人体内的t-PA蛋白能高效降解血栓,是心梗和脑血栓的急救药。然而,为心梗患者注射大剂量的t-PA会诱发颅内出血,其原因在丁t-PA作用的特异性不高。研究证实,将t-PA第84位的半胱氨酸换成丝氨酸,能显著降低出血副作用。
(1)依据所需t-PA蛋白的结构和功能,对天然的t-PA基因进行序列改造,可制造出性能优异的t-PA突变蛋白,该技术称为_______________。
(2)已知人t-PA基因第84位半胱氨酸的模板链序列为ACA,而丝氨酸的密码子为UCU,因此突变基因编码该氨基酸的模板链序列应设计为______________。
(3)若获得的t-PA突变基因如下图所示,那么质粒pCLY11需用_______________两种限制酶切开,才能与t-PA突变基因高效连接。
(4)将连接成功的基因表达载休导入大肠杆菌中,在含有___________的培养基上挑选颜色呈____________的菌落,初步筛选导入成功的细胞。
(5)检测t-PA突变基因是否导入大肠杆菌,可利用t-PA突变基因制备探针,进行_______________,检测是否有杂交链;也可依据t-PA突变基因两端的序列设计引物对大肠杆菌的DNA进行PCR扩增,若出现了_______________说明t-PA突变基因已经导入了受体细胞。
(6)在上述步骤成功的基础上,若没有能从大肠杆菌中提取到相应的t-PA突变蛋白,其可能的原因是________________。
高三生物综合题中等难度题
人体内的t-PA蛋白能高效降解由血纤维蛋白凝聚而成的血栓,是心梗和脑血栓的急救药。然而,为心梗患者注射大剂量的基因工程t-PA会诱发颅内出血,其原因在于t-PA与血纤维蛋白结合的特异性不高。研究证实,将t-PA第84位的半胱氨酸换成丝氨酸,能显著降低出血副作用。据此,先对天然的t-PA基因进行序列改造,然后再采取传统的基因工程方法表达该突变基因,可制造出性能优异的t-PA突变蛋白。
(1)已知人t-PA基因第84位半胱氨酸的编码序列(即模板链的互补链序列)为TGT,而丝氨酸的密码子为UCU,因此突变基因编码该氨基酸的编码序列应设计为_________。
(2)若获得的t-PA突变基因如图1所示,那么质粒pCLY11需用限制酶_________和_______切开,才能与t-PA突变基因高效连接。
(3)将连接好的DNA分子导入大肠杆菌中,含t-PA突变基因重组DNA分子的细胞应具有的性状是_______________。
A. 新霉素抗性且呈蓝色 B. 新霉素敏感且呈蓝色
C. 新霉素抗性且呈白色 D. 新霉素敏感且呈白色
(4)层析是蛋白质或酶分离提纯的重要步骤。在图2所示的层析装置中,层析柱内装填了特定的细小固体颗粒(称为层析介质),待分离的蛋白质或酶混合溶液流进流出层析柱,便可将目标蛋白与杂蛋白高效分离。试根据题干信息判断,为了高效分离t-PA 突变蛋白,层析介质表面事先应交联或固定___________________。制造该性能优异t-PA突变蛋白的过程称为___________工程。
高三生物非选择题困难题查看答案及解析
人体内的t-PA蛋白能高效降解由纤维蛋白凝聚而成的血栓,是心梗和脑血栓的急救药。然而,为心梗患者注射大剂量的基因工程t-PA会诱发颅内出血,其原因在于t-PA与纤维蛋白结合的特异性不高。研究证实,将t-PA第84位的半胱氨酸换成丝氨酸,能显著降低出血副作用。据此,先对天然的t-PA基因进行序列改造,然后再采取传统的基因工程方法表达该改造后的基因,可制造出性能优异的改良t-PA蛋白。(注:下图表示相关的目的基因、载体及限制酶。pCLY11为质粒,新霉素为抗生素。)
回答下列问题:
(1)己知人t-PA基因第84位半胱氨酸的模板链碱基序列为ACA,而丝氨酸的密码子为UCU,因此改造后的基因决定第84位丝氨酸的模板链的碱基序列应设计为____。
(2)若t-PA改良基因的粘性末端如图所示,那么需选用限制酶____和____切开质粒pCLY11,才能与t-PA改良基因高效连接,在连接时需要用到 ___酶。
(3)应选择____(能/不能)在加入新霉素的培养基中生存并形成菌落的大肠杆菌作为受体细胞,目的是____。在加入新霉素的培养基中形成菌落的受体细胞并非都是目的菌株,需选择呈____色的菌落,进一步培养、检测和鉴定,以选育出能生产改良t-PA蛋白的工程菌株。
(4)以上制造性能优异的改良t-PA蛋白的过程称为____工程。
高三生物综合题中等难度题查看答案及解析
人体内的t-PA蛋白能高效降解血栓,是心梗和脑血栓的急救药。然而,为心梗患者注射大剂量的t-PA会诱发颅内出血,其原因在丁t-PA作用的特异性不高。研究证实,将t-PA第84位的半胱氨酸换成丝氨酸,能显著降低出血副作用。
(1)依据所需t-PA蛋白的结构和功能,对天然的t-PA基因进行序列改造,可制造出性能优异的t-PA突变蛋白,该技术称为_______________。
(2)已知人t-PA基因第84位半胱氨酸的模板链序列为ACA,而丝氨酸的密码子为UCU,因此突变基因编码该氨基酸的模板链序列应设计为______________。
(3)若获得的t-PA突变基因如下图所示,那么质粒pCLY11需用_______________两种限制酶切开,才能与t-PA突变基因高效连接。
(4)将连接成功的基因表达载休导入大肠杆菌中,在含有___________的培养基上挑选颜色呈____________的菌落,初步筛选导入成功的细胞。
(5)检测t-PA突变基因是否导入大肠杆菌,可利用t-PA突变基因制备探针,进行_______________,检测是否有杂交链;也可依据t-PA突变基因两端的序列设计引物对大肠杆菌的DNA进行PCR扩增,若出现了_______________说明t-PA突变基因已经导入了受体细胞。
(6)在上述步骤成功的基础上,若没有能从大肠杆菌中提取到相应的t-PA突变蛋白,其可能的原因是________________。
高三生物综合题中等难度题查看答案及解析
人体内的t-PA蛋白能高效降解由血纤维蛋白凝聚而成的血栓,是心梗和脑血栓的急救药。
(1)为心梗患者注射大剂量的基因工程t-PA会诱发颅内出血。研究证实,将t-PA第84位的半胱氨酸换成丝氨酸,能显著降低出血副作用。据此,先对天然的t-PA基因进行改造,再采取传统的基因工程方法表达该突变基因,可制造出性能优异的t-PA突变蛋白,该工程技术称为__________。
(2)若获得的t-PA突变基因如图所示,那么质粒pCLY11需用限制酶__________和__________切开,才能与t-PA突变基因高效连接。
(3)将连接好的DNA分子导入大肠杄菌中,对大肠杆菌接种培养。在培养基中除了加入水、碳源、氮源等营养物质外,还应加入__________进行选择培养,以筛选成功导入pCLY11的细菌。配置好的培养基通常采用__________法进行灭菌。
(4)对培养得到的菌落进行筛选,其中菌落为__________色的即为含t-PA突变基因重组DNA分子的大肠杆菌。得到的大肠杆菌能否分泌t-PA突变蛋白,可通过该细胞产物能否与__________特异性结合进行判定。
高三生物综合题中等难度题查看答案及解析
人体内的t-PA蛋白能高效降解由血纤维蛋白凝聚而成的血栓,是心梗和脑血栓的急救药。
(1)为心梗患者注射大剂量的基因工程t-PA会诱发颅内出血。研究证实,将t-PA第84位的半胱氨酸换成丝氨酸,能显著降低出血副作用。据此,先对天然的t-PA基因进行改造,再采取传统的基因工程方法表达该突变基因,可制造出性能优异的t-PA突变蛋白,该工程技术称为__________。
(2)若获得的t-PA突变基因如图所示,那么质粒pCLY11需用限制酶__________和__________切开,才能与t-PA突变基因高效连接。
(3)将连接好的DNA分子导入大肠杄菌中,对大肠杆菌接种培养。在培养基中除了加入水、碳源、氮源等营养物质外,还应加入__________进行选择培养,以筛选成功导入pCLY11的细菌。配置好的培养基通常采用__________法进行灭菌。
(4)对培养得到的菌落进行筛选,其中菌落为__________色的即为含t-PA突变基因重组DNA分子的大肠杆菌。得到的大肠杆菌能否分泌t-PA突变蛋白,可通过该细胞产物能否与__________特异性结合进行判定。
高三生物综合题中等难度题查看答案及解析
人 t-PA 蛋白能高效溶解血纤维蛋白凝聚的血栓。用传统基因工程生产的t-PA给心梗患者大剂量注射却会诱发颅内出血,原因在于其与血纤维蛋白结合的特异性低,但若将其第84位的半胱氨酸换成丝氨酸,就能显著降低出血副作用。据此,科学家对人t-PA 基因进行序列改造,再采取传统的基因工程方法表达该突变基因,制造出了高性能的t-PA 突变蛋白。
(1)人 t-PA 基因第84位半胱氨酸的模板链碱基序列为ACA。丝氨酸的密码子为UCU,突变基因中对应该氨基酸密码子的碱基序列应设计为______。
(2)上述获得突变目的基因的基本途径是 ___。
(3)如图所示 t-PA 突变基因、质粒,用__________限制酶切开该质粒较好。
(4)将相应的重组质粒导入大肠杆菌中,含 t-PA 突变基因的细胞应具有的性状是______。
(5)上述生物工程技术是以_______为基础的,首先通过________,再进行______,以满足医疗需求的。
高三生物综合题困难题查看答案及解析
血糖是人体各组织细胞所需能量的主要来源,胰岛素对血糖的平衡发挥重要作用。图一为胰岛素降低血糖浓度的部分作用机理模式图(糖尿病病因之一是患者体内存在甲、乙、丙的异常抗体)。给人静脉注射不同剂量的胰岛素,测得血糖的补充速率和消耗速率如图二所示。下列分析 错误的是( )
A.胰岛β细胞分泌的胰岛素通过体液运送到肝细胞
B.曲线 b 的上升是胰岛素作用于肝脏、肌肉等细胞的结果
C.当胰岛素浓度为 40μU/mL 时,在较长时间内血糖浓度可维持相对稳定
D.体内出现丙的异常抗体的糖尿病患者无法通过注射胰岛素的方式取得疗效
高三生物单选题中等难度题查看答案及解析
糖尿病患者使用胰岛素治疗时,大都采用肌肉注射而不是口服,其根本原因是( )
A.肌肉注射比口服的先进入人体
B.口服时药液对消化道的刺激过于强烈
C.口服时药液将被消化液中的蛋白酶水解
D.口服时药液被消化液中的脂肪酶水解
高三生物选择题中等难度题查看答案及解析
老年痴呆症患者的脑血管中有一种特殊的β一淀粉样蛋白体,它的逐渐积累可能导致神经元损伤和免疫功能下降。正常老年人体中某些基因的突变会导致β一淀粉样蛋白体的产生和积累。下列技术不能用于老年痴呆症治疗的是( )
A.胚胎移植技术 B.胚胎干细胞技术C.单克隆抗体技术D.基因治疗技术
高三生物选择题中等难度题查看答案及解析
血栓主要由不溶性的纤维蛋白等物质组成。纳豆激酶(NK)是一种在纳豆发酵过程中由纳豆菌产生的蛋白酶,它不但能直接作用于纤维蛋白(A过程),还能间接激活体内纤溶酶原(B 过程)。如图是有关纳豆激酶溶栓机理简图,请据图回答问题:
(1)研究NK直接水解作用:给定纤维蛋白平板,将________滴加其上,若出现相应的溶解圈,则可说明___________________。
(2)NK 的间接作用是通过____________激活体内纤溶酶原,增加纤溶酶的量和作用,溶解血栓。
(3)请根据下列给出的实验材料,比较NK 与内源性纤溶酶溶栓效果,并在下面横线位置上,补全相应内容。
实验材料:NK溶液、内源性纤溶酶溶液、纤维蛋白块、缓冲液、量筒、试管和秒表。
实验步骤:
观察记录:观察纤维蛋白块分解情况,并记录分解的________。
请预测一种实验结果并分析:__________________________。
高三生物综合题简单题查看答案及解析