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有机磷农药乐果在农业生产中使用广泛，其长期使用会导致土壤中有不同程度的残留。图甲为科研人员从土壤中分离出降解乐果的菌株的流程，图乙为降解乐果的菌株在固体培养基上产生的透明圈，透明圈直径（D）与菌落直径（d）的比值（D/d）代表微生物降解能力的大小，请回答相关问题：
（1）制备该选择培养基时，应以_____为唯一碳源，对培养基灭菌常用的方法是_____。
（2）培养基冷凝后应将平板_____，以防冷凝水落入培养基造成污染。图甲所示平板划线接种的操作过程中，对接种环至少需进行_____次灼烧灭菌。
（3）挑取甲过程分离获得的菌种制成稀释液，采用_____法接种在培养基上，培养3～4 d后观察菌落特征和透明圈的大小，初步筛选出三种优良降解菌株（如表）。
| 菌株 | 透明圈直径（D）单位：mm | 菌落直径（d）单位：mm | D/d |
| ① | 22.8 | 15.3 | 1.5 |
| ② | 20.7 | 7.7 | 2.7 |
| ③ | 8.2 | 7.5 | 1.1 |
根据实验结果可以确定降解乐果能力最强的菌株是_____（填标号）。
（4）使用乐果显色剂采用比色法检测降解后的乐果残留量，应先制作系列浓度梯度的溶液进行显色反应，下表中3号比色管的乐果浓度应为_____。
| 管号 | 1 | 2 | 3 | 4 | 5 | 6 |
| 乐果浓度/（mg•L﹣1） | 0 | | | | | 1 |
如果土壤溶液中乐果浓度为50 mg•L﹣1，降解后约有21%的残留量，则需要将残留液稀释_____（填标号：①5②10③20）倍后，再进行比色。
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除草剂在现代农业生产中有广泛的应用，有机农药苯磺隆是其中之—，但是长期使用会污染环境。研究发现，苯磺隆能被土壤中某些微生物降解，但对具体的微生物及其降解机制并不明确，为此，科研人员进行了相关实验：
（1）实验一:分离土壤中降解苯磺隆的菌株。
①微生物生长繁殖所需的主要营养物质有碳源、水、___________四类，选择培养所用的培养基只能以苯磺隆作为唯一碳源，其原因是___________。
②纯化菌株时，通常使用的划线工具是___________。接种过程需在酒精灯火焰旁进行，其达到的目的是___________。划线的某个平板培养后，第一划线区域的划线上都不间断地长满了菌，第二划线区域所划的第一条线上无菌落，其他划线上有菌落。造成划线无菌落可能的操作失误有___________。
（2）实验二：探究苯磺隆的降解机制。具体操作为：将该菌种的培养液过滤离心，取上清液做下图所示实验。
该实验的假设是___________，该实验设计是否合理？为什么？___________。
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除草剂在现代农业生产中有广泛的应用，有机农药苯磺隆是其中之—，但是长期使用会污染环境。研究发现，苯磺隆能被土壤中某些微生物降解，但对具体的微生物及其降解机制并不明确，为此，科研人员进行了相关实验：
（1）实验一:分离土壤中降解苯磺隆的菌株。
①微生物生长繁殖所需的主要营养物质有碳源、水、___________四类，选择培养所用的培养基只能以苯磺隆作为唯一碳源，其原因是___________。
②纯化菌株时，通常使用的划线工具是___________。接种过程需在酒精灯火焰旁进行，其达到的目的是___________。划线的某个平板培养后，第一划线区域的划线上都不间断地长满了菌，第二划线区域所划的第一条线上无菌落，其他划线上有菌落。造成划线无菌落可能的操作失误有___________。
（2）实验二：探究苯磺隆的降解机制。具体操作为：将该菌种的培养液过滤离心，取上清液做下图所示实验。
该实验的假设是___________，该实验设计是否合理？为什么？___________。
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有机磷农药是用于防治植物害虫的含磷有机化合物，广泛应用于农业生产中，有时会造成瓜果蔬菜等食品农药残留超标，不少品种对人、畜的毒性很强,人误食后如不及时医治就会危及生命。某班同学欲从土壤中分离高效降解有机磷农药的微生物。请回答下列问题：
（1）为了获得能降解有机磷农药的微生物菌种，可在被有机磷农药污染的土壤中取样，并在含有碳源、氮源及_________等的选择培养基上添加适量的_____________进行选择培养。
（2）在制备固体培养基时需加入的常用凝固剂是__________。若培养基需要调节pH，则应在灭菌之_____________（填“前”或“后”）调节。
（3）该小组在接种前，随机取若干灭菌后的空白平板先培养一段时间，这样做的目的是__________________________________________________。
（4）若要测定培养液中选定菌种的菌体数，既可在显微镜下用 ____________直接计数，也可选用____________________法统计活菌数目。
（5）将获得的3种待选微生物菌种甲、乙、丙分别接种在1L含20mg有机磷农药的相同培养液中培养（培养液中其他营养物质充裕、条件适宜），观察从实验开始到微生物停止生长所用的时间，甲、乙、丙分别为32小时、45小时、16小时，则应选择微生物_____（填“甲”、“乙”或“丙”）作为菌种进行后续培养，理由是_________________________。
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有机磷农药是用于防治植物病虫害的含磷有机化合物,广泛应用于农业生产中，有时会造成瓜果蔬菜等食品农药残留超标，不少品种对人、畜的毒性很强,人误食后如不及时医治就会危及生命,某班同学欲从土壤中分离高效降解有机磷农药的微生物。请回答下列问题：
（1）为了获得能降解有机磷农药的微生物菌种，可在被有机磷农药污染的土壤中取样，并在含有碳源、氮源及_________等的选择培养基上添加适量的_____________进行选择培养。
（2）将获得的3种待选微生物菌种甲、乙、丙分别接种在1L含20mg有机磷农药的相同培养液中培养（培 养液中其他营养物质充裕、条件适宜），观察实验开始到微生物停止生长所用的时间，甲、乙、丙分别为32小时、45小时、16小时，则应选择微生物________（填“甲”“乙”或“丙”）作为菌种进行后续培养，理由是 ________________________________。
（3）制备固体培养基的基本步骤是计算→________→溶化→分装→加棉塞→包扎→_______ →倒平板。
（4）若要测定培养液中选定菌种的菌体数，既可在显微镜下用_______直接计数，也可选用________法统计活菌数目。
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多环芳烃菲在染料、杀虫剂等生产过程中被广泛使用，是土壤、河水中常见的污染物之一。下图表示科研人员从被石油污染的土壤中分离获得能降解多环芳烃菲菌株Q的主要步骤。请回答：
(1)步骤①→③的培养过程中，培养液中加入多环芳烃菲作为唯一碳源，目的是_____________。
(2)步骤①→③的培养过程中，需将锥形瓶放在摇床上振荡，一方面使菌株与培养液充分接触，提高营养物质的利用率；另一方面能______________________________ 。
(3)步骤④用平板划线法纯化菌株Q过程中，在做第二次以及其后的划线操作时，总是从上一次划线的末端开始划线，原因是 ______________________。为了筛选出高效菌株，可比较单菌落周围分解圈的大小,分解圈大说明该菌株的降解能力 _________。
(4)接种环通过灼烧来灭菌，完成步骤④中划线操作,共需灼烧接种环__________次。
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（12分）多环芳烃菲在染料、杀虫剂等生产过程中被广泛使用，是土壤、河水中常见的污染物之一。下图表示科研人员从被石油污染的土壤中分离获得能降解多环芳烃菲的菌株Q的主要步骤。请回答：
（1）步骤①→③的培养过程中，需将锥形瓶放在摇床上振荡，一方面使菌株与培养液充分接触，提高营养物质的利用率；另一方面能 。
（2）步骤④用平板划线法纯化菌株Q过程中，在做第二次以及其后的划线操作时，总是从上一次划线的末端开始划线，原因是 ，同时需要相同条件下培养不接种的培养基平板做对照，采用固体平板培养基培养细菌时要倒置培养，其目的是 。
（3）接种环通过灼烧灭菌，完成步骤④中划线操作，共需灼烧接种环 次。
（4）为了获得分解多环芳烃菲能力更强的菌株，研究人员又对菌种Q进行了诱变处理，得到突变株K。为了进一步鉴定菌株K并比较两种菌株降解多环芳烃菲的能力，设计了下列实验，请补全实验步骤：
①取9只锥形瓶均分成三组，编号A、B、C
②向A、B、C三组锥形瓶中加入 的培养液。
③向A、B、C三组培养液中分别加入 。
④28℃恒温培养3天后，测定 。
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生产中为防治病虫害而大量使用农药，使农产品以及农业生态环境中农药残留严重超标。针对该现状，我国科学家经过多年研究，首创了农药残留微生物降解技术。通过筛选高效农药残留降解菌株，来清除土壤、水体、农产品中的有机污染物。其中有机磷降解菌降解甲基对硫磷（一种含氮有机农药）的效果达100%。
（1）在筛选过程中，应将土壤样品稀释液接种于以____________为唯一氮源的固体培养基上。
（2）获得纯净培养物的关键是________________________，接种前通常应将培养皿进行_______ 灭菌，培养基进行__________ 灭菌。
（3）纯化菌种时，整个操作过程都应在___________ 附近进行。
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（14分）乐果是一种广泛使用且含有机磷的农药,其残毒会对土壤造成严重污染。研究表明，阴沟肠杆菌、枯草芽孢杆菌等都对乐果有降解作用，可以用于修复由乐果造成的农田土壤污染。请分析回答下列问题：
（1）能分解乐果的阴沟肠杆菌、枯草芽孢杆菌等基本都分布在土壤的表层，它们的代谢类型应是________，在生态系统的成分中属于 ________。
（2）为比较阴沟肠杆菌、枯草芽孢杆菌对乐果的降解效率，课外小组的同学作了如下 实验：
①配制液体培养基。配制培养基时，除加入必要的营养物质，还必须加入 ________。将配好的培养基均分为甲、乙两组，进行 ________。
②各取阴沟肠杆菌、枯草芽孢杆菌的新鲜菌液lml，分别接种到上述甲、乙培养基中，适宜条件下培养48h。48h后通过检测 ________，可以比较阴沟肠杆菌、枯草芽孢杆菌对乐果的降解效率。
(3)农田中长期施用乐果会使动物的种类和数量减少。若要调查某农田中华大蟾蜍的种群密度，应采用 ________法。因污染太严重而废弃的农田在污染停止后将发生的群落演替，其类型属于 ________。
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有机磷化合物在农业生产中作为杀虫剂被广泛使用，长期以来因使用其量大、范围广，容易造成水体污染等诸多环境问题。
(1)为了筛选甲胺磷的降解细菌，将农药厂的甲胺磷污染土壤悬液涂布在______________________的固体培养基上进行培养，可以对降解菌进行定向的________。
(2)在分离得到的菌株A中检测到的ophc2蛋白，可以催化甲胺磷的降解，这种蛋白质是在细胞的________上合成的。若要定量分析ophc2蛋白的催化能力，应测定单位时间内______________。
(3)为了测定菌株A的降解效率，应配置0 mg/L、10 mg/L、30 mg/L、50 mg/L、70 mg/L的甲胺磷溶液，测定不同浓度甲胺磷溶液的吸光值，画出标准曲线，得到吸光值与甲胺磷浓度的关系：y＝0.02x－0.01，如图7－15－6所示。
图7－15－6
将含有100 mg/L甲胺磷的菌株A培养液分别在不同温度下培养5天后，测定吸光值，结果如下表所示，已知降解率＝(初始甲胺磷浓度－降解后甲胺磷浓度)/初始甲胺磷浓度，则取得的最大降解率为________(忽略细菌对吸光值的影响和培养液体积变化)，若甲胺磷自身化学分解，则计算的降解率数值会________(填“偏大”“不变”或“偏小”)。
| 温度/℃ | 15 | 20 | 25 | 30 | 35 | 40 |
| 吸光值(菌株A) | 1.71 | 1.53 | 1.15 | 0.49 | 1.32 | 1.89 |
(4)继续分析细菌的16S rDNA可以鉴定种类，提取得到菌株A的DNA后，通过____________扩增得到大量的16S rDNA，进而对细菌分类。
(5)导入ophc2基因的烟草可获得降解有机磷的能力，烟草花粉的遗传物质存在于细胞核和线粒体中，为了避免转基因烟草的花粉对野生型烟草造成基因污染，可将ophc2基因导入烟草细胞的________中。