羽毛的成分主要是角蛋白，是一类结构稳定、不溶于水的蛋白质，目前缺乏对其高效降解的处理方法。...

羽毛的成分主要是角蛋白，是一类结构稳定、不溶于水的蛋白质，目前缺乏对其高效降解的处理方法。实验人员从废弃羽毛堆积处的土壤中分离筛选出具有高效降解羽毛角蛋白的细菌，请回答下列问题：

（1）筛选高效降解羽毛角蛋白的细菌需从废弃羽毛堆积处的土壤中取样，其原因是____________。

（2）筛选高效降解羽毛角蛋白的细菌的培养基中应加入____作为唯一碳源，所用培养基从功能上来看属于_____培养基，该培养基中还需要加入适量的K2HPO4和KH2PO4，其作用是______________，对培养基灭菌的常用方法是___________________。

（3）角蛋白酶是羽毛降解菌的一种分泌蛋白，为了测定其角蛋白酶的活性，应让羽毛降解菌发酵，然后将发酵液离心，再从________（填“沉淀物”或“上清液”）取样。为了将角蛋白酶和其他蛋白质分离，可用电泳法分离蛋白质，电泳法可以根据蛋白质分子__________的不同，将蛋白质分离。测定羽毛降解菌角蛋白酶活性的主要目的是_____________。

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羽毛的成分主要是角蛋白，是一类结构稳定、不溶于水的蛋白质，目前缺乏对其高效降解的处理方法。实验人员从废弃羽毛堆积处的土壤中升离筛选出具有高效降解羽毛角蛋白的细菌，请回答下列问题：

（1）筛选高效降解羽毛角蛋白的细菌需从废弃羽毛堆积处的土壤中取样，其原因是__________。

（2）筛选高效降解羽毛角蛋白的细菌的培养基中应加入__________作为唯一碳源，该培养基中还需要加入适量的K2HPO4和KH2PO4，其作用是__________，对培养基灭菌的常用方法是__________。

（3）角蛋白酶是羽毛降解菌的一种分泌蛋白，为了测定其角蛋白酶的活性，应让羽毛降解菌发酵，然后将发酵液离心，再从__________（填“沉淀物”或“上清液”）取样。为了将角蛋白酶和其他蛋白质分离，可用电泳法分离蛋白质，电泳法可以根据蛋白质分子__________的不同，将蛋白质分离。测定羽毛降解菌角蛋白酶活性的主要目的是____________________。

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拟从餐厨垃圾中分离具有高效降解能力的微生物制成菌剂，用于餐厨垃圾高效无害化处理。配制用于培养菌种的培养基（如下表），为比较这些菌种的降解效果，分别配制含有餐厨垃圾主要成分（淀粉、蛋白质、脂肪和纤维素）的培养基，检测效果如图。相关说法不正确的是（　　 ）

培养菌种用培养基

A.根据配方可知，该培养基属于固体培养基

B.在涂布过程中需要用到涂布器和酒精灯

C.透明圈表示菌种可降解培养基中含有的餐厨垃圾成分

D.D0/D的值越大，说明菌种的降解效果越好

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咔唑（含N有机物）具有潜在致癌性，且结构稳定难以清除。为了获得高效降解咔唑的微生物，研究人员设计了如图所示的实验方案。下列针对该方案的表述正确的是（　　 ）

A.油田淤泥样品需要作灭菌处理

B.本实验用稀释涂布平板法的目的是计数菌落数

C.平板培养中生长因子均为无机物

D.咔唑浓度最低的摇瓶内为目标微生物

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自噬作用是细胞对胞质蛋白和细胞器进行降解和再利用的一种过程。某些情况下，细胞 可通过自噬作用降解自身的非必需成分来提供营养和能量。为探究 B 蛋白对细胞自噬的作用，研究 人员进行了相关实验，实验的处理及结果如图所示。

（1）与细胞自噬密切相关的细胞器是__________________，它在细胞中的作用是__________________。

（2）上述实验中作为对照组的是____________组，由 a、b、c 三组得出的结论是______。

（3）d 组与 c 组相比，自噬体数目较少的原因是_________________________________________。

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分离筛选降解纤维素能力强的微生物对于解决秸秆等废弃物资源的再利用和环境污染问题具有理论和实际意义。研究人员从土壤和腐烂的秸秆中分离筛选出能高效降解纤维素的菌株，并对筛选出的菌株进行了初步研究。

（1）对培养基进行灭菌的常用方法是　　　　　　 。为在培养基表面形成单个菌落，若以接种环为工具，则用　　　　　　 法进行接种。

（2） 先将样品悬液稀释后涂在放有滤纸条的固体培养基上进行筛选得到初筛菌株。再将初筛菌株接种到以　　　　　　 为唯一碳源的培养基培养2～5天，加入　　　　　 溶液后，依据出现的颜色反应进行筛选，观察菌落特征并测量　　　　　　　 。同时将初筛菌株制备成的菌液放入加有滤纸条的液体培养基中，恒温振荡培养8天，观察滤纸条的破损情况。结果见表。由表可知，8种菌株中1、3、7号菌株产酶能力较强,原因是　　　　　　 。

注: ① DP = （D / d） 2，其中d表示菌落直径（cm） ，D表示水解圈直径（cm）

②“+”为滤纸边缘膨胀， “+ + ”为滤纸整齐膨胀并弯曲，“+ + + ”为滤纸不定形“+ + + +”为成团糊状“+ + + + +” 为半清状

（3） 为进一步研究1、3、7号菌株对秸秆降解的效果。分别用这三种菌株对秸秆进行处理，并在第5天和第10天对秸秆和秸秆中含有的纤维素、半纤维素以及木质素等组分的降解情况进行了测定。结果见下图。

由图分析可知，三种菌株对　　　　　　 的降解最强，与第5天结果相比，第10天秸秆各组分中　　　　　　 的降解率变化最大。整体分析　　　　 号菌株的降解效果最好。

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咔唑（含N有机物）具有潜在致癌性，且结构稳定难以清除。为了获得高效降解咔唑的微生物，研究人员设计了如图所示的实验方案（①～⑦表示相应的标注操作过程）。请回答下列问题。

（1）图示所用的 “CNFM +咔唑”培养基，属于 _________ 培养基。

（2）②操作的接种采用　 ______（实验器具）。

（3）④操作的接种采用 _______方法，其中平板培养的目的是________ 。

（4）在相同、适应环境中进行上述“多瓶培养”操作，可以初步确定_________的锥形瓶中含有高效降解咔唑的微生物。

（5）为鉴定下图1平板中的微生物种类，可作为鉴定依据的有　 ______ 。

（6）为了将图1培养基中的真菌与细菌分离，新制了PDA培养基（含马铃薯、葡萄糖、琼脂、蒸馏水）并加入青霉素（抑制细菌细胞壁的合成）。接种时用绒布轻按图1培养基表面，使绒布面沾上菌落，再将绒布轻按在新制培养基表面，培养结果如图2所示

①比较图1、2可知，图1中菌落______（填编号）为细菌，判断理由是______。

②图2中出现菌落5的原因可能是______（写出三种）。

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Ⅰ.苯酚及其衍生物广泛存在于工业废水中，对环境有严重危害。小明同学设计实验从处理废水的活性污泥中分离筛选苯酚降解高效菌株，请回答下列问题：

（1）苯酚降解菌富集培养基含有蛋白胨、K2HP04、MgS04、苯酚和水，其中可作为碳源的有__________。

（2）将采集到的样品进行选择培养，苯酚用量应随转接次数增加而逐渐____________，以达到增加苯酚降解菌浓度的目的。

（3）下图为平板划线法示意图，在图中____________（填图中序号）区域更易获得单菌落。制备平板培养基时除了需要水、无机盐及各种营养物质外，还必须添加______________________。

（4）采用比色测定法（使用苯酚显色剂）检测降解后的废水中苯酚残留量。先制作系列浓度梯度并进行显色反应，下表中2〜5号比色管的苯酚浓度应分别为______________________。

Ⅱ.番茄红素是一种类胡萝卜素（脂溶性），不溶于水，化学性质比较稳定，主要存在于番茄、西瓜等植物中。

（1）提取番茄红素常用____________（填“乙醇”或“石油醚”）萃取，理由是____________________。

（2）番茄红素提取实验的流程为：植物→粉碎→①→萃取→②→浓缩→番茄红素，其中，①表示________，②表示_____________。

（3）该实验操作过程中萃取环节采用水浴加热的原因__________________________。

（4）番茄红素粗品的鉴定方法是__________________________。

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硝基苯酚（PNP)呈黄色，是一种工业污染物，可被微生物降解为无色物质。目前最有前途的处理方法是用高效PNP降解菌处理含PNP的废水。请回答下列问题：

（1）欲获得PNP降解菌，所选用的固体培养基中应加入_______________做为唯一碳源，从功能上看该培养基属于______________培养基。

（2）将含PNP降解菌的培养液接种在此固体培养基止，常釆用的方法有_________________________，PNP降解菌的降解效率可通过___________________鉴别。

（3）实验操作中获得纯净培养物的关键是______________；实验室中常用到的灭菌方法有__________(至少答出两项）。

（4）若某同学培养的菌落数明显低于班级平均值,原因可能是_____________________________。

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一定浓度的福尔马林（甲醛的水溶液）通过使蛋白质变性而起防腐作用。可从活性污泥中分离出高效分解甲醛的细菌，以处理废弃的福尔马林。下图是筛选和纯化甲醛分解菌的实验过程示意图，其中LB培养基能使菌种成倍扩增。下列相关叙述错误的是（　　 ）

A.筛选甲醛分解菌的培养基中要添加甲醛作为唯一的碳源

B.③→④接种的目的是通过单个菌落分离出甲醛分解菌

C.步骤⑤中，各个培养瓶中的甲醛溶液要有一定的浓度梯度

D.测定并选出甲醛浓度最低的培养瓶后，筛选对应的菌株

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