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回答下列（一）、（二）小题：
（一）回答与泡菜制作有关的问题：
(1)为了获得用于泡菜腌制的优良乳酸菌，通常将泡菜汁稀释后涂布在MRS乳酸菌专用培养基上进行________分离，然后将其扩大培养，并进行特性鉴定。在进行特性鉴定时，必需进行耐酸实验、耐高温实验和________实验等，从而选出优势菌株。下图是四个菌株在白菜汁培养基中的生长曲线，比较适合泡菜腌制的菌株是________。
(2)在泡菜腌制过程中，会产生有机酸、醇类、亚硝酸盐等。腌制初期大量繁殖的微生物是________，醇类主要是由它进行________产生的，随后泡菜中PH开始下降，其它微生物生长受到抑制。
(3)为测定腌制的泡菜中亚硝酸盐含量，取腌制的泡菜和少量泡菜汤，在匀浆机中打成匀浆，过滤洗涤得到样品溶液，先除去蛋白质、脂质等，然后与对氨基苯磺酸发生重氮化反应，再与________偶联，形成紫红色产物，然后用光程1cm的比色杯测定光密度值。如果制作标准曲线时的比色杯光程大于样液的比色杯光程，测得的样液中亚硝酸盐含量________（偏大、偏小、无影响）。
（二）草甘膦是一种常用非选择性除草剂，一种农杆菌中的基因E编码抗草甘膦的酶，利用基因工程技术将基因E转入大豆中，以提高大豆对草甘膦的忍耐能力，请回答：
(1)从农杆菌中提取含有基因E的DNA，用限制性核酸内切酶分别切割含基因E的DNA和农杆菌的________，然后用DNA连接酶连接，形成重组DNA分子并导入农杆菌。为了提高重组DNA形成的效率，除了考虑目的基因和载体的质量与浓度外，还需要考虑的主要因素有________。
(2)将________后的大豆胚尖浸泡在含有E基因的农杆菌溶液中，一段时间后取出并转移到加有适当配比生长调节剂的培养基上，脱分化形成愈伤组织，为提高形成愈伤组织能力，可以对大豆胚尖进行适当的________刺激处理。
(3)除了用(2)中方法得到转基因大豆外，也可以将上述愈伤组织进行液体悬浮培养，分散成________丰富、液泡小而细胞核大的单细胞，这种单细胞依次经细胞团、球形胚、心形胚和________，最后再生出完整的植株。
(4)为判断本研究是否达到预期目的，可比较转基因大豆和非转基因大豆的________性状。
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【加试题】回答下列（一）、（二）小题：
（一）回答与泡菜腌制和亚硝酸盐测定有关的问题：
（1）制作泡菜时，为缩短发酵周期，腌制前可加入乳酸菌。取少量酸奶，用无菌蒸馏水稀释后，再用________蘸取少量的稀释液，在 MRS 乳酸菌专用培养基的平板上划线，以获得乳酸菌单菌落。下图所示的划线分离操作，正确的是________。
（2）泡菜腌制过程中，会产生有机酸、醇类和亚硝酸盐，其中醇类是由_______进行厌氧呼吸产生。亚硝酸盐对人体有害，为测定泡菜中亚硝酸盐含量，从泡菜中提取要硝酸盐，与_______ 发生重氮化反应，再与 N-1-萘基乙二胺偶联，形成紫红色产物。然后用光程为 1cm 的_______，在 550nm 光波下测定光密度值，与由一直浓度梯度亚硝酸钠制作的_______比对，计算样品中亚硝酸盐的含量。
（3）已知乳酸菌中的亚硝酸还原酶能降解亚硝酸盐。在一定的腌制时间内，随着腌制时间的延长，泡菜中亚硝酸盐含量逐渐降低，是由于在厌氧和_______环境下亚硝酸盐被亚硝酸还原酶降解。
（二）回答与生态工程有关的问题：
（1）对农作物秸秆多途径利用的基本过程示意图如下，贯穿全过程的核心技术是________技术。其中“过腹还田”的具体途径是________。将秸秆和动物粪便等通过微生物发酵产生沼气，这是利用了农业生态工程中的________技术。
（2）农业生产上，畜牧业依赖和受制于种植业，可以通过种植业和畜牧业的________技术提高经济和社会效益。“退耕还林”后，林地的增加可以减少________，更有利于受损生态系统的恢复。使用农药能有效控制农业害虫，但也使生态系统的________减少，因此利用生物的________进行生物防治是今后的发展方向。
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【加试题】回答下列（一）、（二）小题：
（一）回答与泡菜腌制和亚硝酸盐测定有关的问题：
（1）制作泡菜时，为缩短发酵周期，腌制前可加入乳酸菌。取少量酸奶，用无菌蒸馏水稀释后，再用________蘸取少量的稀释液，在 MRS 乳酸菌专用培养基的平板上划线，以获得乳酸菌单菌落。下图所示的划线分离操作，正确的是________。
（2）泡菜腌制过程中，会产生有机酸、醇类和亚硝酸盐，其中醇类是由_______进行厌氧呼吸产生。亚硝酸盐对人体有害，为测定泡菜中亚硝酸盐含量，从泡菜中提取要硝酸盐，与_______ 发生重氮化反应，再与 N-1-萘基乙二胺偶联，形成紫红色产物。然后用光程为 1cm 的_______，在 550nm 光波下测定光密度值，与由一直浓度梯度亚硝酸钠制作的_______比对，计算样品中亚硝酸盐的含量。
（3）已知乳酸菌中的亚硝酸还原酶能降解亚硝酸盐。在一定的腌制时间内，随着腌制时间的延长，泡菜中亚硝酸盐含量逐渐降低，是由于在厌氧和_______环境下亚硝酸盐被亚硝酸还原酶降解。
（二）回答与生态工程有关的问题：
（1）对农作物秸秆多途径利用的基本过程示意图如下，贯穿全过程的核心技术是________技术。其中“过腹还田”的具体途径是________。将秸秆和动物粪便等通过微生物发酵产生沼气，这是利用了农业生态工程中的________技术。
（2）农业生产上，畜牧业依赖和受制于种植业，可以通过种植业和畜牧业的________技术提高经济和社会效益。“退耕还林”后，林地的增加可以减少________，更有利于受损生态系统的恢复。使用农药能有效控制农业害虫，但也使生态系统的________减少，因此利用生物的________进行生物防治是今后的发展方向。
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回答与泡菜腌制和亚硝酸盐测定有关的问题：
（1）制作泡菜时，为缩短发酵周期，腌制前可加入乳酸菌。取少量酸奶，用无菌蒸馏水稀释后，再用________蘸取少量的稀释液，在MRS 乳酸菌专用培养基的平板上划线，以获得乳酸菌单菌落。下图所示的划线分离操作，正确的是________。
（2）泡菜腌制过程中，会产生有机酸、醇类和亚硝酸盐，其中醇类是由_______进行厌氧呼吸产生。亚硝酸盐对人体有害，为测定泡菜中亚硝酸盐含量，从泡菜中提取亚硝酸盐，与_______发生重氮化反应，再与N-1-萘基乙二胺偶联，形成紫红色产物。然后用光程为1cm 的_______，在550nm 光波下测定光密度值，与由一直浓度梯度亚硝酸钠制作的_______比对，计算样品中亚硝酸盐的含量。
（3）已知乳酸菌中的亚硝酸还原酶能降解亚硝酸盐。在一定的腌制时间内，随着腌制时间的延长，泡菜中亚硝酸盐含量逐渐降低，是由于在厌氧和_______环境下亚硝酸盐被亚硝酸还原酶降解。
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回答下列有关微生物培养及利用问题：
（1）在腐乳制作的发酵过程中发挥主要作用的生物属于 （原核生物／真核生物）。
（2）泡菜的制作原理是利用蔬菜中的糖分在乳酸菌的作用下发酵腌制而成，用反应式表示其原理为 。
（3）微生物培养基除需要充足的碳源、氮源、无机盐和水外，还需要满足微生物生长对 、
和 的需求。
（4）下表为某种微生物的培养基配方：
上表培养基中的物质溶解后，用蒸馏水定容到1 000 mL。
此培养基可以用于分离出能 的细菌，采用 （方法）接种，
为了保证结果准确，一般选择菌落数在 的平板计数。
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回答下列（一）（二）小题
（一）请回答泡菜制作以及乳酸菌分离纯化有关问题
（1）制作泡菜时，所用盐水需煮沸，其目的是________。为了缩短制作时间，可在冷却后的盐水中加入少量陈泡菜液，加入少量陈泡菜液的作用是________。从开始制作到泡菜品质最佳这段时间内，泡菜液逐渐变酸。这段时间内泡菜坛中乳酸菌和其他杂菌的消长规律是________。
（2）某同学尝试从新鲜的泡菜滤液中分离纯化乳酸菌。首先需要用________对泡菜液进行梯度稀释，之后用________法接种到灭菌的培养基上，进行培养。培养过程不需要的操作是________（A．倒置 B．恒温 C．无氧 D．充入CO2）
（二）白菜、甘蓝均为二倍体，体细胞染色体数目分别为 20、18。“白菜—甘蓝”是用细胞工程的方法培育出来的蔬菜新品种，它具有生长期短、耐热性强和易于储藏等优点。下图是“白菜—甘蓝”的杂交过程示意图，回答以下问题：
（1）为了得到原生质体需在0．5—0．6mol/L的__________环境中用_______来处理白菜细胞和甘蓝细胞。
（2）通常用________诱导原生质体融合，融合完成的标志是 ____________。在组织培养的过程中，植株幼苗的根、芽完全长成，将幼苗移至__________中，保持80%湿度，并逐渐降低湿度，直到与自然湿度接近后，移栽至土壤定植。
（3）通常情况下，白菜和甘蓝有性杂交是不能成功的，原因是____，若对白菜和甘蓝采用杂交育种 方法能成功的话，则得到的后代应含的染色体数和通过图示方法所获得的植株的染色体数分别是_____。
（4）植物体细胞杂交技术和传统杂交技术相比的优点是 _____________。
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回答下列有关泡菜制作的问题
（1）制作泡菜时，所用盐水需煮沸，其目的是 ，为了缩短制作时间，有人还会在冷却后的盐水中加入少量陈泡菜液，加入陈泡菜液的作用是 。
（2）泡菜制作过程中，乳酸发酵的过程即为乳酸菌进行 的过程。该过程发生在乳酸菌细胞的 中。
（3）泡菜制作过程中影响亚硝酸盐含量的因素有 、 和 等。
（4）从开始制作到泡菜品质昂佳这段时间内，泡菜液逐渐变酸。这段时闻内泡菜坛中乳 酸菌和其他杂菌的消长规律是 ，原因是 。
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回答下列有关泡菜制作的问题:
(1)制作泡菜时,所用盐水需煮沸,其目的是 。
为了缩短制作时间,有人还会在冷却后的盐水中加入少量陈泡菜液,加入陈泡菜液的作用是 。
(2)泡菜制作过程中,乳酸发酵的过程即为乳酸菌进行 的过程。该过程发生在乳酸菌细胞的 中。
(3)泡菜制作过程中影响亚硝酸盐含量的因素有 、 和 等。
(4)从开始制作到泡菜品质最佳这段时间内,泡菜液逐渐变酸,这段时间内泡菜坛中乳酸菌和其他杂菌的消长规律是 ,原因是 ________ 。
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回答下列 （一）、（二）小题：
（一）回答与泡菜腌制和亚硝酸盐测定有关的问题：
（1）制作泡菜时，为缩短发酵周期，腌制前可加入一些雪“陈泡菜汁”，这相当于加入了一些经过___________的发酵菌种；还可以采取用热水短时间浸泡蔬菜的手段，此项措施能缩短发酵时间的原因是___________________________________________________。
（2）泡菜腌制过程中，会产生有机酸、醇类和亚硝酸盐，其中醇类是由假丝酵母进行________________ 呼吸产生的。腌制过程需要控制时间、温度和食盐的用量。食盐过量会导致“咸而不酸”，原因是_____________。
（3）家庭制作泡菜过程并没有实行严格的无菌操作就能成功，请解释原因？_____________________________________ 。
（4）亚硝酸盐对人体有害，而它在泡菜的腌制过程中有先增后减的变化规律，所以需要测定其含量来确定泡菜的可食用时间，通常应用光电比色法进行亚硝酸盐的定量。泡菜样品处 理环节加硫酸锌是为了_____________________； 氢氧化钠用来________________；样品测定时加 60%乙酸创设了显色反应所需要的酸性环境；样品及亚硝酸盐标准溶液加显色剂后需要_____________________________25min， 使用相同光程的比色杯在 550nm 光波条件下测 OD 值。
（二）回答与基因工程和生物克隆有关的问题：
MseⅠ、PstⅠ、EcoRⅠ三种限制酶的识别序列及切割位点分别是 GAAT↓TAATTC、C↓TGCAG、G↓AATTC，如图 1、图 2 中箭头表示相关限制酶的酶切点。图 3 表示利用基因工程生产胰岛素的三种途径。图 4 表示改造哺乳动物遗传特性的三种途径。请据图回答问题。
（1）若要用如图 1 和图 2 中的质粒和外源 DNA 构建重组质粒，需要对质粒进行改造，构 建新的限制酶切位点。在构建新的限制酶切位点的过程中需要使用___________、DNA 连接酶和DNA 聚合酶等工具酶。
（2）图 3 中的转基因羊通常被称为生物反应器，它基于基因工程技术，将外援基因导入其基因组并_______________，生产价格低廉的蛋白质药物，具有光明的发展前景。导入受体细胞B 常用方法是_________， ④过程也可以培养到______________，再从培养液中提取。导入受体细胞C 首先使用Ca2+处理使其吸收周围的 DNA 分子，之后将细胞 C 与图中 M 溶于_________中，完成转化过程。
（3）图 4 中获得动物 1 的受体细胞通常是___________。根据图示操作步骤推测动物 2 与动物 3 的不同在于____________________________________。
（4）干细胞科技发展至今，已进入以脐带、胎盘等组织为主要干细胞来源的全新时代。目前国内干细胞临床研究超过半数采用脐带或胎盘干细胞。利用胎盘干细胞具有发育全能性的特点，临床上可以用于_____________________，从而挽救患者的生命。
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某校同学在实验室开展生物技术实践活动．请回答下列有关问题：
（1）A组同学制作泡菜．配制盐水时水与盐的比为___________，在泡菜腌制的过程中，要注意控制腌制的时间、温度和食盐的用量等条件；泡菜坛有时会长一层白膜，这层白膜是由于___________形成的。
（2）B组同学制作腐乳．在制作腐乳过程中，在腐乳表面往往会有一层致密的皮，这层皮实际上是微生物的 __________，对人体无害；配制卤汤时酒的含量应控制在__________ ．
（3）C组同学制作蓝莓果酒与果醋．在蓝莓果酒制作过程中，在_____________的发酵液中，酵母菌可以生长繁殖，而绝大多数其他微生物都因无法适应这一环境而受到抑制。在变酸的酒的表面观察到的菌膜是由___________大量繁殖而形成的，其可在缺少糖源时将乙醇变为___________，然后变为醋酸．