物质W是一种含氮有机物,会污染土壤。W在培养基中达到一定量时培养基表现为不透明。某研究小组欲从土壤中筛选出能降解W的细菌(目标菌)。回答下列问题。
(1)要从土壤中分离目标菌,所用选择培养基中的氮源应该是_________。
(2)在从土壤中分离目标菌的过程中,发现培养基上甲、乙两种细菌都能生长并形成菌落(如图所示)。如果要得到目标菌,应该选择________菌落进一步纯化,选择的依据是________。
(3)土壤中的某些微生物可以利用空气中的氮气作为氮源。若要设计实验进一步确定甲、乙菌能否利用空气中的氮气作为氮源,请简要写出实验思路、预期结果和结论,即_______。
(4)该小组将人工合成的一段DNA转入大肠杆菌,使大肠杆菌产生能降解W的酶(酶E)。为了比较酶E与天然酶降解W能力的差异,该小组拟进行如下实验,请完善相关内容。
①在含有一定浓度W的固体培养基上,A处滴加含有酶E的缓冲液,B处滴加含有相同浓度天然酶的缓冲液,C处滴加_________,三处滴加量相同。
②一段时间后,测量透明圈的直径。若C处没有出现透明圈,说明___________;若A、B处形成的透明圈直径大小相近,说明___________。
高三生物实验题中等难度题
物质W是一种含氮有机物,会污染土壤。W在培养基中达到一定量时培养基表现为不透明。某研究小组欲从土壤中筛选出能降解W的细菌(目标菌)。回答下列问题。
(1)要从土壤中分离目标菌,所用选择培养基中的氮源应该是_________。
(2)在从土壤中分离目标菌的过程中,发现培养基上甲、乙两种细菌都能生长并形成菌落(如图所示)。如果要得到目标菌,应该选择________菌落进一步纯化,选择的依据是________。
(3)土壤中的某些微生物可以利用空气中的氮气作为氮源。若要设计实验进一步确定甲、乙菌能否利用空气中的氮气作为氮源,请简要写出实验思路、预期结果和结论,即_______。
(4)该小组将人工合成的一段DNA转入大肠杆菌,使大肠杆菌产生能降解W的酶(酶E)。为了比较酶E与天然酶降解W能力的差异,该小组拟进行如下实验,请完善相关内容。
①在含有一定浓度W的固体培养基上,A处滴加含有酶E的缓冲液,B处滴加含有相同浓度天然酶的缓冲液,C处滴加_________,三处滴加量相同。
②一段时间后,测量透明圈的直径。若C处没有出现透明圈,说明___________;若A、B处形成的透明圈直径大小相近,说明___________。
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一种广泛使用的除草剂(含氮有机物)在土壤中不易被降解,长期使用可污染土壤。为修复被该除草剂污染的土壤,可按下面程序选育能降解该除草剂的细菌(已知该除草剂在水中溶解度低,含一定量该除草剂的培养基不透明)。
(1)制备土壤浸出液时,为避免菌体浓度过高,需将浸出液进行稀释处理。现有一升土壤浸出液,用无菌吸管吸取1 mL液样至盛有9 mL无菌水的试管中,依次稀释103稀释度。各取0.1 mL已稀释103倍的水样分别接种到三个培养基上培养,记录的菌落数分别为55、56、57,则每升原土壤浸出液样中菌体数为________。
(2)要从长期使用该除草剂的土壤中分离目的菌,从用途方面来看,上述培养皿中培养基的特点是______________________。
(3)接种技术的核心是____________________。在划线接种时,连续划线的目的是将聚集的菌种逐步__________________,培养时,只有很少菌落出现,大部分细菌在此培养基上不能生长的主要原因是________________________或有氧条件抑制了这些细菌的生长。
(4)在培养基上形成的菌落中,无透明圈菌落利用的氮源主要是________,有透明圈菌落利用的氮源主要是__________,据此可筛选出目的菌。实验结果如图显示的A~E五种菌株中,________是最理想菌株。
(5)科研人员用放射线处理该细菌获得两个突变株A和B,然后对突变株A和B进行实验,结果如下表所示:
突变株A不能在一般培养基上生长的原因是_________________________________。突变株A和B混合在一起接种于一般培养基中能生长的最可能原因是__________________________。
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I一种广泛使用的除草剂(含氮有机物)在土壤中不易被降解,长期使用可污染土壤。为修复被该除草剂污染的土壤,可按下面程序选育能降解该除草剂的细菌(己知该除草剂在水中溶解度低,含一定量该除草剂的培养基不透明)。
(1)制备土壤浸出液时,为避免菌体浓度过高,需将浸出液进行稀释处理。现有一升土壤浸出液,用无菌吸管吸取I mL样液至盛有9 mL无菌水的试管中,照此依次稀释103稀释度。各取0.1 mL已稀释103倍的水样分别接种到三个培养基上培养,记录的菌落数分别为55, 56, 57,则每升原土壤浸出液样中菌体数为__。
(2)要从长期使用该除草剂的土壤中分离目的菌,从用途方面来看,上述培养皿中培养基的特点是____。
(3)获得纯净培养物的关键是_____。在划线接种时,连续划线的目的是将聚集的菌种逐步____。
(4)在培养基上形成的菌落中,无透明圈菌落利用的氮源主要是____。实验结果如图显示的A~E五种菌株中,__是最理想菌株。
II回答下列有关生物技术的问题:
(1)胡萝卜组织培养的MS培养基与微生物培养基的主要区别是:①_________,②前者一般还含有植物激素。
(2)从胡萝卜中提取胡萝卜素常用的方法是______。对胡萝卜进行粉碎、干燥时,要特别注意干燥的___和时间,以防止胡萝卜焦糊。提取后宜采用___方式进行鉴定。
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某种广泛被使用的除草剂(含氮有机化合物)在土壤中不易降解,长期使用可污染土壤。为修复被该除草剂污染的土壤,可按下面程序选育能降解该除草剂的细菌(已知该除草剂在水中溶解度一定,该除草剂的培养基不透明,培养皿中会残留少量无菌空气)
(1)制备土壤浸出液时,为避免菌体浓度过高,需将浸出液进行__________处理。
(2)要从长期使用该除草剂的土壤中分离目的菌,从物理性质、营养成分的角度要求上述培养基具备特点是____________________________。若需要调节培养基pH,应该在各种成分都溶化后且分装_____(填“前”或“后”)进行。对培养基进行灭菌,常采用的方法是__________。
(3)图中形成的菌落中,无透明带菌落利用的氮源可能是__________,有透明带菌落利用的氮源主要是该除草剂,据此可筛选出目的菌。
(4)若对活菌进行计数,常用的接种方法为__________。为了计数微生物的数量,一位同学在4个平板培养基上分别接种稀释倍数为106的土壤样液0.1mL,培养后菌落数分别为155、160、176、149个,则每毫升原土壤样液中上述微生物数量为__________。
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农业生产上有一种广泛使用的除草剂在土壤中不易被降解,长期使用会污染土壤。为修复被污染的土壤,可按图示程序选育出能降解该除草剂的细菌。已知该除草剂(含氮有机物)在水中溶解度低,含一定量该除草剂的培养基不透明。请分析回答:
(1)微生物接种是微生物学研究中最常用的基本操作技术,该技术的核心是_______。
(2) 在选育过程中,应将土壤浸出液接种于以该除草剂为唯一______的培养基上。通过比较单菌落周围__________的大小,可筛选出高效的目的菌。实验结果如右图显示的A~E五种菌株中,_______是最理想菌株。
(3) 若想对初步筛选得到的目的菌进行纯化并计数,可采用的接种方法是_______。将lmL土壤溶液分别稀释10倍和100倍,每种稀释度各在3个平板上分别接入0.lmL稀释液,经过适当培养后,6个平板上的菌落数分别为59、57、58和2、7、5,空白对照组的平板上没有菌落,则每升土壤溶液中活菌数的理论值为_____________个。实际上每升土壤溶液中的活菌数比通过统计所得的这一数值要大,因为______________________。
(4) 科研人员用放射线处理该细菌,获得突变株A和B,然后对突变株A和B进行实验,结果如下表所示:
接种的菌种 | 一般培养基 | 实验处理及结果 |
A | 不生长 | 添加营养物质甲,能生长 |
B | 不生长 | 添加营养物质乙,能生长 |
A+B | 能生长 | 不添加营养物质甲、乙,能生长 |
请分析突变株A和B混合在一起接种于一般培养基中能生长的最可能原因。___________________________________________。
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农业生产上有一种广泛使用的除草剂在土壤中不易被降解,长期使用会污染土壤。为修复被污染的土壤,可按图示程序选育出能降解该除草剂的细菌。已知该除草剂(含氮有机物)在水中溶解度低,含一定量该除草剂的培养基不透明。
(1)微生物接种是微生物学研究中最常用的基本操作技术,该技术的核心是________,应该在________旁完成。图中B、C所示操作的目的是将聚集的菌种逐步________。
(2)在选育过程中,应将土壤浸出液接种于以________为唯一氮源的固体培养基上。为了筛选出高效的目的菌,可比较单菌落周围透明圈的大小。实验结果如右图显示的A~E五种菌株中,________是最理想菌株。
(3)若想对初步筛选得到的目的菌进行纯化并计数,可采用的接种方法是________。对分离的细菌数目统计时,统计的菌落数目往往比活菌的实际数目________。
(4)操作过程中有三种材料或用具需要消毒或灭菌:①培养细菌用的培养基与培养皿;②操作者的双手;③玻棒、试管、烧瓶和吸管。其中需要灭菌的是________。(填序号)
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[生物——选修1:生物技术实践]为从土壤中筛选能有效降解有机化合物X的细菌,研究人员用化合物X、磷酸盐、镁盐以及微量元素配制的培养基,成功地筛选出能高效降解化合物X的细菌(目的菌)。下图是从土壤中筛选出该细菌的过程示意图,下表是分离纯化的结果。请回答下列问题:
(1)培养基中的有机化合物X主要为目的菌提供 等营养要素。从土壤中富集能有效降解有机化合物X的细菌时,应选用 (填“固体”或“液体”)培养基。
(2)配制成10-1浓度稀释液时,用无菌移液管从富集液的上清液中吸取1mL,移人盛有___ _ mL无菌水的试管中,并依次配制10 -2~10 -10的梯度稀释液。
(3)在分离、纯化过程中,图中②、③过程接种的方法分别为____、 。在倒平板前,应对玻璃器皿和培养基灭菌,灭菌方法是 。
(4)分析菌种的分离纯化结果,应选择为 号菌落进行扩大生产,原因是 。
(5)实验过程中还需配制空白培养基作为对照,其目的是____。
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(15分)
一种广泛使用的除草剂(含氮有机物)在土壤中不易被降解,长期使用可污染土壤。为修复被该除草剂污染的土壤,可按下面程序选育能降解该除草剂的细菌(已知该除草剂在水中溶解度低,含一定量该除草剂的培养基不透明)。
(1)制备土壤浸出液时,为避免菌体浓度过高,需将浸出液进行稀释处理。现有一升土壤浸出液,用无菌吸管吸取1 mL样液至盛有9 mL无菌水的试管中,依次稀释103稀释度。各取0.1 mL已稀释103倍的水样分别接种到三个培养基上培养,记录的菌落数分别为55、56、57,则每升原土壤浸出液样中菌体数为________(2分)。
(2)要从长期使用该除草剂的土壤中分离目的菌,从用途方面来看,上述培养皿中培养基的特点是______________________。
(3)接种技术的核心是____________________。在划线接种时,连续划线的目的是将聚集的菌种逐步__________________,培养时,只有很少菌落出现,大部分细菌在此培养基上不能生长的主要原因是________________________或有氧条件抑制了这些细菌的生长。
(4)在培养基上形成的菌落中,无透明圈菌落利用的氮源主要是________,有透明圈菌落利用的氮源主要是__________,据此可筛选出目的菌。实验结果如图显示的A~E五种菌株中,________是最理想菌株。
(5)科研人员用放射线处理该细菌获得两个突变株A和B,然后对突变株A和B进行实验,结果如下表所示:
突变株A不能在一般培养基上生长的原因是________ _ ___。突变株A和B混合在一起接种于一般培养基中能生长的最可能原因是__________________________。
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石油污染会对水体或土壤环境造成很大的危害。研究人员用磷酸盐、石油、镁盐以及微量元素配制的培养基,成功地筛选出一种能高效降解石油的细菌A。请分析回答问题:
(1)培养基中加入石油的目的是筛选__________,这种培养基属于__________培养基。
(2)细菌A生长所需的碳源来自____________________。
(3)培养若干天后,应选择石油含量__________的培养瓶,加入新的培养液连续培养,使细菌A的数量__________。
(4)培养一段时间后要转为固体培养,常采用__________的方法接种,获得单菌落后继续筛选。
(5)研究细菌A的生长规律时,可将单个菌落进行液体培养,采用__________的方法进行计数,以时间为横坐标,以__________为纵坐标,绘制生长曲线。
(6)实验结束后,使用过的培养基应该进行__________处理后,才能倒掉。
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石油污染会对水体或土壤环境造成很大的危害。研究人员用磷酸盐、石油、镁盐以及微量元素配制的培养基,成功地筛选出一种能高效降解石油的细菌A。请分析回答问题:
(1)培养基中加入石油的目的是筛选__________,这种培养基属于__________培养基。
(2)细菌A生长所需的碳源来自____________________。
(3)培养若干天后,应选择石油含量__________的培养瓶,加入新的培养液连续培养,使细菌A的数量__________。
(4)培养一段时间后要转为固体培养,常采用__________的方法接种,获得单菌落后继续筛选。
(5)研究细菌A的生长规律时,可将单个菌落进行液体培养,采用__________的方法进行计数,以时间为横坐标,以__________为纵坐标,绘制生长曲线。
(6)实验结束后,使用过的培养基应该进行__________处理后,才能倒掉。
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