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一个由英国伦敦帝国学院和芬兰图尔库大学的科学家组成的研究小组日前开发出一种通过大肠杆菌制造丙烷的新技术。科研人员要对大肠杆菌进行研究和利用，首先要纯化大肠杆菌，请结合所学知识，回答下列问题：
（1）纯化大肠杆菌首先需要制备牛肉膏蛋白胨固体培养基，其步骤是计算、称量、溶化、灭菌、______。对培养基进行灭菌的方法是_______________，检验培养基是否有杂菌污染的最有效方法是_________________。
（2）可以估算出样品中大肠杆菌数量的接种方法是_________，用该方法得到的结果一般比实际值_____（填“偏大”或“偏小”）。
（3）某实验小组将得到的菌株接种到液体培养基中并混匀，一部分进行静置培养，另一部分进行振荡培养。结果发现：振荡培养的细菌比静置培养的细菌生长速度快。分析其原因 是振荡培养能提高培养液中_____的含量和营养物质的利用率。使用过的培养基及培养物必须经过_______后才能丢弃，以防止培养物扩散。
（4）如果要检测食品中是否含有大肠杆菌，需要在培养基中加入_______（填物质），观察是否出现_____（填颜色）的菌落。
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D-阿洛酮糖是近年发现的一种具有特殊 保健功能的新型功能性因子，它具有改善肠道菌群、降低血糖、抗龋齿等生理功能。 科研人员以重组大肠杆菌为实验材料、对利用固定化细胞技术生产D-阿洛酮糖进行了相关研究回答下列问题：
（1）科研人员在研究中以D一果糖做为底物，说明该重组大肠杆菌能合成________________________的酶。
（2）实验中科研人员利用海藻酸钠为载体，说明该实验是用___________来固定细胞的，而该方法一般不用于酶固定化的原因是_______________________________．用该方法固定细胞时要在溶化好的海藻酸钠中加入重组大肠杆菌后进行充分搅拌的目的是___________________________。
（3）为研究固定化细胞的pH稳定性进行了相关实验，结果见图：
该实验中的对照组是_____________细胞组，在实验中要用到不同pH的缓冲液，缓冲液除了能用来控制发酵所需pH外，还能___________________．为了防止其他做生物的污染对实验结果的影响，细胞固定化要_________________ 条件下进行。根据实验结果，该实验的结论是固定化细胞比游离细胞的pH稳定性高，得出这一结论的依据是_____________________________________________________________。
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2012年4月，世界首例转乳糖酶基因奶牛“克拉斯”在我国内蒙古大学生命科学院生物制造重点实验室诞生。2011年5月，科研人员在一头黑白花奶牛（甲）怀孕45天的一个胎儿（乙）中提取成纤维细胞，然后用病毒作运载体把乳糖酶基因转到该细胞中，接着再将该细胞注入到去核的卵母细胞中，再在体外将该杂合细胞培养成早期胚胎，然后将胚胎移植到代孕母牛（丙）的子宫内，283天后，代孕母牛正常分娩，“克拉斯”就此诞生；科研人员预期，“克拉斯”所产的牛奶中，乳糖含量将大大降低，这样的牛奶适合于乳糖不耐症的人群的饮用。
（1）人类婴幼儿时期以乳汁为食，此时小肠上皮细胞是能够产生乳糖酶的，但成年后乳汁摄入很少，尤其在亚洲人群中，乳糖酶基因的表达受到抑制，这体现了基因表达在 上的差异。
（2）“克拉斯”是否是一头真正的转基因牛，可以对其基因进行检测，检测的原理是 。
（3）“克拉斯”转入的目的基因是 ，该基因只在 细胞中表达。
（4）将早期胚胎移植到代孕母牛（丙）子宫内时，必须对丙注射 ，使其子宫适合于胚胎的着床，囊胚时期的 细胞发育为胎膜和胎盘，可与子宫建立正常的生理和组织联系。
（5）“克拉斯”的培育过程涉及的生物技术有 、 、 。
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2012年4月，世界首例转乳糖酶基因奶牛“克拉斯”在我国内蒙古大学生命科学院生物制造重点实验室诞生。2011年5月，科研人员在一头黑白花奶牛（甲）怀孕45天的一个胎儿（乙）中提取成纤维细胞，然后用病毒作运载体把乳糖酶基因转到该细胞中，接着再将该细胞注入到去核的卵母细胞中，再在体外将该杂合细胞培养成早期胚胎，然后将胚胎移植到代孕母牛（丙）的子宫内，283天后，代孕母牛正常分娩，“克拉斯”就此诞生；科研人员预期，“克拉斯”所产的牛奶中，乳糖含量将大大降低，这样的牛奶适合于乳糖不耐症的人群的饮用。
（1）人类婴幼儿时期以乳汁为食，此时小肠上皮细胞是能够产生乳糖酶的，但成年后乳汁摄入很少，尤其在亚洲人群中，乳糖酶基因的表达受到抑制，这体现了基因表达在 上的差异。
（2）“克拉斯”是否是一头真正的转基因牛，可以对其基因进行检测，检测的原理是 。
（3）“克拉斯”转入的目的基因是 ，该基因只在 细胞中表达。
（4）将早期胚胎移植到代孕母牛（丙）子宫内时，必须对丙注射 ，使其子宫适合于胚胎的着床，囊胚时期的 细胞发育为胎膜和胎盘，可与子宫建立正常的生理和组织联系。
（5）培育“克拉斯”的生殖方式为_________________________。“克拉斯”的培育过程涉及的生物技术主要有________________________________。（至少答两点）
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2012年4月，世界首例转乳糖酶基因奶牛“克拉斯”在我国内蒙古大学生命科学院生物制造重点实验室诞生。2011年5月，科研人员在一头黑白花奶牛（甲）怀孕45天的一个胎儿（乙）中提取成纤维细胞，然后用病毒作运载体把乳糖酶基因转到该细胞中，接着再将该细胞注入到去核的卵母细胞中，再在体外将该杂合细胞培养成早期胚胎，然后将胚胎移植到代孕母牛（丙）的子宫内，283天后，代孕母牛正常分娩，“克拉斯”就此诞生；科研人员预期，“克拉斯”所产的牛奶中，乳糖含量将大大降低，这样的牛奶适合于乳糖不耐症的人群的饮用。
（1）人类婴幼儿时期以乳汁为食，此时小肠上皮细胞是能够产生乳糖酶的，但成年后乳汁摄入很少，尤其在亚洲人群中，乳糖酶基因的表达受到抑制，这体现了基因表达在 上的差异。
（2）“克拉斯”是否是一头真正的转基因牛，可以对其基因进行检测，检测的原理是 。
（3）“克拉斯”转入的目的基因是 ，该基因只在 细胞中表达。
（4）将早期胚胎移植到代孕母牛（丙）子宫内时，必须对丙注射 ，使其子宫适合于胚胎的着床，囊胚时期的 细胞发育为胎膜和胎盘，可与子宫建立正常的生理和组织联系。
（5）“克拉斯”的培育过程涉及的生物技术有 、 、 。
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2012年4月，世界首例转乳糖酶基因奶牛“克拉斯”在我国内蒙古大学生命科学院生物制造重点实验室诞生。2011年5月，科研人员在一头黑白花奶牛（甲）怀孕45天的一个胎儿（乙）中提取成纤维细胞，然后用病毒作运载体把乳糖酶基因转到该细胞中，接着再将该细胞注入到去核的卵母细胞中，再在体外将该杂合细胞培养成早期胚胎，然后将胚胎移植到代孕母牛（丙）的子宫内，283天后，代孕母牛正常分娩，“克拉斯”就此诞生；科研人员预期，“克拉斯”所产的牛奶中，乳糖含量将大大降低，这样的牛奶适合于乳糖不耐症的人群的饮用。
（1）人类婴幼儿时期以乳汁为食，此时小肠上皮细胞是能够产生乳糖酶的，但成年后乳汁摄入很少，尤其在亚洲人群中，乳糖酶基因的表达受到抑制，这体现了基因表达在________上的差异。
（2）“克拉斯”是否是一头真正的转基因牛，要对其进行检测，检测的原理是________。
（3）“克拉斯”转入的目的基因是________，该基因只在________细胞中表达，其表达产物能催化乳糖水解为________；克拉斯的绝大多数遗传信息来自于________（填甲或乙或丙）。
（4）将早期胚胎移植到代孕母牛（丙）子宫内时，必须对丙注射________，使其子宫适合于胚胎的着床，原肠胚时期的________细胞发育为胎膜和胎盘，可与子宫建立正常的生理和组织联系。
（5）“克拉斯”的培育过程涉及的生物技术有________、________、________。
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包头大靑山南坡生态修复工程中，科研人员创新运用“荒山引种、定向组培、智能育苗、高效移栽”的超旱生培育技术，极大提高了引种植物的存活率。例如科研人员将大肠杆菌中的海藻糖合成酶基因导入植物中并获得有效表达，使“工程植物”增强耐早性和耐寒性。请据资料回答下列问题：
（1）获得海藻糖合成酶基因的途径除了从该细菌中直接分离目的基因外，还可利用___________技术扩增。该技术反应体系中除含缓冲液、模板DNA、dNTP（包含dATP、dCTP、dGTP、dTTP）、引物以外，还应含有___________；其中，dNTP 的作用是___________，引物应选用上图中的___________（填上图中标号）。
（2）将海藻糖合成酶基因与运栽体结合时必须用___________酶和DNA连接酶。在基因工程中作为运载体必须具备相应的条件，例如应具有___________以便进行筛选。
（3）由转基因植物细胞经过___________和___________形成胚状体和试管苗。
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为探究细菌间的相互作用，科研人员利用基因工程技术，对无法利用乳糖的大肠杆菌进行改造。
（1）将乳糖酶基因转入大肠杆菌，获得营养菌（能利用乳糖）；将抗生素CRO降解酶基因转入大肠杆菌，获得抗性菌。将得到的两种菌分别接种于__________培养基进行扩大培养。
（2）将两种菌分别用__________进行一系列梯度稀释，然后用__________法单独接种于加入含CRO并以乳糖为唯一碳源的培养基中， 培养一段时间后，培养皿中均未出现菌落，推测两种菌___________（填“发生”或“未发生”）可遗传变异。若将两种菌混合接种，则培养一段时间后，培养皿中有菌落长出，且同时含有两种菌，推测两种菌实现了“互利共生”。
（3）为进一步探究上述现象的原因，科研人员设计了图1所示装置进行实验。
①在接种了营养菌和抗性菌混合菌液的培养板左侧，加入含__________的培养基，培养基可从左侧逐渐扩散到混合菌液培养板上。定期检测混合菌液培养板上两种菌的数量，得到图2所示结果。
②0~10 h，营养菌的数量变化是__________。
③10~45 h，营养菌和抗性菌的变化趋势是二者均显著增加并逐渐__________，其原因是__________。
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研究人员在分离大肠杆菌的多聚核糖体时，发现核糖体与DNA及一些蛋白质复合物耦连在一起，形成复合结构，其组成如下图所示。下列叙述错误的是（ ）
A.核糖体通过mRNA与质粒DNA发生耦连
B.大肠杆菌的转录过程和翻译过程同时进行
C.在mRNA上，核糖体的移动方向为a→b
D.启动子和终止子决定了翻译的开始和终止
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大肠杆菌是遗传学和微生物学中经典的模式生物。科研人员要对大肠杆菌进行研究，首先要纯化大肠杆菌，请结合所学知识，回答下列问题。
（1）纯化大肠杆菌首先需要制备相应的培养基，除考虑微生物所需的营养条件外，还要考虑____________、温度、氧气等条件。
（2）在大肠杆菌的实验室培养过程中，获得纯净大肠杆菌的关键是____________，因此，在接种前需要检测培养基是否被污染。对于固体培养基应采用的检测方法是____________。
（3）通过培养，可以估算出样品中大肠杆菌数量的常用接种方法是____________，用该方法得到的结果一般比实际值____________（“偏大”或“偏小”），这是因为____________。
（4）“滤膜法”也可计数水样中的大肠杆菌。将过滤过待测水样的滤膜紧贴在培养基上的操作属于微生物培养中的____________（填一操作步骤名称）。采用“滤膜法”对受污染的河流水体进行大肠杆菌数目的测定时，经过培养，得到菌落数分别为33、37、32、38的4个平板（4个平板上接种稀释液用量均为0.1mL，稀释倍数均为102），那么每升河水中约含大肠杆菌____________个。
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