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稻田除草后残留的除草剂A和除草剂B会污染环境。某科研小组欲从土壤中筛选能同时分解除草剂A和除草剂B的微生物（除草剂A和除草剂B均可作为氮源）。请回答下列问题：
（1）取土样：取多年_____________的稻田土壤放入塑料瓶中备用。
（2）配制培养基：将除草剂A和除草剂B混合后，用于制液体培养基甲取部分液体培养基甲，并加入_____________（填凝固剂名称）配制固体培养基乙。为了检测配制的固体培养基乙是否灭菌合格，需要进行的操作是将一部分空白培养基乙培养一段时间，观察_____________。
（3）富集培养：将适量土样加入培养液甲中，置于恒温摇床上振荡培养一段时间。富集培养的目的是______________________；富集培养过程中振荡的作用是使所培养的微生物能充分利用___________。
（4）分离纯化：将富集培养的菌液涂布到培养基乙之前，需要进行的操作是_____________。接种培养后，最终获取优势菌落，保存菌种。
（5）复选：为进一步鉴定上一步骤中分离纯化的优势菌种能否同时分解除草剂A和除草剂B，还需配制两种培养基——丙和丁，而后将上述优势菌种分别接种到培养基丙和丁中进行培养观察，则培养基丙和丁的营养组成特点是__________________________。
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有机农药苯磺隆是一种除草剂，长期使用会污染环境。科研人员通过人工筛选获得高效的苯磺隆降解菌，将其扩大培养后投入污染土壤中，可将土壤中的苯磺隆降解。请回答下列问题：
（1）欲选择性获得能降解苯磺隆的降解菌，可在被有机农药苯磺隆污染的土壤中取样，并在含有_______、________ 及水和无机盐等的基本培养基上添加_______进行选择培养。
（2）若要测定培养液中选定菌种的菌体数，可在显微镜下用血细胞计数板直接计数，也可选用________方法统计活菌数目。
（3）将筛选的苯磺隆降解菌固定在一定的空间内定殖于土壤中能提高降解效率，固定苯横隆降解菌的一般方法为包埋法，不使用化学结合法和物理吸附法的原因是__________。
（4）研究人员从苯磺隆降解菌中分离出苯磺隆降解酶，分离该降解酶的常用方法有凝胶色谱法和__________。凝胶色谱法分离蛋白质的原理是根据____________进行分离。
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有机农药苯磺隆是一种除草剂，长期使用会污染环境。科研人员通过人工筛选获得高效的苯磺隆降解菌，将其扩大培养后投入污染土壤中，可将土壤中的苯磺隆降解。请回答下列问题：
（1）欲选择性获得能降解苯磺隆的降解菌，可在被有机农药苯磺隆污染的土壤中取样，并在含有碳源、氮源及水和无机盐等营养物质的培养基上添加______________进行选择培养。在降解菌数量足够多时，适当提高样品中苯磺隆的浓度能使苯磺隆降解效率增加，其原因是_____________（从酶与底物的相互关系角度分析）。扩大培养时，苯磺隆降解菌所用的培养基从物理性质划分属于_____________培养基。
（2）将筛选的苯磺隆降解菌固定在一定的空间内能提高降解效率，固定苯磺隆降解菌一般用____________，原因是_________________________。
（3）研究人员从苯磺隆降解菌中分离出苯磺隆降解酶，分离该降解酶的常用方法有凝胶色谱法和______________。凝胶色谱法分离蛋白质的原理是根据____________进行分离。
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除草剂在现代农业生产中有广泛的应用，有机农药苯磺隆是其中之—，但是长期使用会污染环境。研究发现，苯磺隆能被土壤中某些微生物降解，但对具体的微生物及其降解机制并不明确，为此，科研人员进行了相关实验：
（1）实验一:分离土壤中降解苯磺隆的菌株。
①微生物生长繁殖所需的主要营养物质有碳源、水、___________四类，选择培养所用的培养基只能以苯磺隆作为唯一碳源，其原因是___________。
②纯化菌株时，通常使用的划线工具是___________。接种过程需在酒精灯火焰旁进行，其达到的目的是___________。划线的某个平板培养后，第一划线区域的划线上都不间断地长满了菌，第二划线区域所划的第一条线上无菌落，其他划线上有菌落。造成划线无菌落可能的操作失误有___________。
（2）实验二：探究苯磺隆的降解机制。具体操作为：将该菌种的培养液过滤离心，取上清液做下图所示实验。
该实验的假设是___________，该实验设计是否合理？为什么？___________。
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除草剂在现代农业生产中有广泛的应用，有机农药苯磺隆是其中之—，但是长期使用会污染环境。研究发现，苯磺隆能被土壤中某些微生物降解，但对具体的微生物及其降解机制并不明确，为此，科研人员进行了相关实验：
（1）实验一:分离土壤中降解苯磺隆的菌株。
①微生物生长繁殖所需的主要营养物质有碳源、水、___________四类，选择培养所用的培养基只能以苯磺隆作为唯一碳源，其原因是___________。
②纯化菌株时，通常使用的划线工具是___________。接种过程需在酒精灯火焰旁进行，其达到的目的是___________。划线的某个平板培养后，第一划线区域的划线上都不间断地长满了菌，第二划线区域所划的第一条线上无菌落，其他划线上有菌落。造成划线无菌落可能的操作失误有___________。
（2）实验二：探究苯磺隆的降解机制。具体操作为：将该菌种的培养液过滤离心，取上清液做下图所示实验。
该实验的假设是___________，该实验设计是否合理？为什么？___________。
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2，4-D是一类广泛应用于单子叶作物田间的除草剂，其大量施用导致土壤污染。某研究小组欲从2，4-D污染土壤样品中筛选2，4-D降解菌株，采集土样后进行如图操作：
富集培养1组培养液成分：基础无机盐培养液+葡萄糖+2，4-D
富集培养2组培养液成分：基础无机盐培养液+2，4-D
基础无机盐培养液成分：MgSO4、（NH4）2SO4、FeS4、KH2PO4，Na2HPO4
回答下列问题。
（1）微生物实验要严格防止杂菌污染，划线纯化时对接种环可采用________灭菌。
（2）在特定环境中只让一种来自同一祖先的微生物群体生存的技术叫作纯化。纯化接种的方法有________和平板划线法。纯化培养时，需在基础无机盐培养液中添加以2，4-D为唯一碳源，还要添加_______。
（3）富集培养目的是_____，富集培养________（填“1”或“2”）组菌落数多，判断依据是______。
（4）欲检测所获得的不同菌株对2，4-D降解能力大小，可将目的菌分别接种在相同浓度的2，4-D培养液中，培养一段时间后，检测_____，评估其降解能力。
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（五）分析回答下列微生物及其培养问题
农业上广泛使用的除草剂在土壤中不易被分解，长期使用会污染土壤。为了修复被污染的土壤，可按下图程序选育出能降解该除草剂的细菌。（注：已知该除草剂是一种含氮有机物；含一定量该除草剂的培养基不透明。）
1.微生物培养过程中需要的营养物质主要有________________
2.培养基的配制主要包括如下步骤: ①溶化，②调pH，③高温高压灭菌，④称量。这些步骤正确的顺序是_____________________。
3.实验中进行平板划线操作（如图乙、丙所示）的目的是______________ 。在具体操作时，首先要将接种环通过（填编号）___________（①紫外线；②酒精灯灼烧；③高温高压）灭菌;第二次及以后的划线，总是从________开始。
4.为了选育出能降解除草剂的细菌，在配置培养基时需添加一定量的该型除草剂，并以该型除草剂作为__________（营养来源），其原因是______________。
5.如果筛选能降解该型除草剂的细菌结果如图丁所示（A—E分别表示不同的菌株），其中的B、D菌株周围无透明圈形成，说明_______________；如果从A—E菌株中选育高效的能降解该型除草剂的细菌，应选育菌株____________。
6.实验中采用稀释涂布平板法检测水样中的细菌含量。将1mL水样稀释100倍，在3个平板上用涂布法分别接入0.1mL稀释液；经适当培养后，3个平板上的菌落数分别为39、38和37。据此可得出每升水样中的活菌数为_________。
7.为探究此除草剂的降解机制，将该菌种的培养液过滤离心，取上清液做图戊所示实验。该实验的假设是目的菌株能分泌降解苯磺隆的蛋白质；该实验设计缺少对照处理，正确的对照处理是_____________________ 。
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[生物——选修1:生物技术实践]
莠去津是一种含氮的有机除草剂，在土壤中不易降解。为修复被莠去津污染的土壤，科研人员通过如图所示过程选育可高效降解莠去津的细菌（目的菌）。结合所学知识，回答下列问题：
（1）培养皿中的培养基比培养瓶中的培养基多添加了_________作为凝固剂，从功能上讲，这两种培养基都属于_________培养基。若过程②使用的是平板划线法，则对接种环常用的灭菌方法是________。
（2）分解莠去津的微生物属于___________（自养/异养）微生物，培养若干天后，应选择培养液中莠去津含量___________的培养瓶进行过程②。为了避免杂菌污染，接种操作需要在___________附近进行。图中培养过程重复多次的主要目的是___________。
（3）若要获得更高效分解莠去津的的微生物，常用的方法是______________________。
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浮萍是简单的单子叶水生漂浮植物，被广泛应用于除草剂的筛选、水环境污染的修复；浮萍的淀粉和蛋白含量高而被开发为生物质能和优质蛋白生产的优势原料。本研究拟通过在浮萍中表达大豆液泡膜抗盐基因来增强浮萍的抗盐性，以期获得能够应用于盐碱水域生长，并净化污水的浮萍株系。
（1）在浮萍的生长繁殖过程中，除自身分泌的激素调节外，还可以通过添加______________，以提高淀粉和蛋白质的含量。
（2）通过分析农杆菌转GUS基因的效率，筛选能进行高效的转化的菌种。GUS组织化学染色是将外植体浸没于GUS染液中染色。GUS瞬时表达率=（有相应级别GUS基因瞬时表达的外植体数/外植体总数）╳100%。使用不同农杆菌对抗性浮萍愈伤组织的GUS瞬时表达率检测结果如下图，通过检测结果显示________________________________，因此浮萍遗传转化确定选用农杆菌EHA105。
（3）本实验使用添加不同浓度乙酰丁香酮的菌液侵染浮萍，据下图实验结果发现随着____________，侵染效率_________________。乙酰丁香酮浓度为100μmol/L时，浮萍的侵染效率比乙酰丁香酮浓度为200μmol/L时高出了_____%。
（4）在农杆菌介导的遗传转化过程中，防止农杆菌过度生长是转基因成败的重要环节。植物材料和农杆菌共培养结束后，转化组织需要脱菌培养，需要用抑菌类抗生素抑制农杆菌的生长，以防止农杆菌过度生长对转化组织产生毒害作用。因此选择合适的抑菌抗生素和浓度很关键。OD600指的是某种溶液在600nm波长处的吸光值。吸光值正比于溶液中的吸光物质的浓度，通常用于细菌细胞密度(OD600)测量。由下图可知，____________________对农杆菌EHA105都有很好的抑制效果；其最佳浓度都选用300mg/L的原因是______________________。
（5）浮萍已被成功用于植物生物反应器方面的开发和生产。植物生物反应器是指利用植物__________________或整株植株，大量生产具有重要功能的蛋白质，如抗体、疫苗或次生代谢产物等。与动物细胞和微生物发酵相比，具有明显的优势，如植物细胞具有______，能够脱分化和再分化。
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氯嘧磺隆是一种常用于除大豆田地阔叶杂草的有机物除草剂，长期使用氯嘧磺隆造成土壤和水体的污染。某同学将从污染的土壤中筛选出高效降低氯嘧磺隆的分解菌。用已学知识回答下列问题：
（1）培养微生物的培养基一般都含有水、______和碳源、氮源。
（2）在筛选高效分解菌过程中，应将土壤样品稀释液接种到以__________为唯一碳源的固体培养基上，该培养基从功能上看属于__________培养基。
（3）培养微生物的培养基常采用___________方法惊醒灭菌。
（4）统计样品活菌数目时，常采用的方法是 ___________。将10g土样进行浓度梯度逐步稀释后，在4个培养基平板上均接种稀释倍数为103的土壤样品液0.1ml，培养一段时间后，平板长出的菌落数分别为189、210、204和434，由此得出每克土壤样品中的分解菌数量为________个。用该方法统计的活菌数往往比真实值低的原因是 ______________________________________。
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