下图为科研人员制备能合成干扰素的人参愈伤组织细胞的流程，①—④表示相关的操作，E coRⅠ...

下图为科研人员制备能合成干扰素的人参愈伤组织细胞的流程，①—④表示相关的操作，E coRⅠ、Bam HⅠ为限制酶，它们的识别序列及切割位点如表所示。回答下列问题：

（1）上述过程中，将目的基因导入人参愈伤组织细胞使用的方法是___________，检测目的基因是否导入人参愈伤组织细胞的方法是___________。

（2）步骤①中，利用PCR技术扩增干扰素基因时，设计引物序列的主要依据是___________。科研人员还在两种引物的一端分别加上了___________和___________序列，以便于后续的剪切和连接。

（3）过程②所构建的基因表达载体中启动子的作用是___________，过程③中需先用___________处理根瘤脓肝菌以便将基因表达载体导入细胞。

（4）同一种限制酶切割质粒和目的基因相比，用EcoRⅠ、BamHⅠ两种限制酶切割的优点是___________。

高二生物综合题困难题查看答案及解析

人参是一种名贵药材，具有良好的滋补作用。口服α－干扰素在慢性乙肝、丙肝及部分肿瘤的治疗中有一定疗效。下图为科研人员制备能合成干扰素的人参愈伤组织细胞的流程，①～④表示相关的操作，EcoRⅠ、BamHⅠ为限制酶，它们的识别序列及切割位点如下表所示。请回答下列问题：

(1) 步骤①中，利用PCR技术扩增干扰素基因时，设计引物序列的主要依据是______________。科研人员还在两种引物的一端分别加上________和________序列，以便于后续基因的剪切和连接。

(2) 过程②所构建的基因表达载体中未标注出的必需元件还有________，过程③中需先用______处理根瘤农杆菌以便将基因表达载体导入细胞。

(3) 过程④中，科研人员提取愈伤组织细胞的RNA后，先通过________过程获得DNA，再进行PCR扩增，若最终未能检测出干扰素基因，其可能原因是____。

(4) 科研人员认为，将转干扰素基因的人参愈伤组织加工成的药物比单纯干扰素的疗效要好，其依据是______________________。

高二生物综合题困难题查看答案及解析

人参皂甙具有抗肿瘤等作用，科研人员设计如图1所示流程制备人参皂甙Rg3，并研究了过程③生物反应器中人参细胞产量、人参皂甙Rg3产量随培养时间的变化，结果如图2。下列相关叙述正确的是（　　 ）

A.过程①体现了植物细胞的全能性

B.过程②常需用胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理将愈伤组织分散成单个细胞

C.过程③通常采用振荡培养，除有利于增加溶解氧外，还能防止细胞聚集

D.由图2可知，影响人参皂甙Rg3产量的因素是培养时间

高二生物单选题中等难度题查看答案及解析

福建山区发现一种珍稀植物水晶兰，全草含药用价值很高的水晶兰甙。某科研所将水晶兰甙基因导入玉米中制备出能合成水晶兰甙的玉米愈伤组织细胞，流程图如下。回答下列问题：

（1）HindⅢ和BamHⅠ等限制酶主要是从　　 ______中分离纯化得到的，都作用于DNA特定部位的_________键。使用HindⅢ和BamHⅠ两种酶切割Ti质粒可防止切开的质粒重新连接起来，原因是_________。图中②过程需要加入_________酶。

（2）基因工程使用的运载体除质粒外，还常用_________等。若需要大量合成目的基因，可采用PCR技术进行扩增，其条件除需模板、原料外，还需__________________等。

（3）图中生产转基因玉米的核心步聚是_________________（填标号）。将目的基因导入玉米细胞的方法为_________，这种方法的优点是能使目的基因随着Ti质粒的_________插入到植物细胞的_________上，使其遗传特性得以稳定维持和表达。

（4）④过程是__________________，过程⑤中可以用__________________技术进行检测筛选。

高二生物综合题困难题查看答案及解析

鸡干扰素是一种具有高效和广谱抗病毒作用的细胞因子，广泛用于动物领域的抗病毒治疗。科研人员将鸡干扰素基因作为目的基因，构建基因表达载体，通过农杆菌介导法导入烟草，以获得抗病毒烟草。下图为科研人员制备能合成鸡干扰素的烟草愈伤组织细胞的流程，①～④表示相关的操作，两种限制酶的识别序列及切割位点如表所示。请回答下列问题：

（1）步骤①中，利用PCR技术扩增干扰素基因时，设计引物序列的主要依据是____。科研人员还在两种引物的一端分别加上了__________和___________序列，以便于后续的剪切和连接。为防止酶切产物自身环化，构建表达载体需用两种限制酶，选择的原则是_________。

A．Ti质粒内，每种限制酶只有一个切割位点

B．目的基因编码蛋白质的序列中，每种限制酶只有一个切割位点

C．酶切后，目的基因形成的两个黏性末端序列不相同

D．酶切后，Ti质粒形成的两个黏性末端序列相同

（2）步骤②所构建的基因表达载体中未标注出的必需元件还有___________，步骤③中需先用______处理农杆菌以便将基因表达载体导入细胞。

（3）步骤④中，科研人员提取愈伤组织细胞的RNA后，先通过________获得DNA，再进行PCR扩增，若最终未能检测出干扰素基因，其可能原因是___________。

（4）用烟草花叶病毒对获得的转基因烟草和普通烟草进行接种实验，接种后第19天对照组植株进入病情指数（植物受病毒侵染的严重程度）为100的平台期，而转基因植株在第______天才进入平台期，但此时的病情指数为79。说明转基因烟草植株对病毒的侵染表现出一定的抗性，但抗性较低，可能的原因有__________。

高二生物实验题困难题查看答案及解析

鸡干扰素是一种具有高效和广谱抗病毒作用的细胞因子，广泛用于动物领域的抗病毒治疗。科研人员将鸡干扰素基因作为目的基因，构建基因表达载体，通过农杆菌介导法导入烟草，以获得抗病毒烟草。下图为科研人员制备能合成鸡干扰素的烟草愈伤组织细胞的流程，①～④表示相关的操作，两种限制酶的识别序列及切割位点如表所示。请回答下列问题：

（1）步骤①中，利用PCR技术扩增干扰素基因时，设计引物序列的主要依据是__________的特定碱基排列顺序。科研人员还在两种引物的一端分别加上了__________和___________（填DNA序列），以便于后续的剪切和连接。为防止酶切产物自身环化，构建表达载体需用两种限制酶，选择的原则是_________。

A．Ti质粒内，限制酶的切割位点应位于T-DNA内

B．目的基因编码蛋白质的序列中，每种限制酶只有一个切割位点

C．酶切后，目的基因形成的两个黏性末端序列不相同

D．酶切后，Ti质粒形成的两个黏性末端序列相同

（2）步骤②所构建的基因表达载体中未标注出的元件还可以有____________，步骤③中需先用____________处理农杆菌以便将基因表达载体导入细胞。

（3）步骤④中，科研人员提取愈伤组织细胞的RNA后，先通过_________获得DNA，再进行PCR扩增，若最终未能检测出干扰素基因，其可能原因是①________________________②_____________________________。

高二生物综合题中等难度题查看答案及解析

下图1表示人参叶肉细胞内部分代谢过程，甲～丁表示物质，①～⑤表示过程。科研人员研究了不同光照强度条件下CO2浓度对人参叶片净光合速率的影响，得到如图2所示曲线。请据图回答问题：

（1）图1中，物质乙是______，过程②发生的场所是______，过程③为 _____。

（2）从图2可知，当光照强度为180μmol·m－2·s－1时，增施CO2对人参叶片净光合速率影响幅度不大，原因是在这种条件下，图1中过程 ___(填数字序号)产生的___ 较少。

（3）若在CO2浓度为1200μmol·mol－1时，光照强度由550mol·m－2·s－1降为180μmol·m－2·s－1，则短时间内叶绿体中含量减少的物质有____（填序号：①C5　 ②ATP　 ③[H]　 ④C3）。

高二生物非选择题困难题查看答案及解析

为实现目的基因与运载体结合，以便在大肠杆菌中大量表达相应的蛋白质，研究人员进行了如图所示操作．请分析回答下列问题：

（1）图表示用Bam H I切割含目的基因的_____________，质粒经相同限制酶处理后，经_____________ 酶的作用获得a，a称作_____________．将a与感受态大肠杆菌混合后，混合物应接种在含有________的培养基上．质粒中抗氨苄青霉素基因称为_____________ ，在筛选过程起作用．若要证明培养基是否符合实验要求，培养基上需接种_____________ 的感受态大肠杆菌，培养后不出现菌落则培养基合格。

（2）DNA分子中，一条链中的两个核苷酸通过_____________相连，已知碱性磷酸酶能除去核苷酸末端的5’磷酸，构建a的过程中用该酶处理质粒，但目的基因不用碱性磷酸酶处理，这样做的目的是__________________________． 如果要检测目的基因 是否成功表达，须提取培养后大肠杆菌的______________ ， 用相应_____________________检测。

高二生物非选择题中等难度题查看答案及解析

为探究SHH基因与角化囊肿发生的相关性，科研人员利用SHH基因的非模板链转录合成的RNA作为探针，进行分子杂交实验，以检测SHH基因在角化囊肿中的表达情况。其基本流程如下图：(ampr表示氨苄青霉素抗性基因；LacZ基因被SHH基因插入后不表达)

请回答：

(1)重组载体中SHH基因转录合成RNA探针时，________(填“需要”或“不需要”)启动子。

(2)步骤②中，用Ca2＋处理大肠杆菌，使之成为______细胞，然后导入重组载体。实验中，用添加氨苄青霉素的培养基培养大肠杆菌，未导入质粒的细菌将会死亡，原因是这些细菌不含有______基因。

(3)能表达LacZ基因的大肠杆菌在含有IPTG和Xgal的培养基上会形成蓝色菌落，易于识别。根据上述原理可以初步判断________(填“蓝色”或“白色”)菌落中的大肠杆菌为重组菌。

(4)将制备的探针加入角化囊肿切片中，探针将与____________________形成杂交带，进而判断SHH基因的转录情况。

高二生物综合题困难题查看答案及解析

为探究SHH基因与角化囊肿发生的相关性，科研人员利用SHH基因的非模板链转录合成的RNA作为探针，进行分子杂交实验，以检测SHH基因在角化囊肿中的表达情况。其基本流程如下图(Amp表示氨苄青霉素抗性基因；LacZ基因被SHH基因插入后不表达)。

请回答：

(1)重组载体中SHH基因转录合成RNA探针时，________(填“需要”或“不需要”)启动子。

(2)步骤②中，用Ca2＋处理大肠杆菌，使之成为________细胞，然后导入重组载体。实验中，用添加氨苄青霉素的培养基培养大肠杆菌，未导入质粒的细菌将会死亡，原因是这些细菌不含有________基因。

(3)能表达LacZ基因的大肠杆菌在含有IPTG和X­gal的培养基上会形成蓝色菌落，易于识别。根据上述原理可以初步判断____(填“蓝色”或“白色”)菌落中的大肠杆菌为重组菌。

(4)将制备的探针加入角化囊肿切片中，探针将与__________形成杂交带，进而判断SHH基因的转录情况。

高二生物非选择题困难题查看答案及解析