长春花中的长春碱具有良好的抗肿瘤作用。科研人员利用TMS基因构建重组Ti质粒，对愈伤组织进...

长春花中的长春碱具有良好的抗肿瘤作用。科研人员利用TMS基因构建重组Ti质粒，对愈伤组织进行遗传改造，从其细胞分泌物中提取长春碱，解决长春碱供不应求的问题，操作流程如下图。下列说法错误的是（　　 ）

A.①过程用到的培养基中需要加入琼脂

B.Ti质粒是TMS基因的运载工具

C.外植体通过①脱分化过程形成愈伤组织

D.愈伤组织通过③再分化过程产生长春碱

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科研人员利用农杆菌转化法将抗病毒蛋白基因C导入番木瓜，培育出转基因抗病番木瓜，Ti质粒如图所示。下列叙述，正确的是（　　 ）

A.农杆菌的拟核DNA与番木瓜基因发生重组

B.构建重组质粒需要限制酶和DNA聚合酶

C.含重组Ti质粒的农杆菌具有四环素抗性

D.转基因抗病番木瓜不具有卡那霉素抗性

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人参是一种名贵药材，具有良好的滋补作用。口服α－干扰素在慢性乙肝、丙肝及部分肿瘤的治疗中有一定疗效。下图为科研人员制备能合成干扰素的人参愈伤组织细胞的流程，①～④表示相关的操作，EcoRⅠ、BamHⅠ为限制酶，它们的识别序列及切割位点如下表所示。请回答下列问题：

(1) 步骤①中，利用PCR技术扩增干扰素基因时，设计引物序列的主要依据是______________。科研人员还在两种引物的一端分别加上________和________序列，以便于后续基因的剪切和连接。

(2) 过程②所构建的基因表达载体中未标注出的必需元件还有________，过程③中需先用______处理根瘤农杆菌以便将基因表达载体导入细胞。

(3) 过程④中，科研人员提取愈伤组织细胞的RNA后，先通过________过程获得DNA，再进行PCR扩增，若最终未能检测出干扰素基因，其可能原因是____。

(4) 科研人员认为，将转干扰素基因的人参愈伤组织加工成的药物比单纯干扰素的疗效要好，其依据是______________________。

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科研小组利用蛋白质工程将某细胞中的一种转运蛋白X进行改造，并使改造后的转运蛋白X基因在细胞中正常表达。下列说法正确的是

A.该过程无需构建基因表达载体

B.该过程需要限制性核酸内切酶和DNA连接酶的作用

C.经改造后的蛋白质不需要再进行功能鉴定

D.经改造后的基因在表达过程中不遵循中心法则

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研究人员用图1中质粒和图2中含目的基因的片段构建重组质粒（图中标注了相关限制酶切割位点），将重组质粒导入大肠杆菌后进行筛选及PCR鉴定。以下叙述不正确的是

A. 构建重组质粒的过程应选用BclⅠ和HindⅢ两种限制酶

B. 使用DNA连接酶将酶切后的质粒和目的基因片段进行重组

C. 含有重组质粒的大肠杆菌可以在添加氨苄青霉素的培养基上生存

D. 利用PCR鉴定含目的基因的大肠杆菌时应选用引物甲和引物丙

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研究人员用图1中质粒和图2中含目的基因的片段构建重组质粒（图中标注了相关限制酶切割位点），将重组质粒导入大肠杆菌后进行筛选及PCR鉴定。以下叙述不正确的是

A.构建重组质粒的过程应选用BclⅠ和HindⅢ两种限制酶

B.使用DNA连接酶将酶切后的质粒和目的基因片段进行重组

C.能在添加四环素的培养基上生存一定是含有重组质粒的大肠杆菌

D.利用PCR鉴定含目的基因的大肠杆菌时应选用引物甲和引物丙

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下图是利用基因工程培育抗虫植物的示意图。以下相关叙述正确的是（　 　　 ）

A．⑤只要表现出抗虫性状就表明植株发生了可遗传变异

B．②的构建需要限制性核酸内切酶和DNA聚合酶参与

C．③侵染植物细胞后，重组Ti质粒整合到④的染色体上

D．④的染色体上若含抗虫基因，则⑤一定会表现出抗虫性状

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下列材料选择不符合生物工程要求的是（　　）

A. 采用植物成熟区组织培养技术进行作物脱毒

B. 采用去核的MII期的卵母细胞作为供体细胞核的受体

C. 采用人工改造的天然质粒构建基因表达载体

D. 选用传代10代以内的细胞用于核移植的供体细胞

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为获得生长速度加快的番茄，科研人员对番茄的愈伤组织进行了遗传改造，改造过程用到的部分结构如图。

（1）图中结构P、T是基因成功转录的保证，则结构P是_________________。

（2）图中结构属于目的基因的是__________________。构建基因表达载体时，常需要使用限制酶和DNA连接酶，其中既能连接黏性末端又能连接平末端的酶是________________酶。

（3）构建重组质粒后，将该愈伤组织浸入含有上述质粒的_______________菌液中，通过该菌的转化作用使目的基因进入愈伤组织并插入到细胞的___________________上。

（4）为检测转基因番茄中tms基因是否转录出mRNA，首先要从该组织中提取出mRNA，然后将___________作为探针，根据是否形成_________进而判断tms基因是否转录出mRNA。

（5）根据图中原因分析，该转基因番茄生长速度比普通番茄更快，原因是________________。

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鸡干扰素是一种具有高效和广谱抗病毒作用的细胞因子，广泛用于动物领域的抗病毒治疗。科研人员将鸡干扰素基因作为目的基因，构建基因表达载体，通过农杆菌介导法导入烟草，以获得抗病毒烟草。下图为科研人员制备能合成鸡干扰素的烟草愈伤组织细胞的流程，①～④表示相关的操作，两种限制酶的识别序列及切割位点如表所示。请回答下列问题：

（1）步骤①中，利用PCR技术扩增干扰素基因时，设计引物序列的主要依据是____。科研人员还在两种引物的一端分别加上了__________和___________序列，以便于后续的剪切和连接。为防止酶切产物自身环化，构建表达载体需用两种限制酶，选择的原则是_________。

A．Ti质粒内，每种限制酶只有一个切割位点

B．目的基因编码蛋白质的序列中，每种限制酶只有一个切割位点

C．酶切后，目的基因形成的两个黏性末端序列不相同

D．酶切后，Ti质粒形成的两个黏性末端序列相同

（2）步骤②所构建的基因表达载体中未标注出的必需元件还有___________，步骤③中需先用______处理农杆菌以便将基因表达载体导入细胞。

（3）步骤④中，科研人员提取愈伤组织细胞的RNA后，先通过________获得DNA，再进行PCR扩增，若最终未能检测出干扰素基因，其可能原因是___________。

（4）用烟草花叶病毒对获得的转基因烟草和普通烟草进行接种实验，接种后第19天对照组植株进入病情指数（植物受病毒侵染的严重程度）为100的平台期，而转基因植株在第______天才进入平台期，但此时的病情指数为79。说明转基因烟草植株对病毒的侵染表现出一定的抗性，但抗性较低，可能的原因有__________。

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