码子，通过人工合成若干DNA片段，拼接而成，并且在胰岛素-COOH端加上KDEL内质网滞留序列，避免胰岛素在植物细胞中的降解。将该基因置于CaMV 35S启动子和果实专一性启动子2A12的驱动之下通过农杆菌介导的方法转入番茄中，在番茄的果实中表达人胰岛素。

（1）本专利是采用___________方法获得目的基因的。获得的人胰岛素基因与人体细胞中胰岛素基因的碱基序列不同，但两者所编码的蛋白质中氨基酸序列相同，原因________________。要想在体外获得大量该目的基因的片段，可以采用____________技术。该技术中使用的关键酶是_________________；原料是____________________。

（2）根据上述摘要，转基因操作时所用的载体是____________，载体上的____________可以转移至受体细胞，并且整合到受体细胞染色体的DNA上。构建的基因表达载体中含有____________。

①目的基因　　　 ②CaMV 35S启动子　　 ③果实专一性启动子2A12　　 ④引物　　 ⑤标记基因　　　 ⑥内含子滞留序列　　　 ⑦终止密码子　　　　 ⑧终止子

（3）如果要检测在受体细胞中是否存在目的基因可采用____________技术。该技术中使用的基因探针也可以用来检测________________________ 。还可以从________水平进行鉴定。

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[生物一一选修3:现代生物科技专题]口蹄疫是由口蹄疫病毒引起的一种动物传染病，目前常用接种弱毒疫苗的方法预防。疫苗的主要成分是该病毒的一种结构蛋白VP1。科学家尝试利用转基因番茄来生产口蹄疫疫苗。请回答下列问题：

（1）口蹄疫病毒的遗传物质为RNA，则获得可重组到质粒的VP1基因必须用到________酶。要获得大量该VP1基因，可利用____________技术进行扩增。

（2）下图是插入VP1基因的农杆菌Ti重组质粒结构示意图，构建具有VP1基因的基因表达载体还需要在质粒中插入____________。

（3）VP1基因应插入到农杆菌Ti质粒的__________上，通过___________作用进入番茄细胞并插入到染色体DNA，使VP1基因能够稳定维持并发挥作用。

（4）通常用BamHⅠ、HindⅢ两种限制酶切割VP1基因和Ti质粒的目的是_____________；要筛选出含有该目的基因表达载体的番茄细胞，首先需要在含的_____________培养基上进行。

（5）检测发现染色体DNA上插入VP1基因的某些番茄细胞死亡了，导致这些转基因番茄细胞死亡的最可能原因是______________________。

（6）将成功转入VP1基因的受体细胞进行培养，获得转基因植株。若要快速繁殖大量这种转基因种苗，应选取幼枝的_____________部位进行组织培养。

（7）获得表达VP1蛋白的番茄植株以后，要进行免疫效力的测定，具体方法是：将从转基因番茄叶片中提取的VP1蛋白质注射到一定数量的豚鼠体内，每半个月注射一次，三次注射后检测豚鼠血液中产生的

_______________数量，为了使结果可信，应设置空白对照组，注射等量生理盐水。

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