人参是一种名贵药材，具有良好的滋补作用。口服α－干扰素在慢性乙肝、丙肝及部分肿瘤的治疗中有...

人参是一种名贵药材，具有良好的滋补作用。口服α－干扰素在慢性乙肝、丙肝及部分肿瘤的治疗中有一定疗效。下图为科研人员制备能合成干扰素的人参愈伤组织细胞的流程，①～④表示相关的操作，EcoRⅠ、BamHⅠ为限制酶，它们的识别序列及切割位点如下表所示。请回答下列问题：

(1) 步骤①中，利用PCR技术扩增干扰素基因时，设计引物序列的主要依据是______________。科研人员还在两种引物的一端分别加上________和________序列，以便于后续基因的剪切和连接。

(2) 过程②所构建的基因表达载体中未标注出的必需元件还有________，过程③中需先用______处理根瘤农杆菌以便将基因表达载体导入细胞。

(3) 过程④中，科研人员提取愈伤组织细胞的RNA后，先通过________过程获得DNA，再进行PCR扩增，若最终未能检测出干扰素基因，其可能原因是____。

(4) 科研人员认为，将转干扰素基因的人参愈伤组织加工成的药物比单纯干扰素的疗效要好，其依据是______________________。

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鸡干扰素是一种具有高效和广谱抗病毒作用的细胞因子，广泛用于动物领域的抗病毒治疗。科研人员将鸡干扰素基因作为目的基因，构建基因表达载体，通过农杆菌介导法导入烟草，以获得抗病毒烟草。下图为科研人员制备能合成鸡干扰素的烟草愈伤组织细胞的流程，①～④表示相关的操作，两种限制酶的识别序列及切割位点如表所示。请回答下列问题：

（1）步骤①中，利用PCR技术扩增干扰素基因时，设计引物序列的主要依据是____。科研人员还在两种引物的一端分别加上了__________和___________序列，以便于后续的剪切和连接。为防止酶切产物自身环化，构建表达载体需用两种限制酶，选择的原则是_________。

A．Ti质粒内，每种限制酶只有一个切割位点

B．目的基因编码蛋白质的序列中，每种限制酶只有一个切割位点

C．酶切后，目的基因形成的两个黏性末端序列不相同

D．酶切后，Ti质粒形成的两个黏性末端序列相同

（2）步骤②所构建的基因表达载体中未标注出的必需元件还有___________，步骤③中需先用______处理农杆菌以便将基因表达载体导入细胞。

（3）步骤④中，科研人员提取愈伤组织细胞的RNA后，先通过________获得DNA，再进行PCR扩增，若最终未能检测出干扰素基因，其可能原因是___________。

（4）用烟草花叶病毒对获得的转基因烟草和普通烟草进行接种实验，接种后第19天对照组植株进入病情指数（植物受病毒侵染的严重程度）为100的平台期，而转基因植株在第______天才进入平台期，但此时的病情指数为79。说明转基因烟草植株对病毒的侵染表现出一定的抗性，但抗性较低，可能的原因有__________。

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鸡干扰素是一种具有高效和广谱抗病毒作用的细胞因子，广泛用于动物领域的抗病毒治疗。科研人员将鸡干扰素基因作为目的基因，构建基因表达载体，通过农杆菌介导法导入烟草，以获得抗病毒烟草。下图为科研人员制备能合成鸡干扰素的烟草愈伤组织细胞的流程，①～④表示相关的操作，两种限制酶的识别序列及切割位点如表所示。请回答下列问题：

（1）步骤①中，利用PCR技术扩增干扰素基因时，设计引物序列的主要依据是__________的特定碱基排列顺序。科研人员还在两种引物的一端分别加上了__________和___________（填DNA序列），以便于后续的剪切和连接。为防止酶切产物自身环化，构建表达载体需用两种限制酶，选择的原则是_________。

A．Ti质粒内，限制酶的切割位点应位于T-DNA内

B．目的基因编码蛋白质的序列中，每种限制酶只有一个切割位点

C．酶切后，目的基因形成的两个黏性末端序列不相同

D．酶切后，Ti质粒形成的两个黏性末端序列相同

（2）步骤②所构建的基因表达载体中未标注出的元件还可以有____________，步骤③中需先用____________处理农杆菌以便将基因表达载体导入细胞。

（3）步骤④中，科研人员提取愈伤组织细胞的RNA后，先通过_________获得DNA，再进行PCR扩增，若最终未能检测出干扰素基因，其可能原因是①________________________②_____________________________。

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人参皂甙具有抗肿瘤等作用，科研人员设计如图1所示流程制备人参皂甙Rg3，并研究了过程③生物反应器中人参细胞产量、人参皂甙Rg3产量随培养时间的变化，结果如图2。下列相关叙述正确的是（　　 ）

A.过程①体现了植物细胞的全能性

B.过程②常需用胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理将愈伤组织分散成单个细胞

C.过程③通常采用振荡培养，除有利于增加溶解氧外，还能防止细胞聚集

D.由图2可知，影响人参皂甙Rg3产量的因素是培养时间

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下图为科研人员制备能合成干扰素的人参愈伤组织细胞的流程，①—④表示相关的操作，E coRⅠ、Bam HⅠ为限制酶，它们的识别序列及切割位点如表所示。回答下列问题：

（1）上述过程中，将目的基因导入人参愈伤组织细胞使用的方法是___________，检测目的基因是否导入人参愈伤组织细胞的方法是___________。

（2）步骤①中，利用PCR技术扩增干扰素基因时，设计引物序列的主要依据是___________。科研人员还在两种引物的一端分别加上了___________和___________序列，以便于后续的剪切和连接。

（3）过程②所构建的基因表达载体中启动子的作用是___________，过程③中需先用___________处理根瘤脓肝菌以便将基因表达载体导入细胞。

（4）同一种限制酶切割质粒和目的基因相比，用EcoRⅠ、BamHⅠ两种限制酶切割的优点是___________。

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长春花中的长春碱具有良好的抗肿瘤作用。科研人员利用TMS基因构建重组Ti质粒，对愈伤组织进行遗传改造，从其细胞分泌物中提取长春碱，解决长春碱供不应求的问题，操作流程如下图。下列说法错误的是（　　 ）

A.①过程用到的培养基中需要加入琼脂

B.Ti质粒是TMS基因的运载工具

C.外植体通过①脱分化过程形成愈伤组织

D.愈伤组织通过③再分化过程产生长春碱

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双歧杆菌是人体肠道内一类自然菌，有资料表明，其双歧杆菌脂磷壁酸（LTA)具有抗肿瘤作用。研究人员提取并制备了一定量的LTA(100mg/ml)母液，欲研究LTA浓度、作用时间与抗肿瘤效果的关系，请以细胞增殖抑制率为指标，利用下列材料完成对该课题的探究。

材料：肿瘤细胞、基础培养液、LTA(100mg/ml)母液、生理盐水、培养瓶、培养箱、血细胞计数板等。

请回答：

（1）实验思路：

①将培养瓶随机均等地分组，并编号为A、B、C、D、E、F；

②________________________________________________；

（2）若LTA的最佳作用浓度和时间分别是80mg/ml、5天，请用曲线图的形式表示5天内（含5天）各组最可能的实验结果______________。

（3）分析与讨论：

①有人认为LTA的抗肿瘤作用不仅体现在抑制肿瘤细胞的增殖，还可能是促使肿瘤细胞___________，最终导致细胞数目减少。

②若对体外培养的肿瘤细胞添加RNA合成抑制剂，则肿瘤细胞将广泛停留在___________期。

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科研人员将抗癌药物连接在单克隆抗体上制成“生物导弹”用于癌症治疗。“生物导弹”由两部分组成，一是“瞄准装置”，二是“杀伤性弹头”。分析下列有关描述，其中正确的是(多选)(　 )

A.“瞄准装置”由识别肿瘤的单克隆抗体组成

B.“弹头”由放射性同位素、化学药物和毒素等物质构成

C.“弹头”中的药物有选择杀伤肿瘤细胞的功能

D.“生物导弹”的制备应用了细胞工程

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科研人员将抗癌药物连接在单克隆抗体上制成“生物导弹”，用于癌症治疗。“生物导弹”由两部分组成，一是“瞄准装置”，二是“杀伤性弹头”，分析下列有关描述，其中不正确的是（　 ）。

A．“瞄准装置”由识别肿瘤的单克隆抗体组成

B．“弹头”由放射性同位素、化学药物和毒素等物质构成

C．“生物导弹”疗效高，但毒副作用大

D．“生物导弹”的制备应用了细胞工程

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科研人员将抗癌药物连接在单克隆抗体上制成“生物导弹”，用于癌症治疗。“生物导弹”由两部分组成，一是“瞄准装置”，二是“杀伤性弹头”，分析下列有关描述，其中不正确的是（　　）。

A．“瞄准装置”由识别肿瘤的单克隆抗体组成

B．“弹头”由放射性同位素、化学药物和毒素等物质构成

C．“生物导弹”疗效高，但毒副作用大

D．“生物导弹”的制备应用了细胞工程

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