近年来，随着抗虫转基因水稻研究的进一步发展，世界各地实验室在抗虫转基因水稻研究方面均有收获...

近年来，随着抗虫转基因水稻研究的进一步发展，世界各地实验室在抗虫转基因水稻研究方面均有收获，抗虫转基因水稻检测与鉴定随之成为众多科学家的关注点。回答下列问题：

（1）抗虫转基因水稻就是利用转基因技术将从苏云金芽孢杆菌中发现的Bt基因导入水稻的受体细胞中，使其在水稻细胞内表达并遗传，使水稻自身产生抗虫蛋白，进而形成抗虫的新型水稻品种，转基因技术的操作是_________________________________水平上的操作。

（2）抗虫转基因水稻检测的主要内容是检测转基因生物的DNA上是否插入了目的基因、_____________、检测目的基因是否翻译成蛋白质，其中第二种检测采用的是__________技术。

（3）Southern印迹杂交技术通常被用来鉴定外源基因在抗虫转基因水稻中的整合情况，其基本原理是首先用___________酶将水稻基因组酶切消化，标记_________________片段为探针备用，然后将消化的基因组DNA与标记好的探针在杂交膜上进行杂交，包含目的基因的基因组片段与探针会出现__________________________。

（4）在个体生物学水平的鉴定中，试纸条法是将含有特异性______________________（填“抗原”或“抗体”）的提取液交联到试纸条有颜色的物质上，当纸上________________（填“抗原”或“抗体”）和水稻细胞蛋白提取液中特异___________________（填“抗原”或“抗体”）结合之后，再与特异的带有颜色的物质进行反应，于是就在试纸条上出现了三明治状的色带。

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为增加玉米抗旱性，研究者构建含有某微生物抗旱基因E的重组质粒，采用农杆菌转化法转入玉米幼胚组织细胞中，用E蛋白的抗体进行抗原-抗体杂交检测后，经进一步鉴定，筛选出抗旱的转基因玉米。下列相关叙述不正确的是（　　 ）

A. 提取该微生物mRNA反转录为cDNA，通过PCR可获得大量目的基因

B. 将重组质粒置于经CaCl2处理的农杆菌悬液中，可获得转化的农杆菌

C. 用农杆菌转化法将E基因转入玉米幼胚组织细胞需要严格无菌操作

D. 用E蛋白的抗体进行抗原-抗体杂交，可在个体水平检测转基因玉米的抗旱性状

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请回答基因工程和胚胎工程方面的问题：

(1)利用基因工程可以获得转基因牛，从而改良奶牛的某些性状。基因工程的四个基本操作步骤是________，基因表达载体的构建，_________和目的基因检测与鉴定。

(2)某研究所为了使获得的转基因牛分泌的乳汁中含有人干扰素，将人干扰素基因整合到适合的载体，现将该基因表达载体导入受体细胞所采用的方法是_________，为获得能大量产生人干扰素的转基因牛，该基因表达载体应导入的受体细胞是_________。

(3)在胚胎工程的操作中，冲卵实质上是用特定装置，将供体母牛子宫内的_________冲洗出来；最适合做胚胎移植的时期是胚胎发育的____________。

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研究人员发现玉米品种甲的3号染色体上具有抗病基因B，7号染色体上具有粒重基因S，而某突变体玉米品种乙的染色体相应位置均为隐性基因。将甲、乙杂交，F1自交，收获F2，随机选取148株玉米进行基因鉴定，各基因型个体数如下表。

（1）上述两对等位基因是否都遵循分离定律？____________；判断的理由是_____________。这两对基因_________（遵循/不遵循）自由组合定律。

（2）研究发现，F2群体中BB、Bb、bb基因型个体的数量比总是1：7：6。研究人员推测“F1产生的雌配子育性正常，而带有B基因的花粉成活率很低。”请设计杂交实验检验上述推测，并写出支持上述推测的子代性状及数量比。_________________________________________________。

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研究证实，位于小鼠X染色体上的MECP2基因突变会使小鼠神经系统功能异常，丧失运动控制能力。 进一步实验发现，患病小鼠神经系统中控制躯体运动的基因结构是正常的，但检测不到该基因的表达产物。当科学家给患病小鼠注人MECP2基因的表达产物后，小鼠恢复了正常活动能力。下列相关叙述中正确的是

A.MECP2基因在性染色体上，因此该基因只存在于生殖细胞中

B.雄性小鼠只有一条X染色体，表达MECP2基因的机会更多

C.患病小鼠运动异常是MECP2基因突变使神经系统发育不良

D.通过导入可正常表达的MECP2基因的方法也能治患病小鼠

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研究证实，位于小鼠X染色体上的MECP2基因突变会使小鼠神经系统功能异常，丧失运动控制能力。科学家进一步实验发现，患病小鼠神经系统中控制躯体运动的基因结构是正常的，但检测不到该基因的表达产物当科学家给患病小鼠注人MECP2基因的表达产物后，小鼠恢复了正常活动能力。下列相关的叙述中正确的一项是（　　 ）

A.小鼠的MECP2基因在性染色体上，只在生殖器官中表达

B.雄性小鼠只有一条X染色体，表达MECP2基因的机会更多

C.患病小鼠运动异常是MECP2基因突变使神经系统发育不良

D.通过导入能正常表达的MECP2基因的方法也可治疗患病小鼠

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水稻是我国最重要的粮食作物。水稻育种一方面要利用基因组育种技术和基因编辑技术，加快水稻功能基因组研究成果向育种应用的转化，另一方面要重视发掘新的重要基因，为设计育种提供“元件”。我国水稻遗传育种经历的3次大飞跃，离不开矮秆基因、核不育基因、抗虫基因等许多重要基因资源的发掘和利用。请回答下列问题：

（1）科研人员在自交系A水稻田中发现一株矮化的突变体，通过自交保种发现，后代均表现为矮秆，说明此矮秆突变体为_____。将此矮秆突变体分别在我国多个地区进行种植，发现株高、产量表现稳定。根据矮秆突变体的性状表现，科研人员认为矮秆突变体具有较高的应用价值，理由是_____(至少写出两点)。

（2）为研究水稻核基因B的功能，科研人员将T-DNA插入B基因中，致使该基因失活， 失活后的基因记为b。以野生植株和突变植株作为亲本进行杂交实验，统计母本植株的结实率，结果如下表所示。

表中数据表明，B基因失活使_____配子育性降低。若用杂交①的F1(作父本)给杂交②的F1 (作母本)授粉，预期母本植株的结实率为_____，所获得的F2植株的基因型及比例为_____

（3）科研人员将苏云金芽胞杆菌的Bt毒蛋白基因导入水稻细胞获得抗虫水稻，并筛选出 细胞核中含有两个抗虫基因的个体。请用筛选出的转基因水稻设计一个杂交实验，进一步确定细胞核中两个抗虫基因的相对位置 ___________。(简要写出实验方法，并预测实验结果及结论)

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水稻是我国最重要的粮食作物。水稻育种一方面要利用基因组育种技术和基因编辑技术加快水稻功能基因组研究成果向育种应用的转化，另一方面要重视发掘新的重要基因，为设计育种提供“元件”。我国水稻遗传育种经历的3次大飞跃，离不开矮秆基因、核不育基因、抗虫基因等许多重要基因资源的发掘和利用。请回答下列问题：

（1）科研人员在自交系A水稻田中发现一株矮化的突变体，通过自交保种发现，后代均表现为矮秆，说明此矮秆突变体为________。将此矮秆突变体分别在我国多个地区进行种植，发现株高、产量表现稳定。根据矮秆突变体的性状表现，科研人员认为矮秆突变体具有较高的应用价值，理由是________________（至少写出两点）。

（2）为研究水稻核基因B的功能，科研人员将T-DNA插入B基因中，致使该基因失活，失活后的基因记为b。以野生植株和突变植株作为亲本进行杂交实验，统计母本植株的结实率，结果如下表所示。

表中数据表明，B基因失活使________配子育性降低。若用杂交①的F1（作父本）给杂交②的F1（作母本）授粉，预期母本植株的结实率为________，所获得的F2植株的基因型及比例为________。

（3）科研人员将苏云金芽胞杆菌的Bt毒蛋白基因导入水稻细胞获得抗虫水稻，并筛选出细胞核中含有两个抗虫基因的个体。请用筛选出的转基因水稻设计一个杂交实验，进一步确定细胞核中两个抗虫基因的相对位置_______________。（要写出实验方法并预测实验结果及结论）

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某科研小组利用基因型为Aa的普通二倍体玉米（2N=20），人工诱导得到了同源四倍体玉（植株A），从收获的同源四倍体玉米穗中随机抽取10个穗子，统计完全成熟的粒数并求其结实率如下表所示，为进一步研究同源四倍体玉米的遗传特性，该小对植株A进行了如图甲所示的系列实验。请回答下列问题：

　　　　　　　　　　　 同源四倍体玉米结实率统计表

（1）获得同源四倍体玉米的育种方式为___________，据上表数据分析可知该育种方式的局限性为___________。

（2）基因重组能够发生在图甲所示过程___________（填标号）中。

（3）为观察同源四倍体玉米细胞中染色体的情况，可取植株A中部分组织，进行___________、制片后进行镜检。若发现染色体出现如图乙所示的异常情况，推测该过程发生在___________时期。在过程③中，最多能观察到染色体数目为___________，可观察到四分体___________个。

（4）假设四倍体玉米所有花粉母细胞的染色体都能两两配对成功并平均分配，则植株B中杂合子所占比例为___________。野生型果蝶为红眼长翅的纯合子，卷翅和紫眼是在果蜗中较常见的突变体,其基因

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某科研小组利用基因型为Aa的普通二倍体玉米（2N=20)，人工诱导得到了同源四倍体玉米（植株A)，从收获的同源四倍体玉米穗中随机抽取10个穂子，统计完全成熟的粒数并求其结实率如下表所示，为进一步研究同源四倍体玉米的遗传特性，该小对植株A进行了如图甲所示的系列实验。请回答下列问题：

同源四倍体玉米结实率统计表

（1）获得同源四倍体玉米的育种方式为________，据上表数据分析可知该育种方式的局限性为_________。

（2）基因重组能够发生在图甲所示过程__________（填序号）中。

（3）为观察同源四倍体玉米细胞中染色体的情况，可取植株A中部分组织，进行______、制片后进行镜检。若发现染色体出现如图乙所示的异常情况，推测该过程发生在________时期。在过程③中，最多能观察到染色体数目为_________，可观察到四分体__________个。

（4）假设四倍体玉米所有花粉母细胞的染色体都能两两配对成功并平均分配，则植株B中杂合子所占比例为___________。

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