有机农药苯磺隆是一种除草剂，长期使用会污染环境。科研人员通过人工筛选获得高效的苯磺隆降解菌...

有机农药苯磺隆是一种除草剂，长期使用会污染环境。科研人员通过人工筛选获得高效的苯磺隆降解菌，将其扩大培养后投入污染土壤中，可将土壤中的苯磺隆降解。请回答下列问题：

（1）欲选择性获得能降解苯磺隆的降解菌，可在被有机农药苯磺隆污染的土壤中取样，并在含有_______、________ 及水和无机盐等的基本培养基上添加_______进行选择培养。

（2）若要测定培养液中选定菌种的菌体数，可在显微镜下用血细胞计数板直接计数，也可选用________方法统计活菌数目。

（3）将筛选的苯磺隆降解菌固定在一定的空间内定殖于土壤中能提高降解效率，固定苯横隆降解菌的一般方法为包埋法，不使用化学结合法和物理吸附法的原因是__________。

（4）研究人员从苯磺隆降解菌中分离出苯磺隆降解酶，分离该降解酶的常用方法有凝胶色谱法和__________。凝胶色谱法分离蛋白质的原理是根据____________进行分离。

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有机农药苯磺隆是一种除草剂，长期使用会污染环境。科研人员通过人工筛选获得高效的苯磺隆降解菌，将其扩大培养后投入污染土壤中，可将土壤中的苯磺隆降解。请回答下列问题：

（1）欲选择性获得能降解苯磺隆的降解菌，可在被有机农药苯磺隆污染的土壤中取样，并在含有碳源、氮源及水和无机盐等营养物质的培养基上添加______________进行选择培养。在降解菌数量足够多时，适当提高样品中苯磺隆的浓度能使苯磺隆降解效率增加，其原因是_____________（从酶与底物的相互关系角度分析）。扩大培养时，苯磺隆降解菌所用的培养基从物理性质划分属于_____________培养基。

（2）将筛选的苯磺隆降解菌固定在一定的空间内能提高降解效率，固定苯磺隆降解菌一般用____________，原因是_________________________。

（3）研究人员从苯磺隆降解菌中分离出苯磺隆降解酶，分离该降解酶的常用方法有凝胶色谱法和______________。凝胶色谱法分离蛋白质的原理是根据____________进行分离。

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除草剂在现代农业生产中有广泛的应用，有机农药苯磺隆是其中之—，但是长期使用会污染环境。研究发现，苯磺隆能被土壤中某些微生物降解，但对具体的微生物及其降解机制并不明确，为此，科研人员进行了相关实验：

（1）实验一:分离土壤中降解苯磺隆的菌株。

①微生物生长繁殖所需的主要营养物质有碳源、水、___________四类，选择培养所用的培养基只能以苯磺隆作为唯一碳源，其原因是___________。

②纯化菌株时，通常使用的划线工具是___________。接种过程需在酒精灯火焰旁进行，其达到的目的是___________。划线的某个平板培养后，第一划线区域的划线上都不间断地长满了菌，第二划线区域所划的第一条线上无菌落，其他划线上有菌落。造成划线无菌落可能的操作失误有___________。

（2）实验二：探究苯磺隆的降解机制。具体操作为：将该菌种的培养液过滤离心，取上清液做下图所示实验。

该实验的假设是___________，该实验设计是否合理？为什么？___________。

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除草剂在现代农业生产中有广泛的应用，有机农药苯磺隆是其中之—，但是长期使用会污染环境。研究发现，苯磺隆能被土壤中某些微生物降解，但对具体的微生物及其降解机制并不明确，为此，科研人员进行了相关实验：

（1）实验一:分离土壤中降解苯磺隆的菌株。

①微生物生长繁殖所需的主要营养物质有碳源、水、___________四类，选择培养所用的培养基只能以苯磺隆作为唯一碳源，其原因是___________。

②纯化菌株时，通常使用的划线工具是___________。接种过程需在酒精灯火焰旁进行，其达到的目的是___________。划线的某个平板培养后，第一划线区域的划线上都不间断地长满了菌，第二划线区域所划的第一条线上无菌落，其他划线上有菌落。造成划线无菌落可能的操作失误有___________。

（2）实验二：探究苯磺隆的降解机制。具体操作为：将该菌种的培养液过滤离心，取上清液做下图所示实验。

该实验的假设是___________，该实验设计是否合理？为什么？___________。

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[生物——选修1:生物技术实践]

莠去津是一种含氮的有机除草剂，在土壤中不易降解。为修复被莠去津污染的土壤，科研人员通过如图所示过程选育可高效降解莠去津的细菌（目的菌）。结合所学知识，回答下列问题：　　

（1）培养皿中的培养基比培养瓶中的培养基多添加了_________作为凝固剂，从功能上讲，这两种培养基都属于_________培养基。若过程②使用的是平板划线法，则对接种环常用的灭菌方法是________。

（2）分解莠去津的微生物属于___________（自养/异养）微生物，培养若干天后，应选择培养液中莠去津含量___________的培养瓶进行过程②。为了避免杂菌污染，接种操作需要在___________附近进行。图中培养过程重复多次的主要目的是___________。

（3）若要获得更高效分解莠去津的的微生物，常用的方法是______________________。

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若长期使用某种除草剂（有机物），会对土壤造成严重污染。如图是从土壤中分离出能降解该除草剂菌株的实验过程。请回答下列问题：

选择土壤→土壤样品选择培养划线纯化获得菌种

（1）为了获取能降解该除草剂的菌株，选择的土壤样品应来自____________。

（2）图中A过程所用的培养基中不能添加其他有机物，理由是____________。若图中B过程在一个平板的5个区域内划线，则划线工具需灼烧灭菌____________次。

（3）图中A、B、C过程所用培养基中应含有四类营养成分，即_______________________。

（4）若要推算该土壤样品中的细菌含量，应采用____________法进行接种。先将1 mL 土壤溶液稀释100倍，然后随机选取6个灭菌处理的平板，其中4个平板上分别接入 0.1 mL稀释液，2个平板未接入稀释液，经适当培养后，6个平板上的菌落数分别为52、49、51、48、0和0。

①由未接入稀释液的平板所长菌落情况，可得出的结论是________________________。

②经计算可得出每毫升土壤溶液中的活菌数为____________个，该结果往往偏小，原因是____________。

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有机磷农药乐果在农业生产中使用广泛，其长期使用会导致土壤中有不同程度的残留。图甲为科研人员从土壤中分离出降解乐果的菌株的流程，图乙为降解乐果的菌株在固体培养基上产生的透明圈，透明圈直径（D）与菌落直径（d）的比值（D/d）代表微生物降解能力的大小，请回答相关问题：

（1）制备该选择培养基时，应以_____为唯一碳源，对培养基灭菌常用的方法是_____。

（2）培养基冷凝后应将平板_____，以防冷凝水落入培养基造成污染。图甲所示平板划线接种的操作过程中，对接种环至少需进行_____次灼烧灭菌。

（3）挑取甲过程分离获得的菌种制成稀释液，采用_____法接种在培养基上，培养3～4 d后观察菌落特征和透明圈的大小，初步筛选出三种优良降解菌株（如表）。

根据实验结果可以确定降解乐果能力最强的菌株是_____（填标号）。

（4）使用乐果显色剂采用比色法检测降解后的乐果残留量，应先制作系列浓度梯度的溶液进行显色反应，下表中3号比色管的乐果浓度应为_____。

如果土壤溶液中乐果浓度为50 mg•L﹣1，降解后约有21%的残留量，则需要将残留液稀释_____（填标号：①5②10③20）倍后，再进行比色。

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【生物——选修1：生物技术实践】（15分）有机农药苯磺隆是一种除草剂，长期使用会污染环境。研究发现，苯磺隆能被土壤中某些微生物降解。分离降解苯磺隆的菌株和探索其降解机制的实验过程如图甲、乙所示。

（1）微生物生长繁殖所需的主要营养物质有碳源、水、________四类，该实验所用的选择培养基只能以苯磺隆作为唯一碳源，其原因是________________________________。

（2）与微生物培养基相比，植物组织培养的培养基常需添加生长素和____________，这些植物激素一般需要事先单独配制成________保存备用。

（3）纯化菌株时，通常使用的划线工具是________。划线的某个平板培养后，第一划线区域的划线上都不间断地长满了菌，第二划线区域所划的第一条线上无菌落，其他划线上有菌落。造成划线无菌落可能的操作失误有________________________________。

（4）为探究苯磺隆的降解机制，将该菌种的培养液过滤离心，取上清液做图乙所示实验。该实验的假设是__________________________，该实验设计是否合理？为什么？_________________　　 。

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【生物—选修 生物技术实践】有机农药苯磺隆是一种除草剂，长期使用会污染环境。研究发现，苯磺隆能被土壤中某些微生物降解。分离降解苯磺隆的菌株和探索其降解机制的实验过程如图甲、乙所示。

（1）微生物生长繁殖所需的主要营养物质有碳源、水、________四类，该实验所用的选择培养基只能以苯磺隆作为唯一碳源，其原因是__________。

（2）与微生物培养基相比，植物组织培养的培养基常需添加生长素和_______，这些植物激素一般需要事先单独配置成_________保存备用。

（3）纯化菌株时，通常使用的划线工具是________。划线的某个平板培养后，第一划线区域的划线上都不间断地长满了菌，第二划线区域的第一条线上无菌落，其它划线上有菌落。造成划线无菌落可能的操作失误有________。

（4）为探究苯磺隆的降解机制，将该菌种的培养液过滤离心，取上清液做图乙所示实验。该实验的假设是________，该实验设计是否合理？为什么？_______。

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有机农药苯磺隆是一种除草剂，长期使用会污染环境。研究发现，苯磺隆能被土壤中某些微生物降解。分离降解苯磺隆的菌株和探索其降解机制的实验过程如图甲、乙所示。

（1）微生物生长繁殖所需的主要营养物质有碳源、水、_________、__________四类。

（2）该实验所用的培养基只能以_________作为唯一碳源，称为__________________。

（3）纯化菌株时，通常使用的划线工具是________。接种时，在第一区域划线后须将该工具_________________________后再划线，在第二次划线时须从第一次划线的末端开始，这样做的目的是_________________________。

（4）为探究苯磺隆的降解机制，将该菌种的培养液过滤离心，取上清液做图乙所示实验。该实验的假设是________________，该实验设计是否合理？若不合理请写出改进的方法____________________。

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